大鼠腎虛型椎間盤軟骨終板退變病證結合模型的構建與評價

夏炳江，沈興潮，胡松峰，韋金忠，許楊

(紹興市中醫院，浙江 紹興 312000)

軟骨終板(cartilage endplate，CEP)退變被認為是椎間盤退變(intervertebral disc degeneration，IDD)的始動因素[1-2]，研究CEP退變可為早期防治IDD提供新的理論依據。中醫學認為“腎虛”為腰痛的關鍵病機[3]，補腎中藥治療與IDD相關的疾病具有獨特優勢[4]，但要進一步探討其作用機制或對其有效性和安全性進行驗證，尚需進行大量的動物實驗。病證結合動物模型以疾病模型為基礎，具有較好的可靠性和穩定性，同時引入“證候”概念，能很好體現中醫“證候”的階段性及動態性變化，是研究中醫臨床疾病的良好平臺和載體[5]。目前，在CEP退變的研究領域尚缺乏適宜于中醫藥研究的病證結合動物模型。本文擬通過切除大鼠雙側卵巢并結合阻斷CEP營養供應法而構建腎虛型CEP退變病證結合動物模型，以進一步研究病與證之間的內在規律。

1 材料與儀器

1.1 實驗動物12周齡SPF級雌性SD大鼠108只，體質量(200±20)g，由浙江中醫藥大學動物實驗中心提供，實驗動物許可證號：SYXK(浙)2008-0115。所有大鼠普通顆粒飼料喂養，自然光照，自由進食進水。實驗方案通過醫院醫學倫理委員會審查通過。

1.2 實驗儀器與試劑組織脫水機(日本櫻花公司)，輪轉式切片機(德國Leica公司)，熒光定量聚合酶鏈反應(polymerase chain recation，PCR)儀(美國ABI公司)，普通PCR儀(德國Eppendorf公司)，多光譜小動物活體成像儀(美國Carestream Health公司)，Micro-CT(瑞士Scanco Medical AG公司)，反轉錄試劑盒(大連TaKaRa公司)，定量試劑盒(大連TaKaRa公司)，PCR引物[生工生物工程(上海)股份有限公司]。

2 方 法

2.1 動物分組與造模將108只大鼠，按隨機區組設計原則，隨機分為空白組、CEP退變模型組和病證結合模型組，每組36只。……