王明喜,張麗霞,王長平
(安陽市中醫院,河南 安陽 455000)
膝骨關節炎(knee osteoarthritis,KOA)是一種以膝關節軟骨退變和損傷為主要病理特征的慢性退行性疾病,臨床主要表現為膝關節疼痛、腫脹、功能障礙等[1-2]。該病好發于老年人,嚴重影響患者的生活質量[3]。修復受損的軟骨是治療KOA的主要方法[4],臨床采用膝關節腔注射透明質酸等藥物治療KOA,在一定程度上能夠緩解膝部疼痛、改善膝關節活動度,然而對于軟骨損傷修復效果甚微[5-9]。中藥在修復軟骨損傷方面表現出一定的優勢,馬錢子常用于治療骨關節炎,能夠促進軟骨損傷修復,臨床療效顯著[10-12]。馬錢子的主要有效成分是馬錢子總生物堿,其修復軟骨損傷的作用機制尚不明確。為了探討馬錢子總生物堿修復KOA軟骨損傷的效果及作用機制,我們建立了大鼠KOA模型,并進行了相關實驗研究,現總結報告如下。
1.1 實驗動物12周齡SPF級雄性SD大鼠,體質量(220±10)g,購自廣東省科學院健康醫學研究所,實驗動物許可證號:SYXK(粵)2018-0183。實驗方案通過醫學動物實驗倫理委員會批準。
1.2 實驗試劑木瓜蛋白酶(上海阿拉丁生化科技股份有限公司),蘇木精伊紅(hematoxylin and eosin,HE)染色試劑盒、放射免疫沉淀法(radioimmunoprecipitation assay,RIPA)緩沖液、苯甲基磺酰氟(phenylmethylsulfonyl fluoride,PMSF)、牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)和二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白濃度測試試劑盒(上海碧云天生物技術有限公司),馬錢子總生物堿(麗珠集團利民制藥公司),塞來昔布膠囊(美國輝瑞公司),戊巴比妥鈉(上海信裕生物科技有限公司),福爾馬林(濟南百博生物技術股份有限……