二甲雙胍對阿爾茨海默病大鼠的療效及機制研究

王健蓉， 許 毅， 劉 斌， 劉奕杉

阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是老年人最為常見的神經退行性疾病，因其明顯的大腦葡萄糖和能量代謝損傷，亦被稱為“3型糖尿病”[1]。而二甲雙胍是一種廣泛應用于2型糖尿病的治療藥物。由此我們推測，二甲雙胍在AD患者的治療中可能具有很大的潛力，而目前尚缺乏相關研究報道。

AD的典型病理特征是細胞外β淀粉樣蛋白(Amyloid β peptide，Aβ)沉積和神經元胞漿中tau蛋白過度磷酸化導致的神經元纖維纏結(Neurofibrillary Tangles，NFTs)[2]。 tau蛋白的磷酸化主要由糖原合成激酶3β(glycogen synthase kinase 3β，GSK3β)參與調控[3]。而GSK3β的活性又受磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase，PI3K)/蛋白激酶B(Protein kinase B，PKB/AKT)的影響[4]。

本研究擬采用二甲雙胍對AD模型大鼠進行干預，通過Morris水迷宮和Western blot等方法，觀察該藥物對AD模型大鼠學習記憶能力的治療效果，并基于“PI3K-AKT-GSK3β-tau磷酸化”信號通路，探討二甲雙胍可能的作用機制，以期為AD患者尋找更為安全有效的臨床治療藥物。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組 50只健康成年雄性SD大鼠(體質量約240～280 g)，均由成都達碩實驗動物有限公司提供，生產許可證號：SCXK(川)2020-030。全部大鼠飼養于自然光照的SPF級飼養室(溫度25 ℃，濕度60%～70%)，自由進食、飲水。通過Morris水迷宮實驗測試，剔除掉可能天生癡呆及不會游泳的大鼠后(詳見1.3 動物模型制備)，按照隨機數字表法將全部大鼠隨機分為正常組、假手術組、模型組和治療組，每組各12只。所有操作均遵循《關于善待實驗動物的指導性意見》的相關規定。

1.2 主要儀器與試劑 Morris水迷宮(RWD公司)；酶標儀、低溫離心機(Thermo公司)；電泳儀、電泳槽、凝膠成像儀(Bio-Rad公司)；切片機、光學顯微鏡(Leica公司)；……