急性心肌梗死患者血清LncRNA?Hotairm1表達及其臨床意義

徐明

【摘要】目的：探究急性心肌梗死（AMI）患者清LncRNA Hotairm1表達及其臨床意義。方法：選取2019年12月到2020年9月我院收治的AMI患者45例作為研究組，選取同期45例健康者作為對照組。比較兩組清LncRNA Hotairm1、cTnI及CK-MB水平差異，分析LncRNA Hotairm1對AMI的診斷價值。結果：研究組LncRNA Hotairm1相對表達量明顯高于對照組（P<0.01）; LncRNA Hotairm1與AMI患者cTnI及CK-MB水平均呈正相關（r=0.391、0.432，P<0.001）;ROC曲線分析顯示，LncRNA Hotairm1診斷AMI的曲線下面積為0.745，靈敏度為78.89%，特異度為89.25%。結論：AMI患者LncRNA Hotairm1表達明顯升高，對AMI具有一定的診斷價值。

【關鍵詞】急性心肌梗死;LncRNA Hotairm1; 診斷

【中圖分類號】R542.22 【文獻標識碼】A 【DOI】

Expression of lncrna hotairm1 in serum of patients with acute myocardial infarction and its clinical significance

Xu Ming

（Heart Electrophysiology Room of Cangzhou People’s Hospital， Cangzhou， Hebei 061000）

【Abstract】Objective： To investigate the expression of lncrna hotairm1 in serum of patients with acute myocardial infarction （AMI） and its clinical significance. Methods： 45 patients with AMI treated in our hospital from December 2019 to September 2020 were selected as the study group， and 45 healthy people in the same period were selected as the control group. The levels of lncrna hotairm1， cTnI and CK-MB were compared between the two groups， and the diagnostic value of lncrna hotairm1 in AMI was analyzed. Results： the relative expression of lncrna hotairm1 in the study group was significantly higher than that in the control group （P<0.01）; Lncrna hotairm1 was positively correlated with cTnI and CK-MB levels in patients with AMI （r=0.391，0.432，P<0.001）; ROC curve analysis showed that the area under the curve of lncrna hotairm1 in the diagnosis of AMI was 0.745， the sensitivity was 78.89%， and the specificity was 89.25%. Conclusion： the expression of lncrna hotairm1 is significantly increased in patients with AMI， which has certain diagnostic value for AMI.

【Key words】 acute myocardial infarction; LncRNA Hotairm1; diagnosis

急性心肌梗死（AMI）是臨床常見和嚴重的心血管疾病，由于AMI極易出現充血性心力衰竭和惡性心律失常，患者死亡率極高[1]。雖然溶栓和經皮冠狀動脈介入治療 （PCI）的廣泛應用已顯著改善了 AMI 患者的預后，但仍有許多患者由于AMI 病因不明，最終發展為心力衰竭或心律失常[2]。因此，在積極探索AMI早期診斷的新型、高靈敏度和特異性的生物標志物對挽救患者生命及改善預后至關重要。Hotairm1位于人類hoxa1和hoxa2基因之間，被認為可能是髓系的特異性非編碼RNA[3]。最近的研究發現Hotair在膿毒癥小鼠心肌細胞中顯著上調，在心力衰竭患者中則下調[4-5]。但其他心血管疾病中的表達水平和作用尚未被探討。本研究旨在測定AMI患者清LncRNA Hotairm1的變化，探究其對AMI的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2019年12月到2020年9月我院收治的AMI患者45例作為研究對象，所有患者均符合AMI診斷標準[6]：缺血癥狀、心肌肌鈣蛋白I（cTnI）和肌酸激酶-MB（CK-MB）表達增加以及病理性Q波;所有AMI患者均為首次確診，發病至入院時間<4h，入院直接行PCI治療。

將AMI患者作為研究組，另選取同期45例健康者作為對照組。各組年齡、性別、體重等一般臨床資料比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究經我院倫理學會批準進行。

1.2 方法

1.2.1樣本采集

研究組患者在入院后立即通過直接靜脈穿刺采集外周靜脈血（5mL）至含檸檬酸鈉的試管中，并以1000g離心5min;然后提取清部分，轉移至不含RNase/DNA酶的試管中，并在-80℃下儲存待測。對照組患者按照同樣的方法采集外周靜脈血樣本。

1.2.2LncRNA Hotairm1表達檢測

使用Trizol試劑（Invitrogen）從血清樣本中提取總mRNA，并使用帶有轉錄子第一鏈cDNA合成試劑盒（Roche）的oligo（dT）引物合成cDNA。使用SYBR Green PCR Master Mix（Applied Biosystems）進行定量擴增。使用MuLV逆轉錄酶（TransGen，批號：AT101-02）和引物構建反應體系，反應體積為20μl，采用U6表達作為內對照測定LncRNA Hotairm1相對表達含量。

1.3 觀察指標

（1）兩組清LncRNA Hotairm1表達、cTnI及CK-MB水平比較;（2）AMI患者LncRNA Hotairm1與AMI患者cTnI及CK-MB水平相關性;（3）LncRNA Hotairm1對AMI的診斷效能。

1.4 統計學方法

采用SPSS23.0進行統計學分析，計量資料用均數±標準差（x±s）描述，行t檢驗，相關性分析采用Pearson相關性分析，受試者P<0.05特征工作曲線（ROC）用于分析LncRNA Hotairm1對AMI的診斷價值。以P<0.05為比較差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清LncRNA Hotairm1表達、cTnI及CK-MB水平比較

研究組LncRNA Hotairm1相對表達量明顯高于對照組，cTnI及CK-MB水平明顯高于對照組，比較差異具有統計學意義（P<0.01）。見表1。

2.2 LncRNA Hotairm1對AMI的診斷價值

相關性分析結果顯示，LncRNAHotairm1表達與AMI患者cTnI及CK-MB水平均呈正相關（r=0.391、0.432，P<0.001）。而ROC曲線分析結果顯示，LncRNAHotairm1診斷AMI的曲線下面積為0.745，靈敏度為78.89%，特異度為89.25%。

3 討論

長鏈非編碼RNA（lncRNA）是長度大于200的核苷酸。隨著基因分子生物學研究的深入，成千上萬的lncRNA被證實參與了各種生物學過程，包括細胞生長、分化、細胞增殖和凋亡[7]。近年來國內外越來越多的研究顯示，循環lncRNA，包括心臟、血管和肌肉特異性的lncRNA可作為多種心血管疾病的新型生物標志物[8-9]。Vausort等人的研究確定了5種lncRNA在AMI患者血液中的表達水平發生了巨大變化，其可能對AMI患者的預后具有重要預測價值[10]。有研究顯示CoroMarker在心血管疾病患者中呈現出穩定性、敏感性和特異性，因此血清lncRNACoroMarker水平已被認為是診斷冠狀動脈疾病的新型生物標志物[11]。此外，循環lncRNAUCA1水平也被確定為AMI預后的潛在新型生物標志物[12]。這些研究說明在心血管疾病中，循環lncRNA的圖譜發生了改變，提示其作為心血管疾病，尤其是AMI的分子診斷和預后生物標志物具有巨大潛力。

Hotair是lncRNA Hox的反義非編碼RNA，是從Hoxc位點轉錄的2.2kb lncRNA。Hotairm1位于人類hoxa1和hoxa2基因之間，被認為是一種髓系特異性非編碼RNA[2]。之前有研究表明Hotair在膿毒癥小鼠心肌細胞中顯著上調[2]。而在肺癌中，Hotairm1被發現呈低表達，且晚期患者Hotairm1表達明顯低于早期患者[13]。但zhang等[14]的研究發現，Hotairm1在心肌細胞分化過程中呈過表達，提示該基因可能在心血管系統中也具有特定的作用，但并未對該作用進行明確。可見，lncRNA Hotairm1可能在不同疾病中具有不同的表達特點及作用。

本研究通過檢測AMI患者血清lncRNA Hotairm1表達水平發現，與健康者相比，AMI患者lncRNA Hotairm1表達明顯升高，且lncRNA Hotairm1表達與患者cTnI及CK-MB水平均呈正相關（r=0.391、0.432），提示lncRNA Hotairm1在AMI發病中具有重要作用。通過進一步ROC曲線分析結果顯示，LncRNA Hotairm1診斷AMI的曲線下面積為0.745，靈敏度為78.89%，特異度為89.25%，說明LncRNA Hotairm1對AMI具有診斷作用，是AMI早期診斷的潛在生物標志物。

綜上所述，AMI患者LncRNA Hotairm1表達明顯升高，是AMI早期診斷極具潛力的循環生物標志物，值得臨床進一步深入研究，明確其在AMI中的作用機制。

參考文獻：

[1]季潤青， 余苑， 李靜. 急性心肌梗死指南推薦治療在我國應用現狀[J]. 中國循證心血管醫學雜志， 2020， 12（2）：127-129.

[2] Sacco L D ，? Baldassarre A ，? Masotti A . Bioinformatics Tools and Novel Challenges in Long Non-Coding RNAs （lncRNAs） Functional Analysis[J]. International Journal of Molecular Sciences， 2012， 13（1）.

[3] Lu G ，? Yuan L ，? Guo S ， et al. Circulating Long Noncoding RNA HOTAIR is an Essential Mediator of Acute Myocardial Infarction[J]. Cellular Physiology & Biochemistry International Journal of Experimental Cellular Physiology Biochemistry & Pharmacology， 2017， 44（4）：1497.

[4]林浩， 崔金帥， 李勇男，等. 長鏈非編碼RNA與心血管疾病關系的研究進展[J]. 山東醫藥， 2019， 59（5）：93-96.

[5]Hai-Xi， Sun， Nam-Hai， et al. Bioinformatics Approaches to Studying Plant Long Noncoding RNAs （lncRNAs）： Identification and Functional Interpretation of lncRNAs from RNA-Seq Data Sets.[J]. Methods in molecular biology （Clifton， N.J.）， 2019， 1933（15）：197-205.

[6]季潤青， 余苑， 李靜. 急性心肌梗死指南推薦治療在我國應用現狀[J]. 中國循證心血管醫學雜志， 2020， v.12（02）：127-129.

[7]李思維. 長鏈非編碼RNA（lncRNA）在癌癥中的作用[J]. 實用腫瘤學雜志， 2019， 33（5）：471-475.

[8] Kumarswamy R ，? Bauters C ，? Volkmann I ， et al. Circulating long noncoding RNA， LIPCAR， predicts survival in patients with heart failure[J]. Circulation Research， 2014， 114（10）：1569-1575.

[9]王勇，王賢恩，雷玉華.長鏈非編碼RNA在急性心肌梗死中的研究進展[J].中西醫結合心腦血管病雜志， 2019， 17（3）：388-390.

[10] Long noncoding RNAs in patients with acute myocardial infarction[J]. Circulation Research， 2014， 115（7）：668-677.

[11]Yang Y ，Cai Y，Wu G， et al.Plasma long non-coding RNA， CoroMarker， a novel biomarker for diagnosis of coronary artery disease[J]. Clinical Science， 2015， 129（8）：675-685.

[12]Yan Y，Zhang B，Ning L，et al.Circulating Long Noncoding RNA UCA1 as a Novel Biomarker of Acute Myocardial Infarction[J]. BioMed Research International， 2016，（34）：1-7.

[13]瞿磊、嚴文軍、賀升文、賀茂俊. 血漿LncRNA-HOTAIRM1表達水平與肺癌發病風險的關聯分析[J]. 當代醫學， 2020， 583（32）：12-17.

[14] Zhang X ， Lian Z ， Padden C ， et al. A myelopoiesis-associated regulatory intergenic noncoding RNA transcript within the human HOXA cluster.[J]. Blood， 2009， 113（11）：2526-34.