生長分化因子11對高糖環境中人甲狀腺乳頭狀癌K1細胞凋亡的影響

游 艷，田蕭羽，曾 浪，黨瑞杰，曾邦兵，朱 彪，李云霞

與非糖尿病患者相比，糖尿病患者的甲狀腺癌發生率更高[1, 2]。高血糖是甲狀腺癌發生、發展的一個獨立危險因素[3]，有研究發現，高血糖能夠促進人甲狀腺乳頭狀癌K1細胞的增殖并抑制其凋亡[4,5]。生長分化因子11(growth differentiation factor 11, GDF11)是近年來發現的一種具有“返老還童”作用的生長因子，它能改善2型糖尿病小鼠胰島素抵抗，改善胰島β細胞功能、增加β細胞數量并緩解糖尿病的大血管病變及微血管病變等并發癥[6-8]。但是，GDF11對高糖環境下甲狀腺癌的作用尚不清楚。細胞凋亡過低可導致腫瘤的發生，而誘導細胞凋亡是腫瘤治療的一種有效手段[9]。因此，本研究以在高糖環境中培養的人甲狀腺乳頭狀癌K1細胞為研究對象，初步探討GDF11對高糖環境下人甲狀腺乳頭狀癌K1細胞凋亡的影響及其作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗材料、試劑與儀器 人甲狀腺乳頭狀癌K1細胞株(武漢巴菲爾生物科技有限公司)，重組人GDF11蛋白(北京百奧萊博公司)，葡萄糖(美國Sigma公司)，低糖DMEM培養基、胎牛血清(美國Gibco公司)，胰酶、青霉素及鏈霉素(美國Sigma公司)，B淋巴細胞瘤2(B-cell lymphoma 2, Bcl-2)抗體(貨號：AF6139，稀釋比例:1∶1000；美國Affinity公司)、Bcl-2相關X蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)抗體(貨號：Ab32503，稀釋比例:1∶3000；英國Abcam公司)、β-actin 抗體(貨號：BM0627，稀釋比例為1∶200；武漢博士德公司)及山羊抗兔二抗(美國Cell Signaling Technology公司)；活性氧(reactive oxygen species, ROS)檢測試劑盒及反轉錄試劑盒(南京建成科技有限公司)；BCA(bicinchoninic acid)測定試劑盒(武漢博士德公司)；Trizol試劑盒(北京艾德萊生物公司)；PVDF(polyvinylidene fluoride)膜(美國Millipore公司)。

SW-CJ-1FD型二氧化碳恒溫培養箱(蘇州集團安泰……