臺州地區不同年齡人群的維生素D營養現況調查

蔡鶯鶯　石慶新　周秋菊　陳佳喜　沈莉萍　陸如岳　王冬蓮

[關鍵詞] 維生素D;高效液相色譜;營養現況;不同年齡

[中圖分類號] R153.2? ? ? ? ? [文獻標識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2021）18-0133-05

Investigation on the status quo of vitamin D nutrition of people in different ages in Taizhou area

CAI Yingying1，2? ?SHI Qingxin1，2? ?ZHOU Qiuju1，2? ?CHEN Jiaxi1，2? ?SHEN Liping1，2? ?LU Ruyue3? ?WANG Donglian1，2

1.Department of Clinical Laboratory， Taizhou Hospital of Zhejiang Province，? ?Linhai 317000， China; 2.Department of Clinical Laboratory， Enze Hospital of Taizhou Enze Medical Center （Group），? Taizhou 318053， China; 3.Department of Clinical Laboratory， Luqiao Hospital of Taizhou Enze Medical Center （Group），? Taizhou 318053， China

[Abstract] Objective To understand the status quo of vitamin D nutrition of people in different ages in Taizhou area，and to find out the main people with vitamin D poverty， so as to provide necessary scientific basis for the follow-up prevention and treatment of vitamin D poverty. Methods A total of 17815 cases of serum samples of vitamin D detected by high performance liquid chromatography combined with tandem mass spectrometry sent to and examined in Enze Hospital of Taizhou Enze Medical Center （Group） from August 2017 to December 2019 were analyzed retrospectively.They were divided into the neonate group， the infant group， the child group， the teenager group， the youth group， the middle-aged group and the elderly group according to their ages. Results The vitamin D level of the total population was 23.31 （17.98-29.59） ng/mL.The levels of vitamin D in the neonate group， the infant group， the child group， the teenager group， the youth group， the middle-aged group and the elderly group were 17.39 （14.21-29.91） ng/mL， 35.08 （29.71-41.41） ng/mL， 26.41 （21.91-31.45） ng/mL， 20.61（16.81-24.43） ng/mL， 21.59 （16.22-28.71） ng/mL， 22.61 （17.77-27.45） ng/mL and 22.12 （16.98-27.81） ng/mL， respectively， with statistically significant differences in different age groups （P<0.01）.In the assessment of status of vitamin D nutrition， vitamin D poverty accounted for 6.16%， deficiency accounted for 27.96%， and normal accounted for 65.88%， mainly with the normal serum content of vitamin D.In all age groups， the neonate group was the most poverty， the youth group and the teenager group were the second， and the middle-aged group and the elderly group were the third.There were statistically significant differences in status of vitamin D nutrition in different age groups （P<0.05）. Conclusion The vitamin D level in patients of Taizhou area is mainly normal， but vitamin D poverty with different degrees exists in different age groups except for the infant group， especially in the neonate group， the youth group and the teenager group.

[Key words] Vitamin D; High performance liquid chromatography; Status quo of nutrition; Different ages

維生素D是一種重要的類固醇激素，廣泛參與了人體骨代謝、心血管系統、免疫系統、神經系統、代謝性疾病、感染性疾病和腫瘤的調控[1-5]。維生素D在體內的充足水平，與以上相關疾病風險呈負相關[1-5]。25-羥基維生素D是血液中維生素D的主要循環形式，穩定性好，是公認的評價人體維生素D營養狀況的可靠指標[6]。2020年5月6日，國家衛健委發布了衛生行業標準WS/T677～2020[6]，并于2020年11月1日起實施，該標準明確了人群維生素D營養狀況判定指標及參考判定值。因此，參考新行業標準，有必要對臺州地區不同年齡層的人群維生素D營養狀況進行調查分析。

本研究對臺州地區2017年8月至2019年12月送檢到恩澤醫療中心（集團）恩澤醫院的血清標本17 815例，采用高效液相色譜串聯質譜法檢測維生素D，有助于了解臺州地區各年齡層中維生素D的營養現況，為后續防治維生素D缺乏提供科學依據，也為相關疾病的營養狀況評估提供新的參考。

1 資料與方法

1.1資料來源

收集2017年8月至2019年12月間在臺州地區的三家醫院（浙江省臺州醫院、臺州恩澤醫療中心（集團）恩澤醫院、路橋醫院）就診的，并集中送檢到恩澤醫療中心（集團）恩澤醫院進行維生素D檢測的血清標本17 815例，已剔除重復送檢的標本。

1.2儀器和試劑

儀器：ABI3200MD型高效液相色譜串聯三重四級桿質譜儀（AB SCIEX，Singapore）。試劑：25-羥基VD2/VD3萃取液（衍生化法）試劑盒（浙江迪賽思診斷技術有限公司）。

1.3方法

1.3.1年齡分組? 將標本根據年齡分為7組，具體分組和例數如下：新生兒組（1 d～1月）18例、嬰兒組（2月～1歲）1821例、兒童組（1～6歲）1595例、少年組（7～17歲）2236例、青年組（18～40歲）4757例、中年組（41～65歲）5390例、老年組（≥66歲）1998例。

1.3.2 維生素D的檢測

1.3.2.1血清樣品前處理 采集血液，待血液凝固，以4℃ 3000 r/min離心10 min分離血清。吸取血清樣品200 μL于2 mLEP管中，加入50 μL內標工作液;再加入萃取試劑（乙腈）400 μL，渦旋1 min;再加入1.2 mL正己烷，渦旋10 min，然后14000 r/min離心5 min;取離心后的上清液，在氮氣下吹干。將60 μL衍生化試劑工作溶液加入到吹干后的殘渣中，渦旋1 min。50℃下反應30 min，室溫冷卻后加入40 μL乙醇終止反應，渦旋1 min，氮氣吹干;殘渣用100 μL復溶液復溶，渦旋10 min，然后14000 r/min下離心5 min，吸取20 μL倒進樣瓶中，用ABI3200MD型高效液相色譜串聯三重四級桿質譜儀（AB SCIEX，Singapore）分析。

1.3.2.2標準工作樣品前處理 向6個2 mLEP管中各加入190 μL磷酸鹽緩沖液工作溶液，依次向每個管中分別加入50 μL的內標和10 μL的標準工作溶液1～6 μL，混勻。加入萃取試劑（乙腈）400 μL，渦旋1 min;以下步驟同血清樣品前處理。

1.3.2.3質控樣品前處理 吸取質控樣品200 μL于2 m LEP管中，加入50 μL內標工作液;向其中加入萃取試劑（乙腈）400 μL，渦旋1 min;以下步驟同血清樣品前處理。

1.3.2.4工作條件參數? 色譜條件：色譜柱：Gemini C18（50×2 mm，5 μm）;其中流動相A為水（含0.1%甲酸），B為甲醇（含0.1%甲酸），流速：0.1 mL/min;進樣量：10 μL。質譜條件：電噴霧電離源（ESI），正離子模式;選擇多反應監測模式分析;氮氣作為碰撞氣和輔助氣，噴霧氣60 psi、氣簾氣20 psi、加熱溫度400 ℃，GAS2 60 psi，離子帶電5500 V，入口電壓9 V，碰撞能量28 V，碰撞出口電壓4 V。

1.3.2.5維生素D的樣本分析 打開軟件Queue Manager，檢查樣品隊列。待儀器平衡好，點擊Acquire菜單中的Start Sample按鈕開始樣品分析。結束后打開Quantitation Wizard（定量分析導航器）分析數據，獲得血清維生素D的檢測值。

1.3.3維生素D的營養評估 根據行業標準WS/T 677～2020[6]判定如下：<12 ng/mL為缺乏;12～20 ng/mL為不足;≥20 ng/mL為正常。

1.4統計學分析

應用SPSS 22.0統計學軟件進行分析，正態分布的連續變量以均數±標準差（x±s）表示。偏態分布的數據以中位數和四分位數間距表示，計數資料以[n（%）]表示，組間比較采用Pearson卡方檢驗，等級資料采用秩和檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1不同年齡組中維生素D水平的比較

臺州地區2017年8月至2019年12月送檢到恩澤醫療中心（集團）恩澤醫院的血清標本17815例中，男6922例（38.85%），女10891例（61.15%）;維生素D總水平為23.31（17.98～29.59）ng/mL。維生素D在新生兒組、嬰兒組、兒童組、少年組、青年組、中年組和老年組水平分別為17.39（14.21～29.91）ng/mL、35.08（29.71～41.41）ng/mL、26.41（21.91～31.45）ng/mL、20.61（16.81～24.43）ng/mL、21.59（16.22～28.71）ng/mL、22.61（17.77～27.45）ng/mL和22.12（16.98～27.81）ng/mL，各占比0.10%、10.22%、8.95%、12.55%、26.70%、30.26%和11.22%。其中，檢測人群以中年組最多，青年組次之，新生兒組最少。采用正態性檢驗，除新生兒組外，其余各組均呈偏態分布（P<0.10）;因而采用秩和檢驗，各年齡組間差異有統計學意義（P<0.01）。按維生素D水平從高到低排序依次為嬰兒組>兒童組>中年組>老年組>青年組>少年組>新生兒組。見表1。

2.2不同年齡組維生素D營養狀況的比較

在總檢測人群中，維生素D缺乏占6.16%（1097例）、不足占27.96%（4981例）、正常占65.88%（11737例），以維生素D血清含量正常為主。比較各年齡組維生素D營養狀況，維生素D水平正常組中以嬰兒組占比最高，達97.58%（1777例）;新生兒組最低，占33.33%（6例）。維生素D不足組和缺乏組中均以新生兒組占比最高，分別是44.44%（8例）和22.22%（4例）;以嬰兒組最低，分別是2.20%（40例）和0.22%（4例）。維生素D正常組按比例從高到低分別是嬰兒組>兒童組>中年組>老年組>青年組>少年組>新生兒組;維生素D不足組與缺乏組基本一致，只少年組發生維生素D不足的比例更高。見表2。采用Pearson卡方檢驗比較不同年齡組的維生素D營養狀況，各年齡組間差異有統計學意義（P<0.05）。總體來說，除嬰兒組外，其余各組都有不同程度的維生素D缺乏;以新生兒組最為缺乏，青少年組其次，再次之是中老年組。

3討論

維生素D的檢測方法有質譜法和免疫法。質譜法的優勢在于高通量，有標準測量程序，可精確區分25-羥基維生素D代謝物;劣勢在于未常規用于臨床樣本分析，非自動化且儀器復雜、昂貴，無法區分3-epi-25-羥基維生素D的異構體[7]，存在檢測值偏高的可能性。免疫法的優勢在于高靈敏度，需要的標本量少，自動化;劣勢在于存在與其他維生素D代謝物的交叉反應，測量需要維生素D結合蛋白的參與[8-10]，測量準確度不高。本研究采用高效液相色譜串聯質譜法檢測25-羥基維生素D，結果更精確，能檢出更低含量的維生素D，臨床指導意義更大。

Hajar Mazahery等[1]研究報道，維生素D缺乏癥在美國、澳大利亞和新西蘭的患病率為27%～32%。本研究顯示臺州地區總檢測人群中維生素D缺乏、不足和正常分別占6.16%、27.96%和65.88%，與報道基本一致。喬璐莎等[11]報道，329例住院治療中新生兒維生素D水平為（14.21±12.05）ng/mL，正常、不足、缺乏、嚴重缺乏分別占22.19%、6.38%、54.71%、16.72%。王昌燕[12]等報道，西安市582例新生兒出生后24 h內血清維生素D平均水平為（11.2±3.2）ng/mL，其中不足、缺乏和嚴重缺乏的合計占比96.70%。耿立蒙等[13]報道，山東省濱州地區2771例嬰幼兒（0～3歲）25-羥基維生素D水平為（36.27±9.09）ng/mL，缺乏、不足比率分別為4.5%、20.9%。高鳳英等[14]報道，河北省三河市600例兒童中，正常、不足、缺乏、嚴重缺乏分別占68.5%、19.8%、8.8%、2.8%。李晶等[15]報道，嘉興市338名健康嬰兒維生素D正常、不足、缺乏分別占99.70%、0.30%、0%。張正超等[16]報道，簡陽地區0～1歲組兒童維生素D正常、缺乏分別占比61.55%、38.45%;2～6歲組兒童維生素D正常、缺乏分別占比68.60%、31.40%。本研究中新生兒組維生素D水平為17.39±3.18（14.21～29.91）ng/mL，正常、不足、缺乏分別占33.33%、44.44%、22.22%;嬰兒組維生素D水平為35.08（29.71～41.41）ng/mL，正常、不足、缺乏分別占97.58%、2.20%、0.22%;兒童組維生素D水平為26.41（21.91～31.45）ng/mL，正常、不足、缺乏分別占84.33%、14.67%、1.00%。人體中維生素D的來源約90%由表皮和真皮層的7～脫氫膽固醇經紫外線照射轉變而來[2，16-17]，10%來自天然食物攝取。新生兒無法通過皮膚經紫外線照射轉變，主要來自母體，因此維生素D缺乏比例最高。而嬰兒組由于當地經濟、生活水平較高，父母普遍比較重視，保證足夠的維生素D攝入，因此維生素D正常比例最高。此外，1歲以后的嬰幼兒往往以兒童奶粉代替母乳，而兒童奶粉維生素D平均水平要低于母乳，加之隨著兒童年齡增加，存在厭食、挑食、偏食的情況[18]。因而，在兒童組維生素D正常比例又有所下降。

張正超等[16]報道，簡陽地區7～12歲組維生素D缺乏、正常分別占比69.91%、30.09%。陳京蓉等[19]報道，重慶市6～17歲青少年維生素D缺乏、不足分別占比9.32%、61.27%。本研究中少年組（7～17歲）維生素D缺乏、不足和正常分別占6.26%、39.22%和54.52%。這是因為青少年處于生長發育的快速時期，營養需求增長較快，同時又有課業壓力導致戶外運動時間相對減少，是維生素D缺乏的高危人群[18]。本文中青年組（18～40歲）維生素D缺乏、不足和正常分別占9.17%、33.40%和57.43%;中年組（41～65歲）維生素D缺乏、不足和正常分別占5.81%、30.20%和63.99%。兩者因為是社會的中堅力量，工作、美容等因素導致戶外紫外線照射時間不足，也存在約40%的維生素D缺乏和不足。有趣的是，維生素D檢測人群以中年組為主，其次是青年組，表明這兩個人群的健康意識比較高。

李海俠等[10]報道的全國多家中心臨床大數據顯示，羅氏檢測分析老年人群維生素D缺乏率、不足率和正常率分別是40.04%、31.92%和28.04%;新產業檢測分析老年人群維生素D缺乏率、不足率和正常率分別是68.81%、24.18%和7.01%。本文中老年組（≥66歲）維生素D缺乏、不足和正常分別占9.21%、30.28%和60.51%。存在差異的原因在于不同地區緯度不同，光照時長、強度都有所不同;各地區經濟水平不同也影響維生素D的膳食補充。總的來說，老年人因生理機能下降，外源轉化減弱，維生素D缺乏比較普遍。

維生素D不足和缺乏組都以新生兒組的比例最高，以嬰兒組最低。而吳依然等[2]報道，維生素D低水平與兒童多種感染性疾病相關;而補充維生素D可減少冬季流感的發生率。肖培等[20]報道的前瞻性隊列研究顯示，兒童期維生素D水平越低，TC、LDL～C和非HDL～C異常的發生風險越高，而充足的維生素D水平可能有助于心血管疾病的早期預防。但是，人體對補充的維生素D制劑反應各異，受地理、季節、日照時間、疾病、藥物、年齡、BMI/體脂率等多種因素影響[1]。維生素D不足，可通過日曬和吃富含維生素D食品進行補充，服用過量則存在中毒風險。因此，需要遵醫囑選擇不同劑量維生素D制劑進行補充，臨床醫生也需要關注患者維生素D營養狀況。

本研究的局限性在于研究中收集的新生兒組例數相對不足，結果可能存在一定的偏差;其次，這是一項回顧性分析，文中只初步分析了不同年齡人群的維生素D營養現狀，與特定疾病的相關性研究正在進行中，有待進一步的證實。

[參考文獻]

[1] Mazahery H，Von Hurst PR.Factors Affecting 25-Hydro-xyvitamin D Concentration in Response to Vitamin D Supplementation[J].Nutrients，2015，7（7）：5111-5142.

[2] 吳依然，張敏，崔明明，等.維生素D與兒童感染性疾病相關性及其抗感染機制研究[J].中國感染控制雜志，2020，19（11）：1037-1041.

[3] 胡詠新，范堯夫，鄭仁東，等.維生素D與糖代謝[J].中華骨質疏松和骨礦鹽疾病雜志，2019，12（3）：298-302.

[4] 高玲，袁天，陳代娣，等.維生素D與代謝性炎癥的研究進展[J].生命科學，2019，31（10）：1060-1068.

[5] 張明君，楊繼紅.維生素D的新認識[J].中國全科醫學，2018，21（20）：2395-2399.

[6] 中華人民共和國國家衛生健康委員會.WS/T 677-2020人群維生素D缺乏篩查方法[S].北京：中國標準出版社，2020.

[7] Ogawa S，Kittaka H，Nakata A，et al.Enhancing analysis throughput，sensitivity and specificity in LC/ESI-MS/MS assay of plasma 25-hydroxyvitamin D by derivatization with triplex 4-（4-dimethylaminophenyl）-1，2，4-triazoline-3，5-dione （DAPTAD） isotopologues[J].J Pharm Biomed Anal，2017，136：126-133.

[8] Davide Ferrari，Giovanni Lombardi，Giuseppe Banfi.Concerning the vitamin D reference range：pre-analytical and analytical variability of vitamin D measurement[J].Biochem Med （Zagreb），2017，27（3）：1-14.

[9] 巫志宇，陳鳴.維生素D的實驗室檢測及推廣應用之思辨[J].中華檢驗醫學雜志，2017，40（11）：844-847.

[10] 李海俠，龔美亮，鄧新立，等.中國老年人維生素D水平多中心調查分析[J].中華檢驗醫學雜志，2021，44（1）：39-44.

[11] 喬璐莎，丁學星，畢凌云.住院治療中新生兒維生素A、D、E水平單中心現況調查[J].中國兒童保健雜志，2020， 28（4）：451-455.

[12] 王昌燕，蔣銀萍，裴懷騰.西安市582例新生兒維生素D營養現狀調查及相關因素分析[J].公共衛生與預防醫學，2020，31（1）：142-144.

[13] 耿立蒙，耿立軍，高文婷，等.嬰幼兒維生素D營養狀況及影響因素分析[J].中國現代醫生，2020，58（16）：13-16.

[14] 高鳳英，李立新，趙淑靜，等.三河市0-6歲兒童維生素D營養狀況調查[J].檢驗醫學與臨床，2020，17（1）：97-99.

[15] 李晶，趙蔚，劉惠娟，等.嘉興市2017—2019年兒童脂溶性維生素水平分析[J].中國學校衛生，2020，41（9）：1391-1392.

[16] 張正超，李毓龍，賀臘，等.2019年簡陽地區兒童維生素D營養狀況調查[J].醫學信息，2020，33（11）：131-133.

[17] 陳燕媚，周繼昌.維生素D對免疫系統作用機制的研究進展[J].營養學報，2020，42（3）：301-307.

[18] 黃佟莉，董尚勝，張淑琨，等.江門地區0-6歲營養不良兒童25-羥維生素D水平調查及影響因素研究[J].中外醫學研究，2020，18（15）：77-79.

[19] 陳京蓉，趙怡楠，張潔，等.重慶市部分區縣6-17歲兒童青少年維生素D營養狀況及相關因素分析[J].現代預防醫學，2021，48（1）：50-54.

[20] 肖培，趙小元，洪偉，等.兒童維生素D營養狀況與心血管代謝異常關系的前瞻性隊列研究[J].中華流行病學雜志，2020，41（12）：2059-2065.

（收稿日期：2021-02-02）