不同消毒劑對乙肝病毒污染胃鏡病毒滅活率的影響

劉 淇，范亞碩，潘 靜

(鄭州大學附屬南陽市中心醫院 河南南陽473000)

據不完全統計，全世界范圍內乙型肝炎病毒(HBV)感染人數約為20億且呈不斷上升趨勢，已成為廣泛流行的感染疾病之一[1]。由于HBV是一種嗜肝病毒，故乙肝患者肝臟可能存在不同程度的損傷，嚴重影響其身心健康和生活質量[2]。消化內鏡多內腔狹窄且結構復雜，其診療過程中難以避免地與患者血液、體液接觸，繼而發生污染造成院內感染，HBV作為腸外傳播性肝炎，很可能通過消化道內鏡傳播[3]。因此，對消化內鏡及其附件的清洗和消毒成為該儀器使用后的關鍵環節，也是各類病原體在院內發生交叉感染的有效預防途徑[4]。但目前，關于消毒劑和消毒方法的選擇標準尚未統一，尋找一種快速簡單、效果良好的消毒液并加以推廣迫在眉睫[5]。基于此，本研究選擇700條被HBV感染患者污染的胃鏡作為研究對象，分別給予酸性氧化電位水、戊二醛、鄰苯二甲醛三種消毒劑進行消毒，旨在比較三種消毒劑對HBV病毒的滅活率。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2018年1月1日～2020年12月31日700例感染HBV且接受胃鏡檢查的患者為研究對象。納入標準：①患者經檢查血清HBV表面抗原陽性；②患者均接受胃鏡檢查；③患者或家屬知曉本研究目的及內容，簽署知情同意。排除標準：①合并重度肺炎、艾滋病、丙型病毒肝炎者；②不愿配合本研究者。收集700條胃鏡，按照隨機數字表法分為A組233條、B組233條、C組234條。三組一般情況比較差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 試劑及儀器 ①清洗劑：進口全效多酶清洗劑。②消毒劑：A組-含500 mg/L氯化鈉軟化水點解后生成的酸性氧化電位水(pH值2.4～2.7，氯有效含量40～50 mg/L)；B組-鄰苯二甲醛消毒液(濃度5500 mg/L)；C組-戊二醛消毒液(濃度20 g/L)。③中和劑：甘氨酸溶液，濃度10 g/L；硫代硫酸鈉磷酸鹽緩沖液，濃度5000 mg/L。④乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)試劑盒、PCR擴增儀及其配套的ABI7500熒光定量擴增儀；乙型肝炎病毒核酸陽性血清由該醫院臨床提供，含量106～107 IU/ml。

1.2.2 清洗及消毒方法 ①初洗：將活送氣送水按鈕、吸引器按鈕及檢入口閥門取下，使內鏡置于清洗槽，并以流動水沖洗后采用紗布擦拭鏡身，紗布為醫用一次性紗布；用胃鏡清洗刷對吸引器管道及活檢孔道進行一次刷洗，兩端均可看到刷頭，保證刷頭污物洗凈，清洗刷使用一次消毒一次；將全管道灌流器與其連接，采用壓水槍沖洗活檢管道與送氣送水管道，保持清洗時間2.5 min。②酶洗：采用多酶清洗液(35～40 ℃)浸泡內鏡，通過注射器使多酶沖洗液對活檢管道與送氣送水管道進行沖洗；浸泡2 min后采用高壓水槍對各管道進行有效沖洗，以流動水中采用紗布對內鏡表面沖洗，并沖氣至各管道，使管道水分排出，酶洗時間3 min。③消毒：取消毒液浸沒胃鏡，采用注射器將消毒液灌滿，戊二醛、鄰苯二甲醛、酸性氧化電位水分別為10 min、5 min、5 min。④漂洗：將內鏡放入沖洗槽，采用注射器將空氣注入各管腔，將內腔消毒液去除，操作中應戴無菌手套；采用堿水紗布將外表擦拭干凈，通過注射器抽吸堿水沖凈殘留消毒液；內鏡置于其他消毒液浸泡，通過紗布清洗內鏡外表，保持高壓水槍多次沖洗各孔道，保護時間2 min。⑤干燥：準備干燥臺，將內鏡置于其中，用無菌紗布擦拭表面，并通過高壓氣槍吹干各孔道水分，保持時間1 min，共3組消毒液。

1.3 觀察指標 ①標本采集：分別在清洗前、清洗后、消毒后對表面與內腔標本進行收集。外表面標本采集時用無菌棉簽蘸濕生理鹽水多次涂刷鏡身前端，將棉簽放進生理鹽水試管中，充分混勻后取洗脫液進行無菌檢查。內腔標本采集時將活檢孔道中注入生理鹽水或中和劑5 ml，將沖洗液收集放進無菌試管中檢查。清洗前后通過無菌生理鹽水取樣，消毒后則為中和劑。②病毒檢測：在全部標本采集后有效時間內采用熒光定量PCR法進行檢測，檢測步驟嚴格按照PCR擴增儀、HBV-DNA試劑盒執行。比較三組清洗前后HBV-DNA平均含量、清洗后胃鏡病毒清除率、消毒前后胃鏡表面病毒滅活率及胃鏡內腔病毒滅活率。

1.4 統計學方法 雙人雙次采用SPSS 23.0統計學軟件分析數據。計數資料以百分比表示，采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組清洗前后HBV-DNA平均含量比較 見表1。

表1 三組清洗前后HBV-DNA平均含量比較(IU/ml)

2.2 三組清洗后胃鏡病毒清除率比較 A組胃鏡表面病毒清除率99.64%，胃鏡內腔病毒清除率99.99%；B組胃鏡表面病毒清除率99.31%，胃鏡內腔病毒清除率99.99%；C組胃鏡表面病毒清除率99.58%，胃鏡內腔病毒清除率99.99%。三組清洗前后HBV-DNA清除率均高于99.00%，且比較差異無統計學意義(P>0.05)。

2.3 三組消毒前后胃鏡表面病毒滅活率比較 見表2。

表2 三組消毒前后胃鏡表面病毒滅活率比較

2.4 三組消毒前后胃鏡內腔病毒滅活率比較 見表3。

表3 三組消毒前后胃鏡內腔病毒滅活率比較

3 討論

胃鏡在消化道疾病診斷中發揮較大作用，具有高準確性、高成效等優勢，但胃鏡屬于侵入性診療手段，會造成病原微生物以內鏡為傳播路徑影響患者健康[6]。目前，國內構建標準化機制監測內鏡檢測檢查，但由于病原體潛伏期較長，關于內鏡檢查造成交叉感染的研究較少。楊陽等[7]研究指出，國內醫院消化道內鏡檢查后消毒合格利率較低，為70%左右，最常見的病原菌為金黃色葡萄球菌、鮑氏不動桿菌等。國內消化道內鏡清洗消毒情況有待提高，應規劃科學的清洗消毒方案，并使用有效的消毒制劑[8]。肝臟是機體重要的代謝器官，承擔葡萄糖的分解、貯存與血糖調節的作用[9]。采用HBV-DNA檢測判斷HBV的復制水平，評估病毒處于活動或復制期。HBV屬于嗜肝病毒，在活動期狀態下，增強機體病毒感染時的炎癥反應應答，促進IN-2、IL-10等炎性因子分泌，造成炎性反應，引發炎性細胞過度浸潤及肝細胞壞死，導致肝細胞功能受損[10]。同時，HBV復制活躍狀態下會消減糖原合成酶的合成，阻礙攝取、利用葡萄糖。HBV感染可能造成胰腺細胞受損，因HBV感染導致胰腺分泌細胞損害，引發胰島素分泌水平降低及抵抗增強，最終血糖值變高[11]。

本研究采用標準手工清洗流程處理污染后的消化內鏡，可有效減少外表與內腔殘留病毒，其中內腔與表面病毒清除率分別超過99.99%與99.00%。胃鏡管腔為細長狹小狀，長期使用可能由于消毒劑腐蝕及細菌生物膜覆蓋，造成內腔凹凸不平，導致乙肝病毒附著，若未完善清洗消毒，在胃鏡診療中會造成其他患者感染，形成交叉感染。影響胃鏡清洗消毒效果的因素較多，包括人員因素、清洗消毒劑與清洗用具的選擇等[12]。臨床工作需要根據規章標準操作，在清洗內腔時需選擇適宜用具，如在手工清洗軟鏡時需反復刷洗，并采用高壓水槍持續沖洗[13]。本研究清洗后胃鏡外表病毒殘留較內腔多，因此工作人員在操作中應加強清洗外表面，可使用一次性醫用無菌紗布或結合實際情況使用海綿刷等。

目前，多數醫療機構采用全效多酶清洗劑，對于大多醫療器械均達到較好的清洗效果，但內鏡與人體消化系統接觸，選用消化酶清洗劑能否達到有效清洗的目的，仍有待證實。選擇酶液清洗時需遵循一鏡一換的原則，采用浸泡式進行清洗[14]。清洗乙肝患者的胃鏡時應使用單獨的用具與清洗槽，在清洗前、消毒后均單獨放置，并對清洗用具有效清洗消毒。本研究三組采取不同消毒劑處理的胃鏡消毒后，胃鏡內腔病毒滅活率均達到100.00%(P>0.05)，酸性氧化電位水、鄰苯二甲醛對胃鏡表面病毒滅活率分別為92.08%、93.15%，均高于戊二醛(P<0.05)，但酸性氧化電位水、鄰苯二甲醛兩組間比較差異無統計學意義(P>0.05)，提示胃鏡內腔消毒時上述三種消毒液均可選擇，但選擇酸性氧化電位水和鄰苯二甲醛消毒胃鏡表面效果更佳。此外，戊二醛、鄰苯二甲醛同屬于以醛基聚合形式存在的醛類化合物，二者同濃度條件下鄰苯二甲醛自由基數量更多，故其效果優于戊二醛，臨床正逐漸替代戊二醛。

綜上所述，鄰苯二甲醛滅活乙肝病毒污染胃鏡表面病毒效果最佳，其次為酸性氧化電位水，戊二醛效果最差，三種消毒對胃鏡內腔病毒均有顯著滅活效果，在乙肝病毒污染的胃鏡清洗及消毒過程中，表面和內腔均不可忽視。