傳染性單核細胞增多癥合并多種病原體感染的臨床特點及淋巴細胞亞群變化特點分析

彭啟迪, 閆 波,胡 波, 夏遠航,袁麗萍

傳染性單核細胞增多癥(infectious mononucleosis,IM)是兒童時期常見的一種急性淋巴細胞增生性疾病，臨床上以發熱、咽峽炎、淋巴結腫大、眼瞼浮腫和肝脾腫大等為主要表現，嚴重者可引起多臟器功能受損。IM主要由EB病毒(

Epstein

-

Barrvirus

,EBV)感染導致，也有部分患兒合并巨細胞病毒(

Cytomegalovirus

,CMV)、肺炎支原體(

Mycoplasma

pneumoniae

,MP)、單純皰疹病毒(

Herpesimplex

virus

,HSV)、腺病毒(

Adenovirus

,ADV)等多種病原體感染。近年來，對IM的發病機制和機體免疫防御研究較多，但尚未完全闡明。該研究通過對IM合并多種病原體感染的臨床特點及淋巴細胞亞群變化特點進行分析，對該病的診療提供參考。

1 材料與方法

1.1 病例資料

選擇2018年1月—2020年12月安徽醫科大學第一附屬醫院兒科病區收治的IM患兒100例，根據病原體感染情況分為單純EBV感染組(53例)和多重感染組(47例)。單純EBV感染組包括男38例，女15例，年齡1～12 (4.37±2.05)歲。多重感染組包括男32例，女15例，年齡1～10 (4.89±2.34)歲。同時選取兒科門診健康體檢兒童80例作為對照組，包括男57例，女23例，年齡1～10 (4.44±2.35)歲。各組兒童性別、年齡差異無統計學意義。所有IM患兒均符合相關診斷標準。健康體檢兒童家屬簽署知情同意書，且該研究經醫院倫理會審核通過。

1.2 試劑與儀器

EBV抗體檢測試劑盒(深圳維潤賽潤生物技術有限公司,批號為20200901)；MP、CMV、HSV、ADV、呼吸道合胞病毒(

Respiratory

syncytial

virus

，RSV)、風疹病毒(

Rubella

, RV)、乙型流感病毒(

Influenza

B

virus

,IBV)等病原體IgM抗體檢測試劑盒(美國Becman公司，批號為P1101901001)；流式細胞儀(flow cytometry，FCM) (深圳亞輝龍公司，型號為IFLash3000-A)。

1.3 主要方法

1

.

3

.

1

檢測IM患兒病原體 抽取患兒靜脈血 2 ml，離心后取血清，使用ELISA法檢測患兒血清中EBV-VCA-IgM、EBV-NA-IgG和EBV-VCA-IgG抗體水平；另外使用ELISA法測定患兒血清中MP、CMV、HSV、ADV、RSV、RV、IBV等病原體IgM水平。

1

.

3

.

2

分析單純EBV感染組及多重感染組的臨床特點 用χ檢驗方法將2組患兒發熱、淋巴結腫大、脾腫大、咽峽炎、皮疹、眼瞼水腫等臨床特點發病率進行比較。

1

.

3

.

3

各組淋巴細胞亞群測定 抽取IM患兒和對照組兒童晨起2 ml空腹靜脈血,2 h內進行檢測。使用流式細胞儀檢測各組外周血CD3、CD4、CD8、NK淋巴細胞的表達水平。

2 結果

2.1 多重感染組病原體分布特征

多重感染組感染2種病原體28例(59.57%)，3種病原體15例(31.91%)，4種病原體3例(6.38%)，5種病原體1例(2.13%)。合并感染的病原體主要為MP 25例(53.19%)、CMV 20例(42.55%)。見表1。

表1 多重感染組病原體分布特征

2.2 單純EBV感染組和多重感染組的臨床特征比較

多重感染組比單純EBV感染組咽峽炎、脾腫大、肝功能損害發生率明顯增高，差異有統計學意義(

P

<0.01)，但2組發熱、淋巴結腫大、眼瞼水腫、皮疹發生率比較，差異無統計學意義。見表2。

表2 單純EBV感染組與多重感染組臨床特征比較[n(%)]

2.3 3組兒童外周血淋巴細胞亞群比較

多重感染組及單純EBV感染組CD3、CD8表達水平比對照組明顯增高，而CD4、CD4/ CD8明顯降低，且多重感染組較單純EBV感染組CD3、CD8水平顯著增高，CD4、CD4/CD8比值降低，差異有統計學意義(

P

<0.01)，而NK水平各組間無明顯差異。見表3。

表3 3組淋巴細胞亞群表達率比較

3 討論

IM主要由EBV感染造成的自限性病毒疾病。近年來，IM的發生率有所上升，且臨床癥狀更加復雜及隱秘，增加了臨床診斷的難度。IM患兒中還可同時感染除了EBV外的其他多種病原菌，進而影響患兒的臨床表現和預后。該研究分析了IM多重感染患兒的病原體分布特征。結果表明，大部分患兒為2種病原體感染且以CMV及MP為主要病原體。有研究表明合并呼吸道癥狀患兒易感染多重病原體是因為很多病原體可通過飛沫、糞口等途徑傳播。也有學者認為易產生多重病原體感染是由于患兒感染EBV后機體免疫力下降導致。該研究對單純EBV感染和多重病原體感染的IM患兒的臨床特點進行了比較，結果顯示多重感染的IM患兒比單純EBV感染的IM患兒咽峽炎、脾腫大、肝功能損害發生率高，而患兒發熱、淋巴結腫大、眼瞼水腫、皮疹無顯著性差異，這可能與病例選取有關。結果提示多重感染患兒在IM發展過程中，其他病原體和EBV協同引起機體免疫功能紊亂，通過不同的作用機制致使患兒臨床癥狀加重。這也從另一方面提示對臨床癥狀較重的IM患兒進行多種病原體檢測，將對臨床治療提供幫助。

目前IM的發病機制尚未完全闡明，但隨著免疫學的發展，IM的免疫失調機制越來越受到學者關注。在IM患兒中，EB病毒首先侵入咽喉部上皮細胞，進入人體血液中迅速與B淋巴細胞表面受體結合并在其內增值，引發T細胞防御反應，在CD4T細胞內發生磷酸化并激活信號轉導過程，通過分泌IL-2、IL-4、IL-21等細胞因子及激活CD4T、CD8T等細胞，然后CD8T細胞通過分泌穿孔素、γ干擾素、顆粒酶等導致細胞變性、凋亡，隨后激發強烈的免疫應答反應和機體免疫紊亂從而導致一系列臨床癥狀。該研究表明，與對照組相比，IM單純EBV感染組及多重感染組CD3、CD8T淋巴細胞計數明顯增高，而CD4T淋巴細胞顯著降低，CD4/CD8比值明顯下降，與高榮理 等報道一致。且IM多重感染組CD3、CD8T淋巴細胞表達量顯著高于單純EBV感染組，而CD4T淋巴細胞表達及CD4/CD8比值明顯低于單純EBV感染組。該研究還表明各組間NK細胞計數均無顯著性差異，與相關文獻報道一致。這提示該研究多重感染會進一步造成機體的免疫激活，在臨床上應當引起重視，避免患兒因免疫水平下降而機會性感染其他病原體。

綜上所述，IM患兒的病原體分布特點呈多樣性，主要為EBV合并MP、CMV的多重感染居多。IM多重感染患兒臨床癥狀比單純EBV感染患兒更嚴重。另外，IM多重感染患兒機體免疫反應更強烈，免疫功能更低下。這些都提示在臨床上對于病情較重的IM患兒，應盡快明確其病原體感染類型，為臨床救治提供參考。