美沙拉嗪結合錫類散灌腸治療潰瘍性結腸炎的效果及對患者免疫功能和細胞因子的影響

蔡 怡 賀明潔 羅培培

江蘇大學附屬武進醫院消化內科，江蘇常州 213000

潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種由多種原因引起的結腸慢性復發性炎癥。近年來，UC 在中國的發病率顯著增加。大多數患者具有復發性的特點，輕度和長期緩解的UC 患者預后良好，但慢性或復發性患者預后較差，病程較長的患者癌變概率較高[1]。腸道菌群主要參與腸道內物質的分解代謝，以維持正常的生理功能，當疾病發生時，腸道菌群的數量和類型會發生變化。腸道菌群失調是導致免疫反應紊亂和細胞炎癥反應的重要因素，而免疫反應紊亂和細胞炎癥反應是導致UC 的重要因素[2]。目前臨床上對UC 尚無有效的治療方法。中醫治療有其獨特的優勢，中西醫結合治療UC 具有廣闊的發展前景[3]。美沙拉嗪當前仍然是UC 的一線藥物，然而，研究發現，隨著使用時間的增加，其治療效果會下降，一些患者會出現明顯的胃腸道不適，嚴重甚至耐藥[4]。提高UC 患者的治療效果已成為一個非常重要的研究課題。錫類散是一種古方中成藥，國內研究已將其應用于UC 患者，療效顯著[5]。本研究選取在江蘇大學附屬武進醫院診治的76 例UC 患者作為研究對象，主要探討美沙拉嗪結合錫類散灌腸對UC 的療效，并分析此治療方式對患者免疫功能和細胞因子的影響，旨在為臨床UC 的治療提供一定的參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2021年1月在江蘇大學附屬武進醫院診治的76 例UC 患者作為研究對象，按隨機數字表法將其分為對照組和研究組，每組各38 例。對照組中，男19 例，女19 例；年齡23～55 歲，平均（30.17±2.06）歲；病程1～5年，平均（3.03±1.06）年。觀察組中，男17 例，女21 例；年齡23～56 歲，平均（30.24±2.17）歲；病程1.5～6年，平均（3.02±1.17）年。兩組患者性別、年齡、病程等一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經江蘇大學附屬武進醫院醫學倫理委員會審核及同意，所有患者均知曉本研究情況并簽署知情同意書。

納入標準：①患者均符合UC 診斷標準[6]；②所有患者的一般資料齊全；③主動配合研究者。排除標準：①合并嚴重基礎疾病者；②感染性腹瀉者；③伴有其他器質性腸病者；④凝血功能異常者；⑤妊娠和哺乳婦女；⑥有精神和認知障礙患者。

1.2 方法

對照組患者給予美沙拉嗪（葵花藥業集團佳木斯鹿靈制藥有限公司，國藥準字H19980148，生產批號：20170326，規格：0.25 g）1 g 口服，3 次/d。

研究組患者在對照組的基礎上給予錫類散（江蘇信邦制藥有限公司，國藥準字Z32020770，生產批號：20170624，規格：1 g）1.0 g 加入0.9%生理鹽水100 ml混勻，保留灌腸，每晚臨睡前1 次，灌腸保留時間3～4 h，連用3 周，休息1 周。

兩組患者的療程均為8 周，治療期間禁止使用其他治療UC 的藥物。注意補充高熱量、高蛋白、易消化的食物，不吃冷、辣、刺激性食物，確保足夠的休息時間。

1.3 觀察指標及評價標準

1.3.1 臨床療效評價 參照《炎癥性腸病診斷與治療的共識意見（2018年·北京）》[7]對兩組患者的臨床療效進行評價。顯效：癥狀消失，結腸鏡檢查結腸黏膜完全恢復正常；有效：癥狀明顯改善，結腸鏡檢查結腸黏膜輕度炎癥；無效：癥狀和結腸鏡檢查均無明顯改善。總有效率=（顯效+有效）例數/總例數×100%。

1.3.2 免疫指標 采集所有患者清晨抗凝靜脈血5 ml，由檢驗科使用CyFlow Cube6 流式細胞儀（廣州吉源生物科技有限公司）檢測患者的輔助性T 細胞（helper T cells，Th17）和調節性T 細胞（regulatory T cell，Treg）、T 細胞亞群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）、自然殺傷細胞（natural killer cell，NK）水平，采用BS-220 全自動生化分析儀（南京貝登醫療股份有限公司）以免疫比濁法檢測免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）A、IgG、IgM 水平。試劑盒均購自上海瑞番生物科技有限公司，嚴格按試劑盒說明書操作。

1.3.3 細胞因子 取所有患者清晨空腹外周靜脈血5 ml，4℃，轉速為2000 r/min，離心半徑為10 cm，離心10 min，于-70℃保存待測。觀察比較兩組患者治療前后的血清白細胞介素（interleukin，IL）10、IL-18、IL-6、IL-4、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的變化，通過酶聯免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）進行檢測，試劑盒購于上海西唐生物科技有限公司，嚴格按試劑盒說明書操作。

1.3.4 不良反應 觀察兩組患者治療期間的不良反應（腹部不適、惡心、納差）發生情況。

1.4 統計學方法

采用SPSS 26.0 統計學軟件進行數據分析，符合正態分布的計量資料用均數±標準差（±s）表示，兩組間比較采用獨立樣本t 檢驗，組內比較采用配對樣本t 檢驗；計數資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者臨床療效的比較

研究組患者的治療總有效率高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（表1）。

表1 兩組患者臨床療效的比較[n（%）]

2.2 兩組患者治療前后Th17、Treg 表達水平的比較

兩組患者治療前的Th17、Treg 表達水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；兩組患者治療后的Th17表達水平低于治療前，Treg 表達水平高于治療前，差異有統計學意義（P＜0.05）；研究組患者治療后的Th17表達水平低于對照組，Treg 表達水平高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（表2）。

表2 兩組患者治療前后Th17、Treg 表達水平的比較（%，±s）

表2 兩組患者治療前后Th17、Treg 表達水平的比較（%，±s）

對照組（n=38）治療前治療后t 值P 值研究組（n=38）治療前治療后t 值P 值t 治療前組間比較值P 治療前組間比較值t 治療后組間比較值P 治療后組間比較值5.89±1.23 4.21±1.02 6.481＜0.001 5.88±1.21 3.16±1.03 10.552＜0.001 0.036 0.970 4.465＜0.001 5.39±1.02 7.51±1.62 6.827＜0.001 5.40±0.22 8.62±1.42 13.814＜0.001 0.059 0.950 3.176＜0.001組別 Th17 Treg

2.3 兩組患者治療前后T 細胞亞群及NK 水平的比較

兩組患者治療前的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；兩組患者治療后的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平高于治療前，CD8+水平低于治療前，差異有統計學意義（P＜0.05）；研究組患者治療后的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平高于對照組，CD8+水平低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（表3）。

表3 兩組患者治療前后T 細胞亞群及NK 水平的比較（±s）

表3 兩組患者治療前后T 細胞亞群及NK 水平的比較（±s）

對照組（n=38）治療前治療后t 值P 值研究組（n=38）治療前治療后t 值P 值t 治療前組間比較值P 治療前組間比較值t 治療后組間比較值P 治療后組間比較值32.12±3.22 38.86±2.17 10.700＜0.001 32.09±3.17 44.52±3.02 17.501＜0.001 0.041 0.970 9.382＜0.001 34.26±2.09 31.06±2.17 6.547＜0.001 34.17±2.06 26.23±3.01 13.419＜0.001 0.189 0.850 8.024＜0.001 1.06±0.32 1.42±0.22 5.715＜0.001 1.07±0.31 1.92±0.22 13.784＜0.001 0.138 0.890 9.907＜0.001 10.35±2.01 13.68±2.06 7.132＜0.001 10.34±2.11 17.28±2.31 13.674＜0.001 0.021 0.980 7.170＜0.001組別 CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+ NK（%）

2.4 兩組患者治療前后免疫球蛋白水平的比較

兩組患者治療前的IgA、IgG、IgM 水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；兩組患者治療后的IgA、IgG、IgM 水平低于治療前，差異有統計學意義（P＜0.05）；研究組患者治療后的IgA、IgG、IgM 水平低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（表4）。

表4 兩組患者治療前后免疫球蛋白水平的比較（g/L，±s）

表4 兩組患者治療前后免疫球蛋白水平的比較（g/L，±s）

對照組（n=38）治療前治療后t 值P 值研究組（n=38）治療前治療后t 值P 值t 治療前組間比較值P 治療前組間比較值t 治療后組間比較值P 治療后組間比較值1.97±0.22 1.72±0.32 3.969＜0.001 1.99±0.32 1.34±0.23 10.168＜0.001 0.317 0.350 5.944＜0.001 12.49±0.26 10.36±0.36 29.568＜0.001 12.51±0.26 8.53±0.28 64.209＜0.001 0.335 0.740 24.735＜0.001 1.37±0.22 1.24±0.39 2.202 0.030 1.38±0.21 1.10±0.01 8.210＜0.001 0.203 0.840 2.212 0.030組別 IgA IgG IgM

2.5 兩組患者治療前后細胞因子水平的比較

兩組患者治療前的IL-10、IL-4、IL-18、IL-6、TNF-α 水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；兩組患者治療后的IL-10、IL-4 水平均高于治療前，IL-18、IL-6、TNF-α 水平均低于治療前，差異有統計學意義（P＜0.05）； 研究組患者治療后的IL-10、IL-4 水平均高于對照組，IL-18、IL-6、TNF-α 水平均低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（表5）。

表5 兩組患者治療前后細胞因子水平的比較（ng/ml，±s）

表5 兩組患者治療前后細胞因子水平的比較（ng/ml，±s）

對照組（n=38）治療前治療后t 值P 值研究組（n=38）治療前治療后t 值P 值t 治療前組間比較值P 治療前組間比較值t 治療后組間比較值P 治療后組間比較值10.85±2.17 15.22±3.06 7.181＜0.001 10.84±2.06 18.20±3.22 11.869＜0.001 0.021 0.980 4.135＜0.001 197.23±20.16 128.22±20.17 14.917＜0.001 198.16±20.22 88.26±10.16 29.938＜0.001 0.201 0.840 10.907＜0.001 275.23±30.13 176.25±20.17 16.828＜0.001 275.22±30.06 155.26±30.25 17.340＜0.001 0.001 1.000 3.559＜0.001 7.86±2.16 15.03±5.01 8.101＜0.001 7.87±2.09 20.22±5.13 13.743＜0.001＜0.001 1.000 4.462＜0.001 115.23±20.12 72.13±10.22 11.773＜0.001 114.17±20.06 56.27±10.26 15.841＜0.001 0.230 0.820 6.751＜0.001組別 IL-10 IL-18 IL-6 IL-4 TNF-α

2.6 兩組患者不良反應總發生率的比較

兩組患者的不良反應總發生率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）（表6）。

表6 兩組患者不良反應總發生率的比較[n（%）]

3 討論

UC 的發病機制尚不清楚。一些學者認為炎癥細胞因子的失衡是UC 發病的關鍵。促炎因子水平的升高會損傷腸黏膜并引起疾病，炎癥反應的程度與病情和預后有關。腸道免疫功能紊亂是UC 發生、發展的重要環節[8]。研究表明，腸黏膜受損后，其通透性增加，腸組織長期暴露于大量抗原，導致腸道免疫系統反應和誤認，激活巨噬和淋巴細胞，釋放細胞因子和炎癥介質，并使全身和局部免疫系統紊亂，組織受損而引發UC[9]。因此，可以從細胞因子和免疫功能兩方面入手，找到科學有效的治療方法，對提高UC 的臨床療效具有十分重要的臨床意義。

5-氨基水楊酸（5-aminosalicylic acid，5-ASA）是治療UC 的首選藥物。5-ASA 可抑制腸黏膜中前列腺素的合成和炎癥介質（如白三烯）的形成，具有抗炎作用，非常適合UC 患者。美沙拉嗪通過乙基纖維素包裹5-ASA，其pH 依賴性釋放微丸不易被胃酸分解，在胃內失效，在腸道堿性環境下釋放5-ASA，發揮其功效。因為其包含兩個5-ASA 分子，所以其比其他5-ASA 制劑具有顯著優勢[10]。錫類散主要由象牙屑、青黛、人工牛黃、冰片、珍珠、人指甲、壁錢炭等組成，具有清熱解毒、活血止痛、收斂傷口、祛除腐肉的功效[11]。有研究證實，錫類散能消除腸黏膜充血水腫，促進黏膜愈合[12]。

本研究結果顯示，研究組患者的治療總有效率高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），提示美沙拉嗪結合錫類散灌腸可提升UC 患者的臨床治療效果，分析原因：一方面，聯合用藥具有協同作用；另一方面，保留灌腸給藥藥效優于傳統灌腸方法。在免疫功能方面，本研究結果顯示，研究組患者治療后的Th17表達水平低于對照組，Treg 表達水平高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；研究組患者治療后的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平高于對照組，CD8+水平低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；研究組患者治療后的IgA、IgG、IgM 水平低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），提示美沙拉嗪結合錫類散灌腸可改善UC 患者的免疫功能。細胞因子方面，本研究結果顯示，研究組患者治療后的IL-10、IL-4 水平均高于對照組，IL-18、IL-6、TNF-α 水平均低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），提示美沙拉嗪結合錫類散灌腸可減輕炎癥反應，分析原因，改善腸道免疫功能和炎癥可能是美沙拉嗪結合錫類散灌腸的治療目標。美沙拉嗪和錫類散的抗炎作用通過抑制炎癥細胞因子的釋放，改善腸道炎癥環境，調節免疫細胞水平，糾正腸黏膜免疫功能紊亂[13]。美沙拉嗪可抑制UC 患者病原體繁殖，改善腸道炎癥，平衡腸道菌群，增強免疫力，顯著改善患者癥狀[14]。錫類散具有清熱解毒、去腐生肌的功效[3]。有研究認為，錫類散有助于提高Toll樣受體4 的表達和核轉錄因子κB 的激活水平，減少炎性細胞因子的釋放，抑制炎癥和免疫反應，修復黏膜和愈合潰瘍面[15]。另外，不良反應方面，本研究結果顯示，兩組患者的不良反應總發生率比較，差異無統計學意義（P>0.05），提示美沙拉嗪結合錫類散灌腸不會增加不良反應發生，安全性較高。

綜上所述，美沙拉嗪結合錫類散灌腸可提升UC患者的臨床治療效果，改善UC 患者的免疫功能，減輕炎癥反應，對免疫指標和細胞因子均產生不同程度的影響，且安全性較高。