金標法抗-HIV 測定在初篩檢測點中的應用價值

張忠貴 左莉

摘要：目的：運用在我院健康體檢人群進行HIV篩查，歸納總結出金標法抗-HIV檢測快速、高效、準確的測定價值。方法：用我院2020年03月—2021年03月期間接受健康體檢的1200例受檢者血液標本，用金標法檢測發現陽性的標本送縣疾控中心采用酶聯免疫法復檢，經復檢是陽性再送上級疾控中心用免疫印跡法確診試驗，確診陽性后返回信息納入管理。結果：金標法陽性率0.17%，酶聯免疫法復檢陽性率100%，兩種檢測方法的結果對比差異?。≒>0.05）。結論：金標法抗-HIV檢測效益高，操作簡單、成本廉價，對群體篩查檢測結果快速便捷，實用檢測點篩查檢測。

關鍵詞：金標法;抗—HIV;初篩檢測點;應用價值

【中圖分類號】F763 【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-9026（2022）06--01

艾滋病是由人體感染了人類免疫缺陷病毒引起一種的免疫缺陷類疾病，又叫獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），當HIV病毒侵入到人體免疫系統，直接攻擊人體的T淋巴細胞，導致機體免疫功能越來越差，呈現出高傳染性，其傳播方式多樣化、病死率高，對人類面臨著嚴峻的健康威脅。據報道，全球艾滋病已經造成3500多萬人喪命，我國艾滋病病毒攜帶者大約125萬例，發病率0.9%左右，增長趨勢明顯[1]。目前還未研究出艾滋病有效疫苗和特效治愈藥物，所以早篩查、早診斷是發現HIV病毒感染者的有效手段。我國已對HIV流行采取擴大篩查檢測和治療等多種措施，2021年全國約有1.43萬人接受HIV檢測，占總人口的10%左右，所以早篩查、早診斷能夠為預防和提供治療方案可靠依據，抑制病情惡化，爭取延長生存時間[2]。對此，本研究運用金標法對人群進行篩查，結合初篩陽性的進一步檢查，總結分析初篩檢查重要性，

1資料與方法

1.1臨床資料

從我院2020年03月—2021年03期間接受健康檢查的1200例受檢者血液標本，男女比例為550：650;年齡區間45～65歲，平均年齡（56.2±2.8）歲。納入標準：（1）全部人群均接受金標法檢測;（2）能表達自身實際需求，無溝通交流障礙，自愿參與本研究，簽訂知情同意書。以下方面排除篩查：（1）患有精神或心理疾病者;（2）合并惡性腫瘤、嚴重感染、肝腎功能不全者;（3）對治療和干預均不配合者。

1.2方法

抽取篩受檢者空腹靜脈血3～5mL，對其進行離心，分離處理，取上清液進行檢測，嚴格遵照無菌操作規范，確保血液標本不污染。

金標法：采用膠體金免疫技術和層析原理，定性檢測全血、血清或血漿樣本中的人類免疫缺陷病毒（HIV）1/2型抗體。選擇金標法檢測試劑盒（英科新創科技有限公司生產），按照試劑操作說明書開展檢測：將待測標本平行室溫編號，取出試條/卡從包裝中取出平衡至室溫，打開包裝平衡至室溫，用微量加樣器取60μL血清樣本，滴加到試劑加樣處，30分鐘內觀察并記錄實驗結果。 酶聯免疫吸附試驗（ ELISA ）：主要檢測流程為添加酶反應的底物?？h疾控中心選擇使用 Thermo MK3 全自動酶標儀及配套酶聯免疫試劑，嚴格按照說明書開展規范操作，檢測標準為波長（檢測波長 450nm，參考波長 630nm）A值。

用金標法檢測發現為陽性的標本，進行復查陽性的標本及時送縣疾控中心用酶聯免疫吸附試驗檢測，發現陽性再復查是陽性，迅速送上級疾控中心開展免疫印跡檢測確診試驗。在檢測過程中，嚴格按照實驗試劑及儀器相關操作說明開展實驗檢測，保證實驗結果的有效性和精準度。

1.3觀察指標

金標法：放置半小時內，肉眼觀察樣品。若測試條/卡在檢測線和對照線位置各出現一條（即兩條）紫紅色條帶可確定為陽性，但如檢測線紫紅色條帶隱約可見，建議重查或更換試劑復查;若試條/卡在對照線位置呈現出一條紫紅色條帶，那么結果可確定為陰性，并如實記錄。如試條/卡在對照線位置未呈現出紫紅色條帶應停止使用，查找原因。酶聯免疫吸附試驗：以A值為檢測標準，當A值≥1時，血樣檢測結果為陽性;若A值<1時，那么血樣檢測結果為陰性[3]。如實檢測兩種方法的實驗結果，對比分析。

1.4統計學分析

運用統計學軟件SPSS22.0行數據的分析處理，以率（%）表示計數資料，若P<0.05即表示差異有統計學意義。

2結果

對比分析兩種檢測方法檢測結果，在第一次檢驗中，1200例血清標本金標法檢測陽性例數2例，陽性率0.17%，立即復查2例陽性結果吻合，陽性率100%;;2例陽性標本送縣疾

控中心酶聯免疫法檢測陽性，陽性率100%。復查2例陽性標本結果吻合，陽性率100%，由縣繼2例陽性標本向上級疾控用免疫印跡確診2例陽性結果一致，確診陽性率為100%。通過統計學分析，兩組檢測方法結果差異不明顯（P>0.05），詳見表1。

3討論

艾滋病是全球感染性疾病，HIV病毒是誘發因素，HIV病毒可攻擊人體免疫系統，抑制CD4T淋巴細胞生長，導致人體漸漸失去了免疫功能，抵抗力差感染疾病而致死亡[4]。所以，在這一疾病影響下，人體感染其他疾病的風險高，并逐漸惡化成惡性腫瘤，病死率居高不下，成為了人類主要殺手之一。由于其傳播特征和死亡率高，艾滋病已是全球醫學攻克的難題，影響到社會的和諧與發展，已引起社會關注。隨著我國社會經濟高速發展，改革開放步伐加快，國外文化的引進與國內文化共同沖擊著傳統觀念，導致社會性觀念越來越開放，艾滋病患病率在持續增長。加之艾滋病病毒攜帶者潛伏期各不相同，部分還會合并罕見感染及腫瘤疾病，這是因為艾滋病人群免疫系統被嚴重破壞而導致，人體關鍵性免疫系統一旦被破壞，對于感染者便會是一種災難[5]。另外，因社會大眾對艾滋病整體上存在錯誤認知，導致患者內心承受巨大的痛楚與壓力，患上該疾病的患者往往難以啟齒，再加上該疾病初期癥狀不明顯，臨床診療難度較大，這也是造成很多確診艾滋病患者病情進一步惡化的原因，未及時得到接受管理治療，使得病死率持續增長。為了能夠有效防控艾滋病流行，我國已采取高效、便捷的篩查手段擴大檢測目標人群，及時發現潛在艾滋病感染人群，探索疫苗和有效藥物的研究，為HIV防治工作具有重要意義。

目前對于艾滋病診斷，主要采取HIV 抗體檢測方法（金標法、酶聯免疫吸附法、明膠顆粒凝集試驗、免疫熒光檢測法、免疫印跡蛋白印跡檢測法、放射免疫沉淀法等），其中，金標法是一種常見的初篩試驗檢測方法，靈敏性好、特異性高，操作便捷，快速、準確率較高，無需特殊設備 ，可用于批量檢測 ，也可用于少量標本的檢測 。有報告篩查試劑方法的不同其結果也有所差異 ，曾篩查試驗的假陽性率為 0.08 ～0.12，假陽性反應的原因可能是與篩查試劑敏感高及一些傳染病病原體和某些自身免疫性疾病患者自身抗原與HIV某些抗原決定簇有交反應有關[6-7]，假陽性標本存在于WB試驗抗體陰性與不確定標本中，且GICA顯色較弱 ，因此篩查弱陽性結果尤其要慎重，必須經確證試驗才能報告結果。 金標法檢測方法在短時間內可獲取結果，操作流程簡單，可迅速獲取準確的檢測結果，而酶聯免疫法則是以酶免疫測定原理為基礎，積極改良的一種新型技術，主要包括了雙抗原夾心法、間接法以及抗體競爭法三種類型，本次使用第三代雙抗原夾心法試劑檢測（萬泰公司提供）。

本次研究選取 1200例血清標品，采用金標法檢測，發現2例陽性患者，說明基層醫療機構設置HIV檢測點的必要性，實施金標法HIV檢測篩查是當前艾滋病防治的重要手段，中老年群體預防不能忽視。在本次抗 HIV檢測人群中，經過陽性率發金標法與酶聯免疫法的檢測陽性結果一致，說明金標法抗 HIV檢測可普及性，方法簡單，準確率高，通過統計學分析，兩種檢測方法結果未發現明顯差異（P>0.05）。當然兩種檢測方法具有較高的準確性，運用價值相對較高，值得在臨床推廣與使用。然而，兩種檢測方法均存在一定的優劣勢，作為常規篩查方法的金標法準確度高，操作便捷，經濟實惠，只需要使用金標試紙便可完成檢測，成本投入較低，且只需半小時便能夠獲取檢測結果，酶聯免疫檢測法則需要使用十分精密的儀器才可完成診斷，操作較為復雜，且成本投入較高，是艾滋病臨床診斷的基礎性方法，準確率較高，但有存在客觀影響因素，檢測需要時間較長。對于急診危急病人檢測不適用，甚則會延誤病人病情[8]。如急診手術會增加艾滋病傳播風險，所以，借助金標法可解決急診病人檢測的這種情況，讓臨床醫生掌握病情，科學判斷，科學合理制定治療方案?？傊?，金標法和酶聯免疫檢測法在抗HIV中準確率較高，相比之下金標法有很多優勢，節省成本，對診斷結果的客觀因素影響小，操作便捷，適合大范圍人群范圍篩查檢測，尤其是急診病人能及時解決檢測結果，可根據實際推廣使用。當然，也不能忽視金標法局限性，診斷特異性和敏感性應相對較低，這得在將來學者在臨床研究中怎樣提高金標法檢測特異性與敏感度是個深思考慮課題。目前，在大規模人群HIV篩查診斷方面，金標法抗HIV檢測是及時有效可行的方法，及時早發現病人，納入規范管理，為篩查出患者及時制定可行的方案，延長其生存價值。

綜上所述可見，金標法、酶聯免疫檢測法均具有較高準確性，然而金標法優勢更為明顯，檢測效益高，操作簡單、成本廉價、操作簡單，對群體篩查檢測結果快速便捷，實用檢測點篩查檢測。同時，這一檢測方法適用人群較廣，特別是對于病情危急的患者診斷價值更為明顯，因此可在臨床上廣泛推廣運用。值得注意的是，金標法使用也存在一定局限性，由于該檢測方法發展相對較晚，診斷技術尚未完全成熟，特異性、敏感度相對較低，對此將來臨床研究的重點在于怎樣提高金標法特異性與敏感度。

參考文獻：

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[3]于福榮.金標法與酶聯免疫法在抗—HIV測定中的應用[J].中國醫藥指南，2018，16（09）：104—105.

[4]王建芳.分析在健康體檢中以金標法與免疫發光法檢測甲胎蛋白的應用價值[J].臨床醫藥文獻電子雜志，2018，5（26）：155+167.

[5]李艷紅.酶聯免疫法篩查HIV抗體在艾滋病診斷中的應用價值評價[J].現代醫學與健康研究電子雜志，2018，2（02）：62.

[6]許健，令狐穎，周賢位，等.2007—2008年貴州省醫療干¨采供血機構HIV感染者榆測確證結果分析[J].貴州醫約，2009，33（3）：216-218.

[7]楊曉莉，李敬云.HIV感染確認的現狀和發展趨勢[J].中國艾滋病性病，2007，13（6）：585587

[8]谷學軍，馬汝飛，許金玲.金標法與酶聯免疫法測定抗—HIV的應用效果比較[J].醫藥論壇雜志，2016，37（02）：129—130.