稀釋對胱抑素C標準物質ERM-DA471互換性的影響*

李 敏，邵 燕，孫江漫，于洪遠△，陳寶榮

1.北京航天總醫院檢驗科，北京 100076；2.北京金域醫學檢驗實驗室有限公司，北京 100015

胱抑素C是一種比血肌酐更敏感的早期腎損傷標志物，其也能更準確地反映內源性腎小球濾過率[1]。即往由于沒有統一的胱抑素C標準物質，導致不同系統之間檢測結果的差異較大。2010年歐洲標準物質ERM-DA471的推出[2]，有效保障了胱抑素C檢測結果的一致性,該標準物質是通過分離混合血清中的干擾物，添加重組胱抑素C制備而來[3]。目前，關于ERM-DA471互換性的研究收集的單人份血清標本水平范圍未能覆蓋ERM-DA471，可能對互換性結果的判斷有影響，同時，研究中也未將ERM-DA471稀釋成系列水平后進行互換性評價[4]。因此，本研究重點針對上述兩個不足之處進行了相關探討，現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1標本來源 收集北京航天總醫院2021年5月10日至16日門診、住院患者胱抑素C水平為0.5～8.0 mg/L的42份無溶血、無乳糜的血清標本，血清標本水平覆蓋標準物質ERM-DA471的水平，每份血清標本分為兩份，置于-80 ℃冰箱保存。有證標準物質為ERM-DA471/國際臨床化學和檢驗醫學聯合會(IFCC)。

1.2儀器與試劑 日立7170A全自動生化分析儀、LA120S型電子天平、Eppendorf reference移液器。九強生物技術股份有限公司(公司A)、邁克生物股份有限公司(公司B)、邁瑞生物醫療電子股份有限公司(公司C)、羅氏公司(公司D)、中元生物技術有限公司(公司E)、積水醫療科技有限公司(公司F)、德賽公司(公司G)、瑞源生物科技有限公司(公司H)、景源生物科技股份有限公司(公司I)生產的胱抑素C檢測試劑及其配套校準品和質控品。

1.3方法 按照說明書將標準物質ERM-DA471進行溶解，得到水平為5.48 mg/L的原液(記為C5)，再采用稱重法將原液稀釋為4.0、2.0、1.0、0.5 mg/L的系列水平，按照水平由低到高分別記為C1～C4[5]。在日立7170A全自動生化分析儀上建立上述9家公司的檢測系統(系統A～I)，所有參數均由相應公司提供。使用對應的校準品對系統進行校準，質控在控后方可進行檢測。將5個系列水平的標準物質ERM-DA471穿插在42份血清標本中排序檢測，標本分別按照先奇后偶、倒序、先偶后奇的順序檢測3次，結果取平均值。根據EP14-A3標準評價系列水平標準物質ERM-DA471的互換性[6]。

1.4統計學處理 采用SPSS22.0軟件進行數據分析。將9個檢測系統進行兩兩組合，檢測結果構建回歸方程，計算R2。觀察5個系列水平標準物質ERM-DA471的檢測結果是否落在預測值的95%CI內，以此來判斷檢測結果是否具有互換性。

2 結 果

2.1血清標本和待評價標準物質ERM-DA471的檢測結果 將9個檢測系統兩兩組合，將42份血清標本的檢測結果進行回歸分析，回歸方程、R2、斜率的95%CI見表1。36種檢測系統組合對應的斜率范圍為0.782～1.125，截距范圍為-0.216～0.141，R2范圍為0.991～0.998。各檢測系統對5個系列水平標準物質ERM-DA471的檢測結果見表2。

表1 36種檢測系統組合檢測結果的線性回歸分析

表2 9個檢測系統檢測5個系列水平標準物質ERM-DA471的結果(mg/L)

2.2互換性評價 以檢測系統組合中1個檢測系統對5個系列水平標準物質ERM-DA471的檢測結果為X，得到預測值Y及其95%CI，觀察另一個系統的檢測結果是否落在預測值Y的95%CI內[6]。C5的檢測結果具有互換性的檢測系統組合占41.7%(15/36)，C1～C4與C5互換性結果一致的檢測系統組合占16.7%(6/36)；C1～C4的檢測結果具有互換性的檢測系統組合分別占69.4%(25/36)、69.4%(25/36)、80.6%(29/36)、44.4%(16/36)，見表3。

表3 5個系列水平標準物質ERM-DA471在不同檢測系統間的互換性評價

續表3 5個系列水平標準物質ERM-DA471在不同檢測系統間的互換性評價

3 討 論

胱抑素C標準物質ERM-DA471的出現，有效促進了檢測系統檢測結果的一致化，其技術報告上顯示該標準物質基質和新鮮標本不同，因此在臨床應用中應評估其互換性。雖然ERM-DA471能溯源至Si單位，但其水平遠高于人體內胱抑素C的生理水平。目前，市場占有率較高的試劑盒其校準品均為多點校準，因此廠家在進行溯源時需要對ERM-DA471進行稀釋。本研究結果表明，ERM-DA471在36種檢測系統組合中的互換性并不理想，稀釋后的各水平ERM-DA471在大多數檢測系統組合間的互換性發生改變。分析其原因可能有：(1)EP14-A3評價ERM-DA471互換性的缺陷在于兩個系統的相關性越好，95%CI越窄，ERM-DA471越不可能有互換性[6-8]，最終造成ERM-DA471在大多數檢測系統組合間缺乏互換性。(2)對ERM-DA471進行稀釋時，水平越低，操作中引入的誤差對稀釋結果影響越大，可能造成稀釋后的實際水平與靶值的偏倚較大，研究結果表現為水平越低，檢測偏倚越大。(3)標準物質在不同檢測系統間的結果是否具有互換性取決于兩個方面，即材料與新鮮標本的接近程度及方法的特異性。稀釋的過程改變了ERM-DA471原有的基質狀態，因此在臨床應用過程中不能以原水平ERM-DA471的互換性結果來籠統代表稀釋后各水平ERM-DA471的互換性結果。

本研究通過評估原水平和稀釋后不同水平ERM-DA471在36個檢測系統組合間的

互換性，發現其互換性結果并不理想，且稀釋后的ERM-DA471在大部分檢測系統組合間的互換性發生改變，廠家在使用其進行量值傳遞的過程中需注意稀釋對ERM-DA471互換性結果的影響。由于本研究僅使用EP14-A3對標準物質ERM-DA471的互換性進行評估，可能造成評估結果的片面性，今后的研究中將結合IFCC提出的互換性評估方案[9]，使標準物質的互換性評估更加合理、可靠。