南昌地區無償獻血者梅毒抗體血清學檢測結果及感染狀況分析

樊璐，李玉，莊養林，王芳

（江西省血液中心，南昌 330052）

近年來我國梅毒感染呈現流行地區擴大和感染率上升的嚴峻形勢。 據中國疾病預防控制中心報道[1]，梅毒是我國乙類傳染病中報告發病數居第3 位的病種。梅毒螺旋體感染標志物—梅毒螺旋體特異性抗體(抗-TP) 是輸血相關傳染病標志物之一，《血站技術操作規程》[2]規定采供血機構采用2個不同生產廠家的血清學檢測試劑進行血液標本抗-TP 檢測。 酶聯免疫吸附試驗(Enzyme-labeled Immunosorbeng Assay，ELISA)血源篩查試劑靈敏度較高，被血液篩查實驗室廣泛采用。 本研究對獻血者抗-TP ELISA 篩查陽性標本實施梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗 (Treponema Pallidum Particle Agglutination，TPPA) 確證及 (Hepatitis B Surface Antigin，HBsAg/TP)抗體膠體金法聯合檢測，探究南昌地區獻血人群梅毒篩查陽性符合率，評估ELISA試劑、 金標試劑性能， 調查梅毒感染獻血人群特征，為降低抗-TP 不合格引起的血液報廢，招募低危獻血者，加強血液安全提供參考依據。 現報告如下。

1 對象與方法

1.1 檢測對象 2020 年8 月12 日至2021 年9 月29 日南昌地區符合國家 《獻血者健康檢查要求》(GB 18467-2011)的無償獻血者血液標本97554 人份， 收集其中抗-TP ELISA 篩查陽性血漿標本184例。

1.2 方法

1.2.1 設備 STAR 全自動樣本處理系統 (瑞士Hamilton)；XANTUS 全自動加樣儀與血型分析儀(深圳愛康)；FAME 24/20 全自動酶免分析系統(瑞士Hamilton)。 儀器設備每年定期校驗。

1.2.2 試劑 ELISA 試劑： 梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒(酶聯免疫法)(廈門英科新創，簡稱試劑A；北京萬泰，簡稱試劑B)；TPPA 試劑：梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒(凝集法)(日本富士瑞必歐)；金標試劑：乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯合檢測試劑(膠體金法)(廈門英科新創)。 試劑均在有效期內使用。ELISA 試劑取得國家藥品監督管理局生物制品批簽發證明。

1.2.3 檢測方法 采用2 種不同廠家抗-TP ELISA試劑平行檢測無償獻血者血液標本，以S/CO 值≥1.0 判為反應性，0.8≤S/CO＜1 為灰區，單種試劑或2 種試劑檢測為反應性時，使用同種試劑或2 種試劑對原標本進行雙孔復試， 若復試結果中任何1孔呈反應性，檢測結論判定為抗-TP 陽性。選取抗-TP ELISA 篩查陽性標本開展TPPA 確證， 并進行HBsAg/抗-TP 金標聯檢。 嚴格按照試劑說明書進行檢測操作、檢驗結果判定。

1.3 統計分析 從SHINOW 9.5 啟奧血站管理信息系統調取獻血者抗-TP ELISA 篩查數據和梅毒感染獻血者特征資料。 應用SPSS 20.0 軟件統計分析，計數資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 無償獻血者梅毒抗體檢測結果 南昌地區無償獻血人群抗-TP ELISA 篩查陽性率0.19%(184/97554)；TPPA 確證陽性率0.13%(130/97554)；TPPA確證陽性符合率70.65%(130/184)； 金標陽性率0.13%(124/97554)；見表1。

表1 南昌地區無償獻血者梅毒螺旋體抗體檢測結果[n（%）]

2.2 抗-TP ELISA 篩查陽性標本的TPPA 確證結果 抗-TP ELISA 篩查陽性標本中， 雙試劑陽性72.83%(134/184)，試劑A 單陽9.24%(17/184)，試劑B 單陽17.93%(33/184)；ELISA 雙陽標本中TPPA陽性93.28%(125/134)；ELISA 單陽標本中TPPA 陽性10%(5/50)、TPPA 陰性82%(41/50)；見表2。

表2 抗-TP ELISA 篩查陽性標本的TPPA 確證結果[n（%）]

2.3 抗-TP ELISA 篩查陽性標本的HBsAg/抗-TP金標聯檢結果 抗-TP ELISA 篩查陽性標本中檢出1 例HBsAg 金標陽性0.54%(1/184)；ELISA 雙陽標本中抗-TP 金標陽性90.30%(121/134)；ELISA 單陽標本中抗-TP 金標陽性6%(3/50)、抗-TP 金標陰性94%(47/50)；見表3。

表3 抗-TP ELISA 篩查陽性標本的HBsAg/抗-TP 金標聯檢結果[n（%）]

2.4 抗-TP 金標陽性標本的TPPA 確證結果抗-TP 金標陽性標本中TPPA 陽性97.58%(121/124)， 抗-TP 金標陰性標本中TPPA 陰性76.67%(46/60)；見表4。

表4 抗-TP 金標陽性標本的TPPA 確證結果[n（%）]

2.5 抗-TP ELISA 篩查陽性標本S/CO 值分布與TPPA 確證結果 試劑A、 試劑B 真陽性率分別為83.44% (126/151)、77.25% (129/167) (χ2=1.91，P ＞0.05)；將2 種ELISA 試劑篩查陽性標本按S/CO 值各分為5 組， 當S/CO 值處于0.8～0.99 灰區范圍，TPPA 確證無陽性結果； 隨著S/CO 值增大，與TPPA 確證陽性符合率升高；當S/CO 值≥15，陽性符合率100%；見表5。

表5 抗-TP ELISA 試劑篩查陽性標本S/CO 值分布與TPPA 確證結果[n（%）]

2.6 梅毒確證陽性獻血者人口學特征及合并感染情況 130 例南昌地區梅毒確證陽性獻血者中，女性陽性率高于男性；46～55 歲年齡段獻血者陽性率最高，36～45 歲次之；低學歷人群陽性率較高，文化程度與陽性率呈反比關系；農民、工人、自由職業陽性率較高；初次獻血陽性率高于重復獻血；自愿獻血陽性率高于團體獻血； 捐獻全血與捐獻單采血小板陽性率無明顯差異； 存在TP 合并HBV/HCV/HIV 感染情況；見表6。

表6 南昌地區130 例梅毒確證陽性獻血者特征

3 討論

岳曉麗[3]等報道，2014 年至2019 年中國梅毒總報告發病率逐年增長， 高發地區為西北部分地區、東南沿海部分省份。盧飛豹等[4]報道，2008 年至2019 年江西省梅毒疫情呈增長趨勢， 波及地區和人群廣泛，萍鄉市、贛州市、上饒市為重點地區。 本研究顯示， 南昌地區無償獻血人群梅毒抗體篩查陽性率0.19%，低于廣東深圳寶安區0.52%[5]、廣東肇慶0.2636%[6]。 近年來本地區梅毒抗體篩查陽性率呈下降態勢，與血站持續加強獻血前宣教干預、招募低危獻血者相關。 本地區獻血人群梅毒抗體確證陽性率0.13%，低于廣東深圳寶安區3.14‰[5]、湖北武漢0.27%[7]、 浙江湖州0.22%[8]、 河南南陽0.15%[9]。 南昌地區獻血者梅毒感染率處于較低水平，不屬于我國梅毒高發地區。

血清學檢測是梅毒篩查、 診斷和預后的最常用檢測方法[10]。 ELISA 檢測敏感性較高，檢驗儀器自動化程度高，結果客觀易判讀，適合于人群、血液制品大規模梅毒篩查； 不足之處是ELISA 方法存在非特異性反應，可出現假陽性。 TPPA 對各期梅毒的敏感性、特異性較強，是目前廣泛被認可和應用的確證試驗方法。 本研究顯示ELISA 雙試劑陽性標本中TPPA 確證陽性符合率達93.28%，與王艷彬等[11]的報道(93.82%)接近，高于胡曉玉等[12](90.71%)、錢立瓊等[13](88.1%)、吳漢鐘等[14]的報道(87.36%)。試劑A 真陽性率83.44%，高于吳漢鐘等[14]的報道(79.17%)；試劑B 真陽性率77.25%，與錢立瓊等[13]的報道(77.5%)接近，高于吳漢鐘等[14](68.14%)、何芮等[15]的報道(66.30%)。 ELISA 單試劑陽性標本中TPPA 陰性率82%、TPPA 陽性率10%， 此結果表明抗-TP ELISA 單試劑陽性大多數為假陽性結果，同時提示單種試劑檢測存在漏檢風險。 聯合應用2 種不同廠家ELISA 試劑可形成互補， 保障血液安全。 雙試劑篩查陽性標本的確證符合率高于單試劑篩查陽性， 說明雙試劑篩查策略提升檢測準確性。

為優化南昌地區獻血者健康檢查方案， 降低血液報廢率，減少血液采集、檢測、制備流程人力和物料成本消耗，本研究引入HBsAg/TP 抗體聯合檢測試劑(膠體金法)，了解其應用效果。 研究結果顯示，抗-TP 金標陽性占TPPA 確證陽性97.58%，與陳邦銳等[7](91.04%)、黃伯泉等[16](90.4%)的報道均達90%以上， 表明金標試紙條能夠有效檢出絕大多數梅毒抗體陽性血液標本。黃伯泉等[16]研究發現，HBsAg/TP 抗體聯檢金標試劑與HBsAg 金標試紙條對HBsAg 檢測效能一致，能夠有效篩查出TP陽性標本，實際使用價值、經濟效益明顯。周丹等[17]報道，加強獻血前體檢初篩檢查，尤其是加強獻血前TP 檢測，能有效減少高危獻血人群比例。 建議本地區獻血前檢測項目增加梅毒初篩， 將現行HBsAg 金標試紙條替換為HBsAg/TP 抗體聯檢金標試紙條，從源頭阻斷梅毒感染者獻血，降低抗-TP 不合格引起的血液報廢。

本研究經對比分析發現，ELISA 篩查陽性標本較高的S/CO 值預示TPPA 陽性的可能性大，TPPA確證陽性符合率隨初篩試驗S/CO 值增大呈升高趨勢。 張偉芳等[18]報道，梅毒抗體ELISA 檢測結果S/CO 值的高低與確證實驗分級結果存在正相關性。 盡管ELISA 的S/CO 值和TPPA 確證結果的相關性較高， 但不宜完全參照S/CO 值大小推斷抗-TP ELISA 反應性結果真陽性與否。 采供血機構血液檢測實驗室為防止漏檢， 大多設置ELISA 判讀灰區。 本研究中灰區標本未檢出TPPA 陽性，與黃伯泉等[16]研究結果近似，表明灰區設置在一定程度上增加假陽性幾率。 亦有文獻報道[18-19]灰區范圍內部分標本檢出TPPA 確證陽性結果，可見合理設置ELISA 灰區限值可發揮防漏檢作用， 具備重要意義。

南昌地區130 例梅毒確證陽性獻血者中，不同性別、年齡、文化程度、職業的梅毒檢出率均存在差異。女性陽性率高于男性，與武漢[7]、廣州[20]、南陽[9]等地研究結果一致，可能與女性生理結構特點往往導致梅毒隱性感染， 女性梅毒感染者中部分為性工作者相關。36～55 歲年齡段獻血者陽性率較高，推測與梅毒抗體終生陽性、中老年人群成為江西省梅毒高發人群[4]兩個因素相關。 低學歷人群陽性率較高，文化程度與陽性率呈反比關系。 農民、工人、自由職業者陽性率較高，上述群體以低學歷人員居多，缺乏性傳播疾病防治知識，衛生條件較差。 高校學生屬無償獻血主力軍，近年來大學生群體TP、HIV 感染率增高，須引起高度重視，應加強青年學生性安全教育。 岳曉麗等[3]報道，年輕人群報告發病率快速增長； 各職業人群均有梅毒病例報告，以農民和民工最多，學生人群增幅最大。 盧飛豹等[4]報道，15～19 歲少年、農民梅毒報告發病率增幅較大，均為需要重點關注人群。 南昌地區梅毒感染獻血者年齡、文化程度、職業特征與國內部分地區獻血人群梅毒感染特征基本吻合， 符合我國及江西省梅毒疫情人群分布規律。 初次獻血梅毒陽性率高于重復獻血， 提示固定獻血者隊伍建設對于血液安全保障至關重要。

本項目初步掌握南昌地區獻血人群梅毒抗體篩查、確證檢測情況和梅毒感染獻血者流行特征，因樣本數量有限，尚存在一定局限性，有待擴大范圍進一步調查。建議本地區血站對抗-TP ELISA 單試劑篩查不合格獻血者開展TPPA 確證檢測，允許確證陰性者進入獻血者歸隊流程， 避免ELISA 假陽性所致血液資源流失； 合理選擇檢測方法和試劑，強化血液篩查實驗室質量體系監控，不斷提升檢測結果準確性，最大程度避免漏檢或假陽性；獻血前檢測項目增加梅毒抗體膠體金法快速篩查，做好獻血者健康征詢和健康檢查， 從采血源頭加大高危行為者甄別力度，保障臨床用血安全。