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基于凝膠特性的蛋白改性方法研究進(jìn)展

2023-02-23 14:32:23陳鳳蓮吉語(yǔ)寧賀殷媛竇新梾范婧張娜
食品研究與開(kāi)發(fā) 2023年2期
關(guān)鍵詞:改性研究

陳鳳蓮,吉語(yǔ)寧,賀殷媛,竇新梾,范婧,張娜

(哈爾濱商業(yè)大學(xué) 食品工程學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150028)

蛋白質(zhì)是以氨基酸為基本單位組成的生物高分子物質(zhì),因其營(yíng)養(yǎng)和功能特性較好被人們廣泛應(yīng)用,經(jīng)過(guò)改性后的蛋白凝膠對(duì)于調(diào)節(jié)生理功能、維持新陳代謝、提升食品品質(zhì)具有重要意義。凝膠性是蛋白質(zhì)的主要性質(zhì)之一,蛋白質(zhì)膠體溶液在一定條件下失去流動(dòng)性,蛋白質(zhì)分子聚集,并形成有序的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),最終表現(xiàn)成為“膠凝”狀態(tài)。蛋白質(zhì)是一種廣泛存在的天然化合物,蛋白凝膠存在于很多日常食品中,如魚類、肉類、谷物等。

食品中的純天然蛋白質(zhì)具有不易消化吸收、保質(zhì)期短、溶解性差,網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)有序性差等缺陷,因此對(duì)天然蛋白質(zhì)進(jìn)行適當(dāng)?shù)母男允悄壳皬V泛研究的課題,無(wú)論是通過(guò)酶法改性使其二級(jí)結(jié)構(gòu)中如二硫鍵和氫鍵斷鍵或聚合,亦或是通過(guò)物理方法使其疏水基團(tuán)改變,都會(huì)對(duì)食品中的蛋白質(zhì)產(chǎn)生相應(yīng)的影響。蛋白經(jīng)過(guò)改性后,其分子構(gòu)象會(huì)發(fā)生改變,使其持水性、凝膠性、質(zhì)構(gòu)等功能特性在原來(lái)的基礎(chǔ)上得到提高。因此,蛋白質(zhì)凝膠性改性一直被廣泛應(yīng)用于食品行業(yè)中。如何合理地對(duì)蛋白凝膠進(jìn)行改性,以及對(duì)蛋白凝膠改性方法的選擇,成為現(xiàn)在的研究熱點(diǎn)。本文主要講述了蛋白凝膠的形成原理,并對(duì)近年來(lái)蛋白凝膠改性方法及其改性后結(jié)構(gòu)上的改變進(jìn)行綜述。

1 蛋白凝膠改性方法的應(yīng)用現(xiàn)狀

蛋白質(zhì)改性主要是由于受到物理因素或化學(xué)因素等的影響,引起了蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)或三級(jí)結(jié)構(gòu)的變化,目前常用的蛋白凝膠改性技術(shù)主要包括3種,分別為物理、化學(xué)以及酶法改性。物理改性主要是使氨基酸殘基和多肽鏈產(chǎn)生某種變化,并不會(huì)破壞蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)[1]。由于不涉及人為添加物,具有安全性高、費(fèi)用低、作用時(shí)間短以及對(duì)營(yíng)養(yǎng)性質(zhì)破壞性小等優(yōu)點(diǎn),物理改性成為研究和工業(yè)上優(yōu)選的蛋白改性手段[2]。化學(xué)改性技術(shù)反應(yīng)條件劇烈,過(guò)程難以控制,且會(huì)破壞部分氨基酸、維生素等物質(zhì),造成營(yíng)養(yǎng)價(jià)值降低;后續(xù)的水解產(chǎn)物還存在肽類得率較低,鹽分含量高等問(wèn)題,甚至還可能造成環(huán)境污染,引入不安全因素,目前工業(yè)上幾乎已放棄該類蛋白改性方法。酶法改性技術(shù)是目前食物蛋白質(zhì)改性研究的前沿?zé)狳c(diǎn),包括酶法聚合改性和酶法降解改性,條件溫和、效果顯著,既不會(huì)損失食品原料本身的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,也不會(huì)產(chǎn)生毒理方面的問(wèn)題,更應(yīng)該廣泛運(yùn)用在食品研究與工業(yè)生產(chǎn)中。

2 物理改性法

物理改性法主要是通過(guò)微波、超聲波、熱、脈沖電場(chǎng)、超高壓、輻照等方法來(lái)改變蛋白質(zhì)分子間的作用力,使蛋白質(zhì)交聯(lián)、聚集產(chǎn)生凝膠性,并進(jìn)一步改變蛋白的持水性、持油性、以及凝膠強(qiáng)度。簡(jiǎn)便性和安全性是物理改性方法中較為凸出的優(yōu)勢(shì),在試驗(yàn)過(guò)程中,利用熱、電、機(jī)械能高頻電場(chǎng)微波、超聲波等物理形式改變蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)和蛋白質(zhì)聚集方式,從而改善蛋白質(zhì)性能[3]。

2.1 微波改性

微波改性大多數(shù)是通過(guò)微波預(yù)處理后熱誘導(dǎo)來(lái)改善蛋白凝膠的性質(zhì),從而使蛋白凝膠形成具有更為致密、均勻的微觀三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。陸毅等[4]研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)過(guò)微波預(yù)處理后,熱誘導(dǎo)的小麥面筋蛋白凝膠特性得到了明顯的改善,隨著微波功率的增大,凝膠強(qiáng)度出現(xiàn)先減小后增大的趨勢(shì)。也有研究[5]表明,在微波改性后的蛋白凝膠中,蛋白凝膠的色澤、硬度、彈性、持水性等品質(zhì)特性得到大幅度改善及提升。Ji等[6]通過(guò)微波加熱結(jié)合水浴加熱對(duì)多糖-蛋白質(zhì)混合凝膠的結(jié)構(gòu)和各種質(zhì)量參數(shù)進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)微波加熱的魔芋葡甘露聚糖(konjac glucomannan,KGM)鏈具有較高的拉伸速率,它們有助于形成多糖-蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò),而水浴加熱的凝膠中的多糖則以聚集體形式插入蛋白質(zhì)中。

2.2 超高壓改性

超高壓改性處理是將食品放進(jìn)密閉的容器中,以水或液體為介質(zhì),對(duì)壓力進(jìn)行傳遞。經(jīng)過(guò)不同程度的超高壓處理后,食品中蛋白質(zhì)的二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,膠凝性能得到提高。超高壓改性處理能起到殺菌和滅酶的作用,進(jìn)而使食品的保質(zhì)期得到延長(zhǎng)。根據(jù)Li等[7]研究可知,豬肉肌原纖維蛋白在經(jīng)過(guò)高壓(200 MPa)處理后,其溶解度有所提高,而在300 MPa下的肌原纖維蛋白的溶解度逐漸降低,并且伴隨著大量的聚合產(chǎn)生。同時(shí)大豆分離蛋白因其用途廣泛通常會(huì)用于非肉類制品的加工,具有良好的凝膠性和乳化性,可以和豬肉肌原纖維蛋白相結(jié)合,提高復(fù)合物的保水能力和內(nèi)聚性。Jiao等[8]在超高壓條件下將不同種類的多糖和花生分離蛋白進(jìn)行混合,發(fā)現(xiàn)高壓均質(zhì)后的混合物凝膠經(jīng)歷了凝固、弱化、強(qiáng)化3個(gè)階段,且研究表明花生分離蛋白與黃原膠混合物的蛋白凝膠性沒(méi)有出現(xiàn)凝膠弱化的情況。王健一等[9]研究表明,經(jīng)過(guò)超高壓處理后的低鹽魚糜,其品質(zhì)特性均出現(xiàn)先增加后減小的趨勢(shì)。另有研究中綜述了超高壓在對(duì)于蛋白凝膠改性的過(guò)程中,只對(duì)食品中的共價(jià)鍵產(chǎn)生作用,所以可以最大程度上保留食品中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[10]。Chen等[11]研究發(fā)現(xiàn),超高壓改性魚糜α-helix和β-turn的含量降低,而β-sheet的含量升高,因此可以得出,魚糜經(jīng)過(guò)超高壓改性后其品質(zhì)有所提升。

2.3 超聲波改性

超聲波處理可以減小蛋白質(zhì)的分子粒度,促進(jìn)蛋白凝膠形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),從而使蛋白的凝膠強(qiáng)度增加。經(jīng)過(guò)超聲波處理的蛋白,其分子間相互吸引的作用力會(huì)增加,疏松多孔的結(jié)構(gòu)變得更加緊密,形成標(biāo)準(zhǔn)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),而其中二硫鍵的斷裂和疏水基團(tuán)的顯露,表現(xiàn)出其凝膠性的增強(qiáng),持油能力增強(qiáng)。隨著超聲波功率的增大,蛋白凝膠作用逐漸增強(qiáng),當(dāng)超聲波功率過(guò)大時(shí),會(huì)使蛋白質(zhì)分子的疏水殘基在結(jié)構(gòu)中顯露出來(lái),使蛋白凝膠的作用力下降。Zhao等[12]在研究中以大豆分離蛋白和麥芽糊精為原料,分別在不同條件下進(jìn)行超高壓改性,其研究結(jié)果表明,盡管麥芽糊精的糖基化降低了蛋白凝膠的酸誘導(dǎo)凝膠特性,但經(jīng)過(guò)5 min超聲波處理的偶聯(lián)物比未處理的偶聯(lián)物更快地形成凝膠,并且它們的凝膠具有更高的儲(chǔ)能模量、凝膠強(qiáng)度和持水能力,持水性先增大后減小。有研究[13]表明,經(jīng)過(guò)超聲波處理后,蛋白質(zhì)二硫鍵和疏水基團(tuán)的暴露會(huì)增大蛋白質(zhì)對(duì)油脂的結(jié)合,從而增大肌原纖維蛋白的吸油能力。張潮等[14]在研究中指出,超聲波處理冷凍的食品,可以避免由于空氣冷凍食品產(chǎn)生的冰晶對(duì)食品造成的損傷,最大程度地保留食品中的營(yíng)養(yǎng)成分,并縮短由于空氣冷凍食品時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的缺點(diǎn)。

3 化學(xué)改性法

化學(xué)改性主要是利用酸、堿、鹽等化學(xué)試劑對(duì)蛋白質(zhì)、多肽中的一些特殊基團(tuán)進(jìn)行改性,(如氨基、羥基、巰基及羧基等)以達(dá)到改善其功能特性的目的。常見(jiàn)的化學(xué)改性方式有:?;?、脫酰胺、磷酸化、糖基化、共價(jià)交聯(lián)等[15]。

3.1 醛基化改性

醛基化改性主要是通過(guò)化學(xué)物質(zhì)中的活性醛對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改性,在活性醛種類中,丙烯醛屬于適合對(duì)蛋白質(zhì)改性的醛類。以大米蛋白為例,大米蛋白質(zhì)固有熒光強(qiáng)度的降低和表面疏水性的降低,表明由丙烯醛氧化修飾引起的蛋白質(zhì)聚集體的形成[16]。丙烯醛濃度的升高會(huì)使大豆蛋白硬度降低,而大豆蛋白凝膠中二硫鍵含量會(huì)隨著凝膠硬度的下降而降低,導(dǎo)致蛋白羰基化和巰基生成。丙烯醛修飾大豆蛋白與α-螺旋結(jié)構(gòu)的降低和β-折疊結(jié)構(gòu)的增加有關(guān)。但吳偉等[17]研究表明,丙烯醛可以對(duì)大豆蛋白進(jìn)行較大程度的氧化改性,且改性程度穩(wěn)定。當(dāng)丙烯醛濃度較低時(shí),對(duì)于大豆蛋白的流變學(xué)性質(zhì)影響程度很小。馮程等[18]在研究中指出,隨著丙烯醛氧化的加深,會(huì)對(duì)蛋白凝膠產(chǎn)生結(jié)構(gòu)以及凝膠性質(zhì)的影響,籽瓜種仁中的蛋白質(zhì)會(huì)形成非共價(jià)二硫鍵,二硫鍵的數(shù)量逐漸減少,蛋白質(zhì)的粒徑數(shù)量增大,聚集現(xiàn)象產(chǎn)生。Wang等[19]研究了脂氧化的副產(chǎn)物丙烯醛對(duì)從兔肉中分離的肌原纖維蛋白的結(jié)構(gòu)和凝膠特性的影響,丙烯醛含量的加大,使總巰基含量呈現(xiàn)減小的趨勢(shì),丙烯醛引起α-螺旋結(jié)構(gòu)的破壞,疏水位點(diǎn)暴露和肌原纖維蛋白的展開(kāi),并通過(guò)電泳分析得出,中等濃度和高濃度的丙烯醛分別可以誘導(dǎo)蛋白質(zhì)交聯(lián)和蛋白質(zhì)聚集。由此可知,適度的氧化修飾能夠?qū)е碌鞍踪|(zhì)在凝膠中解折疊以及α-螺旋結(jié)構(gòu)的降低和β-折疊結(jié)構(gòu)的增加,從而影響凝膠的性能。

3.2 羥基氧化改性

近年來(lái),羥基氧化的方法逐漸用于蛋白凝膠的改性,在氧化過(guò)程中蛋白間的分子作用力被破壞,其二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,疏水性增強(qiáng),結(jié)構(gòu)變得疏松。Zhang等[20]研究了羥基自由基對(duì)肌原纖維蛋白的氧化修飾以及對(duì)μ-鈣蛋白酶的影響,結(jié)果表明,隨著H2O2濃度的增加,蛋白的氧化程度增加,肌原纖維蛋白的敏感性也提升,而總巰基和色氨酸熒光強(qiáng)度逐漸降低。二硫鍵和其他共價(jià)鍵導(dǎo)致蛋白質(zhì)的交聯(lián)和聚集,從而改變肌原纖維蛋白的結(jié)構(gòu)及其對(duì)μ-鈣蛋白酶水解的敏感性,為蛋白質(zhì)氧化與蛋白水解相結(jié)合的機(jī)理進(jìn)一步提供更加直觀的理論。

Zhang等[21]的研究表明,氧化能夠?qū)饦岕~肌原纖維蛋白間的分子作用力產(chǎn)生影響,降低其凝膠強(qiáng)度。通過(guò)分析持水量和低場(chǎng)核磁共振表明,低程度的氧化可增強(qiáng)蛋白質(zhì)基質(zhì)的水結(jié)合力,而高氧化可大大降低肌原纖維蛋白的膠凝特性。金槍魚肌原纖維蛋白凝膠經(jīng)過(guò)氧化后,其羰基化合物和二硫鍵的含量變少,氧化還可減少離子鍵和氫鍵的含量,增加疏水性相互作用。Bertram等[22]研究表明,離子強(qiáng)度、肌肉收縮程度、pH值是對(duì)于肌原纖維蛋白氧化程度影響較為明顯的因素。其中,氧化程度、離子強(qiáng)度會(huì)對(duì)保水能力產(chǎn)生明顯的影響。當(dāng)pH值達(dá)到5.4、6.2和7.0,離子強(qiáng)度選取0.29、0.46、0.71 mol/L時(shí),會(huì)對(duì)樣品中的二酪氨酸的含量產(chǎn)生影響,經(jīng)過(guò)H2O2激活后,二酪氨酸濃度逐漸升高。張洪超等[23]在研究烏賊蛋白分子間的作用力時(shí)表明,逐步增加H2O2的濃度,會(huì)降低蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)離子鍵的數(shù)量,使氫鍵含量減少。由此可知,氧化改性修飾對(duì)于烏賊蛋白分子的氨基酸及其側(cè)鏈基團(tuán)產(chǎn)生影響,氧化后的肌原纖維蛋白結(jié)構(gòu)趨于疏松、肌絲變細(xì)且斷裂卷曲量增多,使烏賊蛋白分子發(fā)生交聯(lián)現(xiàn)象,改變蛋白理化性質(zhì)。

3.3 ?;男?/h3>

蛋白質(zhì)酰基化改性主要是指在反應(yīng)過(guò)程中,蛋白質(zhì)與“乙?;被鶊F(tuán)進(jìn)行嫁接,形成乙酰化修飾,同樣的,對(duì)于酰基化改性來(lái)說(shuō),還有磷酸化修飾、甲基化修飾。而乙?;窍鄬?duì)于其他種類的修飾,用途比較廣泛,且效果較好的一種。Yao等[24]在翻譯修飾后的馬鈴薯中發(fā)現(xiàn)了賴氨酸的乙?;赡苁亲匀恍纬?,或在加工過(guò)程中形成,從而對(duì)于他們的生物活性以及溶解度產(chǎn)生影響。Lawal等[25]在研究班巴拉花生蛋白時(shí)發(fā)現(xiàn),乙酰化和琥珀酰化均能夠提升其發(fā)泡性,但在其他pH值和離子強(qiáng)度增加時(shí),也會(huì)增強(qiáng)花生蛋白的凝膠性,而不同鹽濃度可能會(huì)導(dǎo)致凝膠能力下降。左峰等[26]研究表明,經(jīng)過(guò)乙酰化的蕓豆蛋白,在乙?;潭戎鸩教岣叩那闆r下,即乙酸酐與蛋白質(zhì)的質(zhì)量比提升后,顯著提高了蕓豆蛋白凝膠的硬度、靈活性和凝聚力。Jandal等[27]對(duì)乳清蛋白進(jìn)行乙?;幚?,發(fā)現(xiàn)在乙酰濃度為0.3%時(shí),乳清蛋白吸水能力有所提升,大于未經(jīng)過(guò)乙酰化處理的乳清蛋白。?;幚砗蟮鞍踪|(zhì)會(huì)產(chǎn)生拉伸程度變長(zhǎng)的現(xiàn)象,使分子內(nèi)嵌入的部分巰基因分子結(jié)構(gòu)變化暴露于分子表面[28]。

3.4 焦亞硫酸鈉改性

目前,焦亞硫酸鈉改性大多數(shù)都用于對(duì)面團(tuán)品質(zhì)的改性。添加焦亞硫酸鈉后,面團(tuán)的拉伸特性會(huì)有明顯的提升,適用于工業(yè)生產(chǎn),具有低成本、用量少、效果顯著等特點(diǎn)。通過(guò)石林凡等[29]的研究可知,面團(tuán)中焦亞硫酸鈉添加量為0.1%~0.15%時(shí),拉面面團(tuán)的拉伸性、面團(tuán)筋力、耐揉性達(dá)到最好,面團(tuán)的延展性較強(qiáng)且不易斷裂,說(shuō)明面筋蛋白經(jīng)過(guò)焦亞硫酸鈉的修飾改性后,二硫鍵含量下降,氫鍵含量升高,而在小麥面筋蛋白中二硫鍵對(duì)結(jié)構(gòu)起著關(guān)鍵性的作用,導(dǎo)致面團(tuán)的拉伸性增強(qiáng)。

3.5 糖基化改性

由于蛋白質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定,過(guò)酸或過(guò)堿都會(huì)使蛋白質(zhì)的性質(zhì)發(fā)生改變,而與碳水化合物或生物多聚合物的交聯(lián)能使蛋白質(zhì)變得穩(wěn)定,并賦予蛋白質(zhì)一些新的特性,改善其持水性,流變性,乳化性等。于楓[30]在研究中發(fā)現(xiàn),經(jīng)過(guò)糖基化改性后,米糠蛋白溶解度、乳化活性和乳化穩(wěn)定性等性質(zhì)有明顯的提升,且米糠蛋白糖基化后,其優(yōu)良的乳化性可以替代大豆蛋白。Li等[31]的研究表明,不同濃度的茶多酚可以對(duì)肌原纖維進(jìn)行氧化修飾,使羥基自由基的氧化程度、理化結(jié)構(gòu)、膠凝特性改變。茶多酚對(duì)肌原纖維濃度的依賴性效應(yīng),取決于肌原纖維的氧化修飾程度和它們之間的相互作用,這表明適量的茶多酚有保護(hù)肌原纖維蛋白免受氧化的潛力,并能夠在加工過(guò)程中增強(qiáng)魚糜的膠凝能力。

4 酶法改性

酶制劑是一種天然的生物制品,與物理、化學(xué)改性相比,酶法改性的特點(diǎn)主要是安全性高,且針對(duì)性強(qiáng),在最大程度保持營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的情況下改善功能特性。酶法改性處理手段因具有反應(yīng)條件溫和、產(chǎn)品得率高、生產(chǎn)過(guò)程安全等特點(diǎn)受到了廣泛關(guān)注。

4.1 脂肪酶改性

脂肪酶是一種特殊的酯鍵水解酶,可降解面粉中的甘油三酯及半乳糖脂,使其無(wú)法與谷蛋白相結(jié)合,因而面筋內(nèi)部網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)得以改善,面團(tuán)筋力增強(qiáng),穩(wěn)定時(shí)間增加。吳駿威等[32]研究表明,加入脂肪酶的面團(tuán)拉伸能量有所增加,但增加程度有限,延伸度、拉伸阻力均有著明顯增加,說(shuō)明脂肪酶能夠改善面團(tuán)延伸特性,增加面筋筋度。高坦等[33]在研究中表示,添加了脂肪酶的面團(tuán)中,冷凍面團(tuán)改性后制得的面包硬度和膠黏性的感官評(píng)價(jià)較好。Serventi等[34]在研究中發(fā)現(xiàn),在面團(tuán)中添加一定量的脂肪酶能夠使面包的比容增加,結(jié)構(gòu)更加有凝聚力。Melis等[35]表示,對(duì)于非極性脂類具有水解特異性的脂肪酶,可用作小麥粉分離的加工助劑,以最大限度地提高加工效率。

4.2 谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶改性

轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(transglutaminase,TG 酶),又稱谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶,可催化蛋白質(zhì)、多肽發(fā)生分子內(nèi)和分子間的共價(jià)交聯(lián),改變蛋白質(zhì)的性質(zhì),如:發(fā)泡性、乳化性、乳化穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性,其在豆制品、米制品等食品加工工業(yè)中得到了廣泛的應(yīng)用[36]。

臧學(xué)麗等[37]在研究中表示,谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶在與其他酶類作比較時(shí),在大豆蛋白中添加的效果最為明顯,也有試驗(yàn)研究[38]表明,通過(guò)添加轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶處理的蛋白質(zhì),功能特性提高,TG酶與雞肉中的蛋白質(zhì)和蕓豆蛋白進(jìn)行共價(jià)交聯(lián)時(shí)效果最好。微生物來(lái)源的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶不僅能夠改善大豆蛋白分子的空間交聯(lián)形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),而且可以催化蛋白質(zhì)中的谷氨酰胺殘基與水結(jié)合,提高其保水能力和凝膠特性。因此如果添加適量的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶,能夠使蛋白質(zhì)形成均勻致密的空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),增強(qiáng)凝膠強(qiáng)度和持水性。但添加高濃度的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶則會(huì)使蛋白質(zhì)發(fā)生過(guò)度交聯(lián)聚合而脫水,蛋白質(zhì)的凝膠強(qiáng)度降低[39]。TG酶在大米蛋白改性中應(yīng)用十分常見(jiàn),主要是通過(guò)交聯(lián)一些蛋白質(zhì)分子間和分子內(nèi)的鍵合,包括疏水鍵、氫鍵以及沒(méi)有嚴(yán)重裂解的肽鍵,使蛋白質(zhì)以更加靈活的方式組合[40]。

5 復(fù)合法改性

復(fù)合法改性在現(xiàn)在的改性過(guò)程中十分常見(jiàn),不同于單一改性對(duì)蛋白質(zhì)的作用,大多數(shù)是以兩種不同或相同的方法對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行改性修飾,使其性質(zhì)優(yōu)于未改性的蛋白質(zhì),或只采用單一改性法的蛋白質(zhì),并結(jié)合多種改性方法的優(yōu)點(diǎn),更好地對(duì)蛋白凝膠進(jìn)行研究。TG酶能夠單獨(dú)用于蛋白質(zhì)的改性,效果十分明顯,同樣在與其他改性方法聯(lián)合使用時(shí),效果更加顯著,TG酶作為修飾劑對(duì)蛋白質(zhì)改性時(shí)主要通過(guò)導(dǎo)入、交聯(lián)及脫胺3種途徑,使蛋白質(zhì)的功能特性以及品質(zhì)特性得到極大地改善。

申瑞玲等[41]在面團(tuán)中分別添加了4種添加劑,通過(guò)研究不同的比例,來(lái)優(yōu)化面包的配方,探究了酶添加量對(duì)蛋白凝膠結(jié)構(gòu)、面包質(zhì)構(gòu)的影響,最優(yōu)條件下制得的面包芯柔軟而富有彈性,口感較好,總體評(píng)價(jià)要優(yōu)于市售普通面包。Wang等[42]將輻照技術(shù)與糖基化修飾方法相結(jié)合,證明了輻照可以促進(jìn)大豆分離蛋白與麥芽糖之間的美拉德反應(yīng),顯著改善了改性蛋白的功能特性,輻照技術(shù)具有時(shí)間短,效率高的特點(diǎn),易于工業(yè)化實(shí)施。

6 展望

目前,國(guó)內(nèi)外關(guān)于物理、化學(xué)方法在蛋白凝膠改性方面的應(yīng)用研究較為全面、系統(tǒng)。物理改性方法雖然具有簡(jiǎn)便性、安全性的特點(diǎn),但相對(duì)于現(xiàn)在成熟的蛋白質(zhì)改性方法顯得過(guò)于單一,化學(xué)改性方法由于其極易產(chǎn)生危害性,逐漸不再被人們所選擇。而酶法改性以及復(fù)合法改性仍有較大的空間,該方法形成的蛋白凝膠性能更好,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值更高,且操作方法較為安全,不僅會(huì)使食品變得易被消化酶分解,提高消化率,還會(huì)減少食品貯藏期間酸敗、變色、風(fēng)味質(zhì)地改變等情況的發(fā)生,這對(duì)于食品行業(yè)的發(fā)展具有重大意義。復(fù)合改性方法靈活,安全性更強(qiáng),效果更好。對(duì)于不同食品中的蛋白凝膠,所對(duì)應(yīng)的改性方法也有所不同,而在試驗(yàn)過(guò)程中,除了要提高蛋白凝膠的功能特性,更應(yīng)該將凝膠的改性應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)中,提升產(chǎn)品的品質(zhì),研制適合不同人群、年齡段的產(chǎn)品。

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