黔藿1號適宜采收期研究

雷 榮,邱 煉,劉紅昌,3*,王紫賢,陳文夫,游 雪,趙 剛,汪永平

（1.畢節市中藥材技術服務站，貴州 畢節 551799；2.貴州大學 農學院，貴州 貴陽 550025；3.貴州省藥用植物繁育與種植重點實驗室，貴州 貴陽 550025；4.貴州貴基生物醫藥有限公司，貴州 從江 557400）

箭葉淫羊藿Epimediumsagittatum（Sieb.et Zucc.）Maxim.為小檗科（Berberidaceae）淫羊藿屬EpimediumL.植物［1］，是淫羊藿藥材的基原植物之一，以干燥葉入藥，性溫，味辛、甘，歸肝、腎經，具有補腎陽，強筋骨，祛風濕的功效，常用于治療腎陽虛衰，陽痿遺精，筋骨痿軟，風濕痹痛，麻木拘攣等病癥［2］，生長于100～760 m 的疏林或竹林下、灌叢中或水溝邊［3］，是淫羊藿屬分布較廣的種，在我國安徽、江西、湖南、浙江、福建、湖北、廣東、貴州、廣西、陜西、四川、河南和重慶均有分布［4］。目前，箭葉淫羊藿藥材野生資源遭到掠奪式采挖，野生資源瀕臨枯竭［5］，致使藥農開始使用淫羊藿有性繁殖苗或無性繁殖苗進行林下種植［6］、仿野生栽培［7］和人工栽培［8］。人工栽培的淫羊藿藥材由于產地［9-11］、栽培方式［12］和采收期［13-14］不統一，導致其藥材質量參差不齊；其栽培密度［15］、施肥量［16］、遮陰度［17］和采收期等不同，也會造成其產量和質量有差異。目前，鮮見關于淫羊藿同一品種不同種苗移栽后，不同采收時間的藥材產量和質量變化報道。為此，對箭葉淫羊藿優良品種黔藿1號不同種苗（分株苗、根莖苗、實生苗）移栽，比較不同采收時間的藥材產量及質量變化，旨在為生產中確定其適宜采收期提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗地概況

試驗地位于貴州省從江縣往洞鎮高傳村，為連續多年種植水稻的水稻田，屬亞熱帶季風性氣候，平均海拔670 m，年均溫15.5 ℃，年均降雨量1 230 mm 左右，年日照時數1 080～1 249 h，無霜期280 d以上，土壤為沙壤土。

1.2 試驗材料

材料為貴州貴基生物醫藥有限公司自選箭葉淫羊藿優良品種黔藿1號，藥材基源經貴州大學植物鑒定中心鑒定為小檗科（Berberidaceae）淫羊藿屬（Epimedium）植物箭葉淫羊藿（Epimediumsagittatum）。

儀器：高效液相色譜儀（Agilent 1260 infinity）、紫外可見分光光度計（T6 新世紀）、數顯恒溫水浴鍋（HH-6）、箱式電阻爐（SX-5-12 型）、電子天平（AR224CN）、超聲波清洗機（SB-5200DT）等。

試劑：淫羊藿苷對照品（批號：110737-201516，質量分數94.2%，購自中國食品藥品檢定研究院）；色譜級甲醇、乙腈（質量分數≥99.9%）；AR級甲醇、AR級乙醇等。

1.3 試驗方法

于2019 年12 月分別采用無損傷、無病蟲害且規格一致的實生苗、根莖苗和分株苗進行起廂栽培，廂寬1.5 m，廂距40 cm，廂高20 cm，種植株行距20 cm×30 cm。自2020年4 月初開始對移栽后長勢大體一致的實生苗、根莖苗和分株苗進行定株掛牌，每次采樣以15株為1個重復，重復3次。每隔15 d取樣1 次，共采樣16 次。采收后于105 ℃下殺青15 min，55 ℃烘干至恒重，粉碎，過三號篩，置于干燥器中保存，備用。參照2020版《中國藥典》一部和四部測定鮮重、干重、水分、總灰分、浸出物、總黃酮和總黃酮醇苷等指標［18］。利用不同種苗移栽后干重產量與總黃酮醇苷含量計算總黃酮醇苷產量進行綜合評價，即總黃酮醇苷產量=干重產量×總黃酮醇苷含量。

1.4 數據分析

采用 Microsoft Excel 2010 和DPS 9.01進行數據處理與統計分析。

2 結果與分析

2.1 不同種苗不同采收時間的藥材產量

2.1.1 分株苗不同采收時間的鮮重、干重及折干率 隨著植株生長發育時間的延長，移栽后藥材的鮮重和干重呈M 形變化，在8 月8日和10 月23 日有2 個明顯的高峰期。4—6月，分株苗植株正處于萌芽展葉期，其鮮重和干重均較低，隨著生育期后移，鮮重和干重均逐漸上升，8 月8 日前后到達第1 個高峰期，而后有所下降，其原因與此階段雨水偏少和天氣干旱有關，從而導致土壤墑情較差，10月23日前后達到第2 個高峰期，鮮重、干重產量分別為48.19 kg/667m2、21.84 kg/667m2，比8 月8 日分別上升15.54%、26.17%（圖1）。折干率隨著生育時間的延長，總體呈逐漸升高的趨勢，在10 月23 日達到最大值（45%）（圖1）。

圖1 黔藿1號分株苗不同采收時間的鮮重、干重和折干率變化

2.1.2 根莖苗不同采收時間的鮮重、干重及折干率 4—6 月，根莖苗植株正處于萌芽展葉期，其鮮重和干重產量均較低，基本呈直線增長。7—11 月呈現波動上升趨勢，8 月8 日有明顯的下降趨勢，這可能與此階段的降雨少有關，10 月23 日后藥材的鮮重和干重均達最大值，其產量分別為38.20 kg/667m2、17.36 kg/667m2（圖2）。折干率隨著生育期的后移，呈現先升后降的趨勢，4 月初葉片折干率最低，為0.23%；11 月上旬折干率最高，為0.51%。

圖2 黔藿1號根莖苗不同采收時間的鮮重、干重和折干率

2.1.3 實生苗不同采收時間的鮮重、干重及折干率 隨著生育時間的延長，實生苗植株的鮮重和干重呈上升趨勢，4—5月鮮重和干重增幅較大，6—10月趨于平緩，11月8日鮮重和干重增加且出現峰值，11月下旬開始下降。移栽后在4 月6 日采收的藥材鮮重和干重最低，為5.12 kg/667m2和1.46 kg/667m2；6—10月的鮮重和干重為16.57～24.32 kg/667m2和7.59～10.41 kg/667m2；11月8日鮮重和干重分別為33.10 kg/667m2、12.28 kg/667m2，分別是4月6日的6.5倍和8.4倍（圖3）；藥材的折干率在4—5 月較低，為0.27%～0.36%；6—11月折干率較高，為0.41%～0.47%，其中10月23日最高，是4月6日的1.47倍（圖3）。

圖3 黔藿1號實生苗不同采收時間的鮮重、干重和折干率

2.2 不同種苗不同采收時間的藥材質量

2.2.1 分株苗不同采收時間的藥材質量

2020 版《中國藥典》一部規定，淫羊藿藥材水分不得超過12.0%，總灰分不超過8.0%，浸出物不少于15.0%，總黃酮大于5.0%，總黃酮醇苷大于1.5%。從表1 可知，分株苗不同采收時間黔藿1 號的水分含量為2.46%～5.31%，4 月6 日采收的水分含量最低，10 月23日采收的水分含量最高，各采收時間黔藿1號的水分含量均合格；總灰分含量為4.59%～7.93%，4 月6 日采收的總灰分含量最低，11 月23 日采收的總灰分含量最高，各采收時間黔藿1號的總灰分含量均合格；浸出物含量為25.56%～39.50%，8 月23 日采收的浸出物含量最高，是2020 版《中國藥典》一部規定的2.6倍，其余各采收時間浸出物含量也高于2020 版《中國藥典》一部的規定值，各采收時間黔藿1號的浸出物含量均合格；總黃酮含量為8.73%～16.87%，5 月23 日采收的總黃酮含量最高，是2020 版《中國藥典》一部規定的3.37倍，5月23日和6月8日采收的總黃酮含量顯著高于其余采收時間的總黃酮含量，其余各采收時間的總黃酮含量也高于2020 版《中國藥典》一部的規定值，各采收時間黔藿1號的總黃酮含量均合格；總黃酮醇苷含量為6.99%～13.30%，各采收時間黔藿1號的總黃酮醇苷含量均合格。4—6 月黔藿1號的總黃酮醇苷含量逐漸升高，在6 月8 日達到最高，與其余采收時間存在顯著差異，之后總黃酮醇苷含量開始降低。綜上所述，分株苗移栽后各采收時間黔藿1 號的水分、總灰分、浸出物、總黃酮及總黃酮醇苷含量均合格，符合2020版《中國藥典》一部規定。

表1 分株苗不同采收時間黔藿1號的質量成分含量%

2.2.2 根莖苗不同采收時間的藥材質量

根莖苗不同采收時間黔藿1號的水分含量、總灰分含量、浸出物含量、總黃酮含量、總黃酮醇苷含量分別為2.29%～3.83%、4.61%～7.86%、26.65%～35.11%、9.54%～14.83%、7.33%～12.05%，各采收時間黔藿1號的水分、總灰分、浸出物、總黃酮、總黃酮醇苷含量均合格，其中8 月23 日采收黔藿1 號的浸出物含量最高，為35.11%，是2020 版《中國藥典》一部規定的2.34倍，其余各采收時間浸出物含量也高于2020版《中國藥典》一部的規定值；5月8日采收黔藿1號的總黃酮含量最高，為14.83%，是2020版《中國藥典》一部規定的2.97倍，其余各采收時間總黃酮含量也高于2020版《中國藥典》一部的規定值；4—6月采收黔藿1號的總黃酮醇苷含量逐漸升高，在6月23日達到最高，為12.05%，與7月8日無顯著差異，與其余采收時間存在顯著差異，之后總黃酮醇苷含量開始降低，8月6日又開始上升，8月23日達到第二個高峰，為9.85%，之后又開始下降，最終趨于平緩（表2）。

表2 根莖苗不同采收時間黔藿1號的質量成分含量%

2.2.3 實生苗不同采收時間的藥材質量

實生苗不同采收時間黔藿1號的水分含量、總灰分含量、浸出物含量、總黃酮含量、總黃酮醇苷含量分別為2.68%～4.60%、4.78%～7.92%、27.88%～37.26%、8.57%～15.14%、6.94%～11.06%，表明不同采收時間黔藿1號的水分、總灰分、浸出物、總黃酮、總黃酮醇苷含量均合格，其中4—6月黔藿1號的總黃酮醇苷含量逐漸升高，在6月8日達到最高，為11.06%，與6月23日、7月8日兩個采收時間無顯著差異，與其余采收時間存在顯著差異，之后總黃酮醇苷含量開始降低（表3）。

2.3 不同種苗不同采收時間黔藿1號的總黃酮醇苷產量

分株苗移栽后不同采收時間黔藿1 號的總黃酮醇苷產量為0.18～1.57 kg/667m2，平均為1.11 kg/667m2，不同采收時間的總黃酮醇苷產量從大到小依次為7 月8 日＞10月23 日＞8 月8 日＞9 月23 日＞6 月23 日=7月23 日＞6 月8 日＞11 月8 日＞8 月23 日＞9月8 日＞10 月8 日＞11 月23 日＞5 月23 日＞5 月8 日＞4 月23 日＞4 月6 日，7 月8 日采收的總黃酮醇苷產量最高，為1.57 kg/667m2。根莖苗移栽后不同采收時間黔藿1 號的總黃酮醇苷產量為0.12～1.44 kg/667m2，平均為0.91 kg/667m2，不同采收時間的總黃酮醇苷產量從大到小依次為10 月23 日＞9 月8日＞11 月23 日＞9 月23 日＞6 月23 日=11月8 日=10 月8 日＞8 月23 日＞7 月23 日＞7月8日＞6月8日＞8月8日＞5月23 日＞5月8 日＞4 月23 日＞4 月6 日，10 月23 日采收的總黃酮醇苷產量最高，為1.44 kg/667m2。實生苗移栽后不同采收時間黔藿1 號的總黃酮醇苷產量為0.14～0.92 kg/667m2，平均為0.70 kg/667m2，總黃酮醇苷產量從大到小依次為6 月23 日＞9 月8 日＞6 月8 日＞9月23 日＞11 月8 日=8 月23 日＞8 月8 日＞10月23日＞11月23日=7月8日＞10月8日＞7月23 日＞5 月23 日＞5 月8 日＞4 月23 日＞4月6 日，6 月23 日采收的總黃酮醇苷產量最高，為0.92 kg/667m2（表4）。

表4 不同種苗不同采收時間黔藿1號的總黃酮醇苷產量kg/667m2

2.4 不同種苗不同采收時間黔藿1號的產值

從表5可知，不同采收時間黔藿1號的產值存在差異，總體上分株苗＞根莖苗＞實生苗。分株苗、根莖苗和實生苗產值分別為172.80～1 746.94 元/667m2、110.14～1 389.06 元/667m2和117.06～982.40元/667m2，分株苗和根莖苗在10 月23 日采收時均達到最高產值（1 746.94元/667m2、1 389.06元/667m2），分別比4月6日采收時提高1 574.14元/667m2和1 278.92元/667m2；實生苗在11月8日采收時達到最高產值，為982.40元/667m2，比4月6日采收時提高865.34元/667m2（表5）。

表5 不同種苗不同采收時間黔藿1號的產值元/667m2

3 討論與結論

箭葉淫羊藿優良品種黔藿1 號不同種苗移栽后不同采收時間的產質量差異較大，分株苗和根莖苗移栽后的藥材產量較高，實生苗移栽后的藥材產量較低。分株苗、根莖苗及實生苗移栽后的藥材產量（產值）最高峰與質量最高峰不重合，通過任飛龍等［19］的方法，根據移栽后藥材干重產量與總黃酮醇苷含量計算總黃酮醇苷產量進行綜合評價，得出黔藿1 號分株苗、根莖苗及實生苗藥材分別在7 月8 日、10 月23 日、6 月23 日采收可使總黃酮醇苷產量達到最大值（1.57 kg/667m2、1.44 kg/667m2和0.92 kg/667m2），但此時分株苗和實生苗的產值較低，在實際生產中藥農認可度低，難以推廣使用。通過比較分株苗、根莖苗及實生苗移栽后的藥材產值，得出移栽后的分株苗和根莖苗在10 月23 日采收時藥材產值最高，實生苗移栽后在11 月8日采收時的藥材產值最高，且分株苗、根莖苗及實生苗移栽后在10 月下旬至11 月上旬采收時藥材質量均符合2020 版《中國藥典》規定，故認為黔藿1 號的適宜采收期為10 月下旬至11月上旬。

箭葉淫羊藿不同采收期黃酮類成分含量大多出現2個高峰，即生長初期或花期［4］。任飛龍等［19］認為2個含量高峰期分別是3月和5—6月。試驗發現黔藿1號在6—7月出現總黃酮醇苷含量高峰，這與任飛龍等的觀點基本一致；黔藿1號在10月下旬至11月上旬出現葉片干重的高峰，而任飛龍等認為高峰在8月31日，這可能是由于試驗材料的品種、種植年限及試驗地的生境等不同導致。本試驗各采收時間的葉片鮮重和干重隨著生育時間的延長呈M形，這可能是某一采樣時期的采樣植株偏大或偏小導致，但總體上仍呈上升趨勢。目前，箭葉淫羊藿主要采用分株苗、根莖苗和實生苗進行栽培，試驗探究黔藿1號不同種苗在不同采收時間藥材產量和質量的變化特性，采用干重產量和質量進行綜合評價，黔藿1號分株苗、根莖苗和實生苗在10月23日和11月8日的干重分別為16.94～21.84 kg/667m2、10.41～12.28 kg/667m2、14.66～17.36 kg/667m2，產值分別為1 354.94～1 746.94 元/667m2、1 172.54～1 389.06 元/667m2、832.54～982.40 元/667m2，總黃酮醇苷產量分別為1.25～1.53 kg/667m2、1.15～1.44 kg/667m2、0.78～0.85 kg/667m2，確定黔藿1號分株苗、根莖苗和實生苗的適宜采收期為10月下旬至11月上旬，可為黔藿1號藥材的合理采收提供指導。