心肌缺血再灌注損傷大鼠HMGB1表達水平的Meta分析

岑團 劉燕 黃照河

【摘要】目的對心肌缺血再灌注損傷（MIRI）大鼠高遷移率族蛋白B1（HMGB1）表達水平進行Meta分析。

方法在PubMed、Embase及中國國家知識基礎設施（CNKI）數(shù)據(jù)庫檢索相關文章，最終共納入16篇文獻，從這些文章中提取假手術組、模型組、預處理組的樣本量、均數(shù)和標準差，采用SYRCLE動物實驗風險評估工具進行方法學質量評價，應用Stata12.0軟件進行Meta分析。

結果MIRI大鼠模型組HMGB1表達水平顯著高于假手術組（SMD=8.66，95%CI：6.49～10.82，P＜0.001），MIRI大鼠預處理組HMGB1表達水平明顯低于模型組（SMD=-3.33，95%CI：-4.22～-2.44，P＜0.001）。亞組分析表明，不同預處理方式可能導致異質性存在。敏感性分析顯示Meta分析結果可信度較高，而漏斗圖顯示存在發(fā)表偏倚。

結論MIRI大鼠HMGB1表達水平升高，通過治療可降低MIRI大鼠HMGB1表達水平。

【關鍵詞】心肌缺血再灌注損傷；高遷移率族蛋白B1；預處理；Meta分析

中圖分類號：R542.2文獻標志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2024.05.012

ExpressionlevelsofHMGB1inratswithmyocardialischemia-reperfusioninjury：ameta-analysis

[HJ1*2][HJ]

CENTuan1，LIUYan1，HUANGZhaohe2

（1.DepartmentofCardiovascularMedicine，AffiliatedHospitalofYoujiangMedicalUniversityfor

Nationalities，Baise533000，Guangxi，China;2.GraduateSchool，YoujiangMedical

UniversityforNationalitiesGraduateSchool，Baise533000，Guangxi，China）

【Abstract】ObjectiveToconductameta-analysisontheexpressionlevelsofhighmobilitygroupbox1（HMGB1）inratswithmyocardialischemiareperfusioninjury（MIRI）.

MethodsRelevantarticlesweresearchedinPubMed，EmbaseandChinaNationalKnowledgeInfrastructure（CNKI）databases，andatotalof16articleswerefinallyincluded.Samplesize，meanandstandarddeviationofshamoperationgroup，modelgroupandpretreatmentgroupwereextractedfromthesearticles.SYRCLEanimalexperimentriskassessmenttoolwasusedformethodologicalqualityevaluation，andStata12.0softwarewasusedformetaanalysis.

ResultsTheexpressionlevelsofHMGB1intheMIRIratmodelgroupweresignificantlyhigherthanthoseintheshamoperationgroup（SMD=8.66，95%CI：6.49-10.82，P<0.001）.TheexpressionlevelsofHMGB1intheMIRIratpretreatmentgroupweresignificantlylowerthanthoseinthemodelgroup（SMD=-3.33，95%CI：-4.22to-2.44，P<0.001）.Subgroupanalysisshowedthatdifferentpretreatmentmethodsmightleadtoheterogeneity.Sensitivityanalysisshowedthatmeta-analysisresultsweremorereliable，whilefunnelplotshowedaexistenceofpublicationbias.

ConclusionTheexpressionlevelsofHMGB1inMIRIratsareincreased，andtreatmentcanreducetheexpressionlevelsofHMGB1inMIRIrats.

【Keywords】myocardialischemiareperfusioninjury（MIRI）;highmobilitygroupbox1（HMGB1）;pretreatment;metaanalysis

據(jù)《中國2018年心血管病報告》［1］，冠心病是全球范圍內導致死亡和殘疾的主要原因之一，而急性心肌梗死的患病率很高，心肌梗死已經(jīng)成為世界性公共衛(wèi)生問題。急性心肌梗死早期經(jīng)皮冠狀動脈介入治療及藥物溶栓治療可恢復缺血區(qū)心肌組織血供，挽救瀕死心肌，減少心肌梗死面積，降低心衰發(fā)生率和住院病死率［2］。然而，心肌組織在缺血基礎上恢復血流后損傷并未修復反而加重，甚至發(fā)生不可逆的心肌損傷，這一過程稱為心肌缺血再灌注損傷（myocardialischemiareperfusioninjury，MIRI）。目前對MIRI的發(fā)生機制尚未完全明確，MIRI在心血管領域研究仍很熱門，國內外學者對MIRI的機理做了大量的研究，模擬這一損傷的進程。

高遷移率族蛋白B1（highmobilitygroupbox1，HMGB1）是一種高度保守的DNA引導蛋白，可通過損傷、凋亡和壞死細胞主動分泌或受損細胞被動釋放進入細胞外，介導炎性反應，是一種重要的炎性介質和促炎性細胞因子［3］。HMGB1在許多心血管疾病中具有關鍵作用，如心肌梗死、心肌缺血再灌注損傷和心力衰竭等［4-5］。MIRI會引發(fā)多種不良心血管后果，如心臟功能障礙、冠狀動脈痙攣、心搏驟停甚至死亡等。因此，減輕缺血再灌注損傷在急性心肌梗死的治療中至關重要。JENNINGS在1960年首次指出［6］，當心肌血液供應重新建立時馬上進行干預，可大大降低組織損傷和梗死面積。因此，在臨床上研究如何減輕MIRI具有重要意義。

盡管自20世紀60年代以來已經(jīng)有大量HMGB1在MIRI大鼠中表達的研究被報道，但是在循證醫(yī)學方面還沒有任何關于HMGB1在MIRI大鼠中表達的Meta分析報告。因此，研究MIRI大鼠HMGB1表達水平可能為我們對MIRI臨床意義的理解鋪平道路。本研究以標準化均數(shù)差（standardizedmeandifference，SMD）作為效應量進行Meta分析，對MIRI大鼠HMGB1表達水平進行了研究。

1資料與方法

1.1搜索策略

本研究是根據(jù)2010年系統(tǒng)評價和薈萃分析的首選報告項目（PRISMA）聲明進行設計的［7］，對PubMed、Embase及中國國家知識基礎設施（CNKI）進行了系統(tǒng)的文獻檢索，以檢索所有相關文章。檢索時限從建庫至2024年2月1日。檢索語言無限制。本次文獻檢索使用MeSH和非MeSH包括：“高遷移率族蛋白B1”“highmobilitygroupbox1”“HMGB1”“心肌缺血再灌注損傷”“myocardialischemiareperfusioninjury”“MIRI”。同時，追溯納入研究的參考文獻和已發(fā)表的綜述，以尋找任何額外的相關研究。兩位作者以滿足排除和納入標準的方式，將系統(tǒng)性審查過程獨立地限制于隨機對照試驗研究。

1.2納入和排除標準

納入標準：①研究類型。國內外公開發(fā)表的關于HMGB1在MIRI大鼠中的隨機對照試驗研究。②研究對象。大鼠隨機分為假手術組、模型組、預處理組，其中結扎冠狀動脈左前降支一段時間，然后剪開結扎線再灌注一段時間為MIRI模型；冠狀動脈穿線但不結扎為假手術組；MIRI模型進行灌胃、靜脈注射、腹腔注射、針灸等干預措施為預處理組。③評價指標。通過Westernblot法檢測HMGB1表達水平；文獻有明確的HMGB1檢測結果；文獻有可提取的原始數(shù)據(jù)（樣本量、均數(shù)和標準差）。④研究信息真實可靠。排除標準：①重復發(fā)表的文獻。②綜述、會議論文等無數(shù)據(jù)的文獻。③研究對象為非大鼠的文獻。④無對照組的文獻。⑤標本來源為非心肌組織的文獻。⑥只提供HMGB1中值或范圍的文獻。⑦研究質量不高、信息不全的文獻。

1.3數(shù)據(jù)提取

由兩位作者獨立地從納入研究中提取以下內容：第一作者姓名、時間、雌雄、周齡、體重、提取成分、HMGB1檢測方式、心肌缺血時間及再灌注時間，以及預處理組、模型組和假手術組的樣本量、均數(shù)和標準差。兩位作者出現(xiàn)分歧時通過與第三位作者的討論得以解決，直到達成共識為止。

1.4質量評估與統(tǒng)計分析

采用SYRCLE動物實驗風險評估工具進行方法學質量評價［8］。應用Stata12.0軟件對提取的數(shù)據(jù)進行Meta分析。首先，對納入研究進行異質性分析，采用Q檢驗和I2檢驗評估異質性，P<0.1的Q檢驗表明存在異質性，I2檢驗將異質性分為輕度異質性（0～25%）、中度異質性（26%～50%）和高度異質性（51%～100%）。當P＞0.1且I2≤50%時提示不存在異質性，采用固定效應模型進行合并分析；反之，P≤0.1且I2＞50%時提示存在異質性，則采用隨機效應模型進行合并分析。計量資料統(tǒng)計結果采用SMD表示，所有評價指標都給出95%可信區(qū)間。使用敏感性分析評估結果的穩(wěn)定性。使用漏斗圖評估發(fā)表偏倚，用Egger線性回歸檢驗漏斗圖的對稱性。

2結果

2.1納入的文獻情況

初步文獻檢索共153篇，剔除重復性文獻10篇，剔除綜述、系統(tǒng)性評價、Meta分析、會議論文、非大鼠實驗等文獻35篇，需要瀏覽摘要的文獻108篇，需要下載全文仔細閱讀的文獻73篇，其中檢索到的外文文獻均無可提取的原始數(shù)據(jù)（樣本量、均數(shù)和標準差），故剔除了全部外文文獻，最終經(jīng)納入與排除標準篩選后，待提取數(shù)據(jù)的中文文獻共16篇（圖1）。

2.2納入文獻的特征

該研究最終共檢索納入了16篇文獻，在某些出版物中，根據(jù)預處理方式不同有多個文章內亞組。總體而言，該研究根據(jù)文章內亞組共納入了25個研究，預處理組238例，模型組238例，假手術組233例。納入本次研究的SYRCLE動物實驗風險評分均較高（表1和表2）。

2.3模型組和假手術組的定量合成

異質性檢驗顯示：P＜0.001，I2=90.9%，具有高度異質性，故采用隨機效應模型進行分析。森林圖顯示：SMD=8.66，95%CI（6.49～10.82），P＜0.001。模型組HMGB1表達水平與假手術組比較，差異有統(tǒng)計學意義（圖2）。并且可信區(qū)間未與無效軸相交且位于其右側，說明MIRI大鼠模型組HMGB1表達水平較假手術組升高。

2.4模型組和假手術組的敏感性分析

逐個剔除單項研究后再對剩余的研究進行重新合并分析，結果顯示：每剔除一項研究后對合并總體效應量的影響均較小（圖3）。說明Meta分析結果可信度較高。

2.5模型組和假手術組的發(fā)表偏倚

漏斗圖顯示不對稱（圖4），Egger線性回歸顯示：P＜0.001，說明存在發(fā)表偏倚。

2.6預處理組和模型組的定量合成

異質性檢驗顯示：P＜0.001，I2=89.5%，具有高度異質性，故采用隨機效應模型進行分析。森林圖顯示：SMD=-3.33，95%CI（-4.22～-2.44），P＜0.001。預處理組HMGB1表達水平與模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義（圖5）。并且可信區(qū)間未與無效軸相交且位于其左側，說明MIRI大鼠預處理組HMGB1表達水平較模型組降低。

2.7預處理組和模型組的亞組分析

對預處理方式進行亞組分析，亞組分析森林圖顯示：中藥治療組的異質性檢驗（P＜0.001，I2=74.1%），異質性降低；西藥治療組的異質性檢驗（P＜0.001，I2=89.6%），異質性增加；針灸治療組的異質性檢驗（P＜0.001，I2=98.5%），異質性增加（圖6）。

2.8預處理組和模型組的敏感性分析

逐個剔除單項研究后再對剩余的研究進行重新合并分析，結果顯示：每剔除一項研究后對合并總體效應量的影響均較小（圖7）。說明Meta分析結果可信度較高。

2.9預處理組和模型組的發(fā)表偏倚

漏斗圖顯示不對稱（圖8），Egger線性回歸顯示：P＜0.001，說明存在發(fā)表偏倚。

3討論

在本研究中，以SMD作為效應量進行Meta分析，對MIRI大鼠HMGB1表達水平進行了研究。這項研究是第一個為MIRI大鼠提供HMGB1表達水平的最佳證據(jù)。這項Meta分析結果顯示，MIRI大鼠HMGB1表達水平升高，預處理后表達水平降低。敏感性分析顯示Meta分析結果可信度較高。

再灌注治療是一把雙刃劍，在恢復冠狀動脈血流的同時，心肌細胞會進一步受到損傷［25］。全球每年有1800萬人死于心血管疾病，其中MIRI發(fā)生率約占50%，MIRI可引起心肌的額外損傷，從而部分抵消了血運重建的臨床益處［26］。MIRI是一個復雜的病理生理過程，其與鈣超載、氧化應激、炎癥反應、細胞凋亡和自噬等密切相關［27-28］。在MIRI實驗模型中，循環(huán)和心肌組織的HMGB1水平都有所增加，循環(huán)HMGB1主要來源于壞死的心肌細胞以及浸潤性炎性細胞的分泌，心肌HMGB1的表達在缺血后很快增加，再灌注幾天后仍保持高水平［29-31］。

目前，MIRI仍是心血管疾病治療的主要障礙，MIRI的防治是冠心病患者再灌注治療的關鍵環(huán)節(jié)，預防和治療MIRI一直是研究的熱點和瓶頸。由于HMGB1與MIRI過程中的炎性反應、細胞凋亡、氧化損傷等密切相關，故現(xiàn)代醫(yī)學對MIRI的防治主要集中于抗HMGB1抗體、膽堿能抗炎通路、他汀類藥物等［32］。由于心肌缺血再灌注是近代醫(yī)學的產物，故古代并沒有專門論述心肌缺血再灌注的研究。冠心病與MIRI發(fā)病機制不同，故治療有所不同。中醫(yī)治療具有整體理念，其主要通過活血化瘀、通經(jīng)活絡等方式防治MIRI，具有多靶點、多環(huán)節(jié)、多途徑的優(yōu)勢。2017年《經(jīng)皮冠狀動脈介入治療圍手術期心肌損傷中醫(yī)診療專家共識》提出冠狀動脈介入治療圍手術期心肌損傷屬于中醫(yī)學“胸痹、心痛、真心痛”范疇［33］，其治療常采用益氣活血、行氣化痰治療MIRI。中藥在預防MIRI中發(fā)揮重要作用［34］。復方丹參方可以減少大鼠MIRI模型中惡性心律失常的發(fā)生，縮小心肌梗死的面積［35］。通心絡可改善MIRI的血管內皮功能，降低心肌出血發(fā)生率，縮小心肌梗死面積，抑制炎癥反應，保護心肌結構和功能的完整性［36］。針灸作為中醫(yī)特色治療之一，在防治MIRI方面也有很好的治療效果，其機制可能是通過刺激迷走神經(jīng)減輕MIRI所引起的炎性反應。針灸“內關穴”對MIRI具有保護作用［37］。隨著對HMGB1研究的深入，通過干預HMGB1來防治心臟缺血再灌注損傷將會逐漸應用于臨床，為器官移植、心肌梗死后的血管開通及體外循環(huán)下心臟手術提供更高的安全保障［38］。

漏斗圖及Egger線性回歸說明存在嚴重發(fā)表偏倚，探討其原因可能如下：①檢索的數(shù)據(jù)庫有限。雖然盡可能采取多種途徑廣泛收集國內外文獻，但未檢索所有的中英文數(shù)據(jù)庫，也可能存在部分文獻的漏檢。②檢索到的外文文獻均未提供可提取的原始數(shù)據(jù)（樣本量、均數(shù)和標準差），納入的文獻均為中文文獻。③一些文獻報告為HMGB1水平中值或范圍，非正態(tài)分布不能用于最終分析。雖然本研究制訂了嚴格的納入和排除標準，但還存在著一些不足：①納入研究的預處理方式和時間不一樣，缺血時間及再灌注時間長短也不一樣，因此降低了分析結果的科學性。②研究樣本相對較小，需要更多的樣本數(shù)據(jù)驗證此分析結果的可靠性。

綜上所述，MIRI大鼠HMGB1的表達水平升高，通過治療可降低MIRI大鼠HMGB1的表達水平。

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