心肌缺血再灌注損傷大鼠HMGB1表達水平的Meta分析

岑團 劉燕 黃照河

【摘要】目的對心肌缺血再灌注損傷（MIRI）大鼠高遷移率族蛋白B1（HMGB1）表達水平進行Meta分析。

方法在PubMed、Embase及中國國家知識基礎設施（CNKI）數據庫檢索相關文章，最終共納入16篇文獻，從這些文章中提取假手術組、模型組、預處理組的樣本量、均數和標準差，采用SYRCLE動物實驗風險評估工具進行方法學質量評價，應用Stata12.0軟件進行Meta分析。

結果MIRI大鼠模型組HMGB1表達水平顯著高于假手術組（SMD=8.66，95%CI：6.49～10.82，P＜0.001），MIRI大鼠預處理組HMGB1表達水平明顯低于模型組（SMD=-3.33，95%CI：-4.22～-2.44，P＜0.001）。亞組分析表明，不同預處理方式可能導致異質性存在。敏感性分析顯示Meta分析結果可信度較高，而漏斗圖顯示存在發表偏倚。

結論MIRI大鼠HMGB1表達水平升高，通過治療可降低MIRI大鼠HMGB1表達水平。

【關鍵詞】心肌缺血再灌注損傷；高遷移率族蛋白B1；預處理；Meta分析

中圖分類號：R542.2文獻標志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2024.05.012

ExpressionlevelsofHMGB1inratswithmyocardialischemia-reperfusioninjury：ameta-analysis

[HJ1*2][HJ]

CENTuan1，LIUYan1，HUANGZhaohe2

（1.DepartmentofCardiovascularMedicine，AffiliatedHospitalofYoujiangMedicalUniversityfor

Nationalities，Baise533000，Guangxi，China;2.GraduateSchool，YoujiangMedical

UniversityforNationalitiesGraduateSchool，Baise533000，Guangxi，China）

【Abstract】ObjectiveToconductameta-analysisontheexpressionlevelsofhighmobilitygroupbox1（HMGB1）inratswithmyocardialischemiareperfusioninjury（MIRI）.

MethodsRelevantarticlesweresearchedinPubMed，EmbaseandChinaNationalKnowledgeInfrastructure（CNKI）databases，andatotalof16articleswerefinallyincluded.Samplesize，meanandstandarddeviationofshamoperationgroup，modelgroupandpretreatmentgroupwereextractedfromthesearticles.SYRCLEanimalexperimentriskassessmenttoolwasusedformethodologicalqualityevaluation，andStata12.0softwarewasusedformetaanalysis.

ResultsTheexpressionlevelsofHMGB1intheMIRIratmodelgroupweresignificantlyhigherthanthoseintheshamoperationgroup（SMD=8.66，95%CI：6.49-10.82，P<0.001）.TheexpressionlevelsofHMGB1intheMIRIratpretreatmentgroupweresignificantlylowerthanthoseinthemodelgroup（SMD=-3.33，95%CI：-4.22to-2.44，P<0.001）.Subgroupanalysisshowedthatdifferentpretreatmentmethodsmightleadtoheterogeneity.Sensitivityanalysisshowedthatmeta-analysisresultsweremorereliable，whilefunnelplotshowedaexistenceofpublicationbias.

ConclusionTheexpressionlevelsofHMGB1inMIRIratsareincreased，andtreatmentcanreducetheexpressionlevelsofHMGB1inMIRIrats.

【Keywords】myocardialischemiareperfusioninjury（MIRI）;highmobilitygroupbox1（HMGB1）;pretreatment;metaanalysis

據《中國2018年心血管病報告》［1］，冠心病是全球范圍內導致死亡和殘疾的主要原因之一，而急性心肌梗死的患病率很高，心肌梗死已經成為世界性公共衛生問題。急性心肌梗死早期經皮冠狀動脈介入治療及藥物溶栓治療可恢復缺血區心肌組織血供，挽救瀕死心肌，減少心肌梗死面積，降低心衰發生率和住院病死率［2］。然而，心肌組織在缺血基礎上恢復血流后損傷并未修復反而加重，甚至發生不可逆的心肌損傷，這一過程稱為心肌缺血再灌注損傷（myocardialischemiareperfusioninjury，MIRI）。目前對MIRI的發生機制尚未完全明確，MIRI在心血管領域研究仍很熱門，國內外學者對MIRI的機理做了大量的研究，模擬這一損傷的進程。

高遷移率族蛋白B1（highmobilitygroupbox1，HMGB1）是一種高度保守的DNA引導蛋白，可通過損傷、凋亡和壞死細胞主動分泌或受損細胞被動釋放進入細胞外，介導炎性反應，是一種重要的炎性介質和促炎性細胞因子［3］。HMGB1在許多心血管疾病中具有關鍵作用，如心肌梗死、心肌缺血再灌注損傷和心力衰竭等［4-5］。MIRI會引發多種不良心血管后果，如心臟功能障礙、冠狀動脈痙攣、心搏驟停甚至死亡等。因此，減輕缺血再灌注損傷在急性心肌梗死的治療中至關重要。JENNINGS在1960年首次指出［6］，當心肌血液供應重新建立時馬上進行干預，可大大降低組織損傷和梗死面積。因此，在臨床上研究如何減輕MIRI具有重要意義。

盡管自20世紀60年代以來已經有大量HMGB1在MIRI大鼠中表達的研究被報道，但是在循證醫學方面還沒有任何關于HMGB1在MIRI大鼠中表達的Meta分析報告。因此，研究MIRI大鼠HMGB1表達水平可能為我們對MIRI臨床意義的理解鋪平道路。本研究以標準化均數差（standardizedmeandifference，SMD）作為效應量進行Meta分析，對MIRI大鼠HMGB1表達水平進行了研究。

1資料與方法

1.1搜索策略

本研究是根據2010年系統評價和薈萃分析的首選報告項目（PRISMA）聲明進行設計的［7］，對PubMed、Embase及中國國家知識基礎設施（CNKI）進行了系統的文獻檢索，以檢索所有相關文章。檢索時限從建庫至2024年2月1日。檢索語言無限制。本次文獻檢索使用MeSH和非MeSH包括：“高遷移率族蛋白B1”“highmobilitygroupbox1”“HMGB1”“心肌缺血再灌注損傷”“myocardialischemiareperfusioninjury”“MIRI”。同時，追溯納入研究的參考文獻和已發表的綜述，以尋找任何額外的相關研究。兩位作者以滿足排除和納入標準的方式，將系統性審查過程獨立地限制于隨機對照試驗研究。

1.2納入和排除標準

納入標準：①研究類型。國內外公開發表的關于HMGB1在MIRI大鼠中的隨機對照試驗研究。②研究對象。大鼠隨機分為假手術組、模型組、預處理組，其中結扎冠狀動脈左前降支一段時間，然后剪開結扎線再灌注一段時間為MIRI模型；冠狀動脈穿線但不結扎為假手術組；MIRI模型進行灌胃、靜脈注射、腹腔注射、針灸等干預措施為預處理組。③評價指標。通過Westernblot法檢測HMGB1表達水平；文獻有明確的HMGB1檢測結果；文獻有可提取的原始數據（樣本量、均數和標準差）。④研究信息真實可靠。排除標準：①重復發表的文獻。②綜述、會議論文等無數據的文獻。③研究對象為非大鼠的文獻。④無對照組的文獻。⑤標本來源為非心肌組織的文獻。⑥只提供HMGB1中值或范圍的文獻。⑦研究質量不高、信息不全的文獻。

1.3數據提取

由兩位作者獨立地從納入研究中提取以下內容：第一作者姓名、時間、雌雄、周齡、體重、提取成分、HMGB1檢測方式、心肌缺血時間及再灌注時間，以及預處理組、模型組和假手術組的樣本量、均數和標準差。兩位作者出現分歧時通過與第三位作者的討論得以解決，直到達成共識為止。

1.4質量評估與統計分析

采用SYRCLE動物實驗風險評估工具進行方法學質量評價［8］。應用Stata12.0軟件對提取的數據進行Meta分析。首先，對納入研究進行異質性分析，采用Q檢驗和I2檢驗評估異質性，P<0.1的Q檢驗表明存在異質性，I2檢驗將異質性分為輕度異質性（0～25%）、中度異質性（26%～50%）和高度異質性（51%～100%）。當P＞0.1且I2≤50%時提示不存在異質性，采用固定效應模型進行合并分析；反之，P≤0.1且I2＞50%時提示存在異質性，則采用隨機效應模型進行合并分析。計量資料統計結果采用SMD表示，所有評價指標都給出95%可信區間。使用敏感性分析評估結果的穩定性。使用漏斗圖評估發表偏倚，用Egger線性回歸檢驗漏斗圖的對稱性。

2結果

2.1納入的文獻情況

初步文獻檢索共153篇，剔除重復性文獻10篇，剔除綜述、系統性評價、Meta分析、會議論文、非大鼠實驗等文獻35篇，需要瀏覽摘要的文獻108篇，需要下載全文仔細閱讀的文獻73篇，其中檢索到的外文文獻均無可提取的原始數據（樣本量、均數和標準差），故剔除了全部外文文獻，最終經納入與排除標準篩選后，待提取數據的中文文獻共16篇（圖1）。

2.2納入文獻的特征

該研究最終共檢索納入了16篇文獻，在某些出版物中，根據預處理方式不同有多個文章內亞組。總體而言，該研究根據文章內亞組共納入了25個研究，預處理組238例，模型組238例，假手術組233例。納入本次研究的SYRCLE動物實驗風險評分均較高（表1和表2）。

2.3模型組和假手術組的定量合成

異質性檢驗顯示：P＜0.001，I2=90.9%，具有高度異質性，故采用隨機效應模型進行分析。森林圖顯示：SMD=8.66，95%CI（6.49～10.82），P＜0.001。模型組HMGB1表達水平與假手術組比較，差異有統計學意義（圖2）。并且可信區間未與無效軸相交且位于其右側，說明MIRI大鼠模型組HMGB1表達水平較假手術組升高。

2.4模型組和假手術組的敏感性分析

逐個剔除單項研究后再對剩余的研究進行重新合并分析，結果顯示：每剔除一項研究后對合并總體效應量的影響均較小（圖3）。說明Meta分析結果可信度較高。

2.5模型組和假手術組的發表偏倚

漏斗圖顯示不對稱（圖4），Egger線性回歸顯示：P＜0.001，說明存在發表偏倚。

2.6預處理組和模型組的定量合成

異質性檢驗顯示：P＜0.001，I2=89.5%，具有高度異質性，故采用隨機效應模型進行分析。森林圖顯示：SMD=-3.33，95%CI（-4.22～-2.44），P＜0.001。預處理組HMGB1表達水平與模型組比較，差異有統計學意義（圖5）。并且可信區間未與無效軸相交且位于其左側，說明MIRI大鼠預處理組HMGB1表達水平較模型組降低。

2.7預處理組和模型組的亞組分析

對預處理方式進行亞組分析，亞組分析森林圖顯示：中藥治療組的異質性檢驗（P＜0.001，I2=74.1%），異質性降低；西藥治療組的異質性檢驗（P＜0.001，I2=89.6%），異質性增加；針灸治療組的異質性檢驗（P＜0.001，I2=98.5%），異質性增加（圖6）。

2.8預處理組和模型組的敏感性分析

逐個剔除單項研究后再對剩余的研究進行重新合并分析，結果顯示：每剔除一項研究后對合并總體效應量的影響均較小（圖7）。說明Meta分析結果可信度較高。

2.9預處理組和模型組的發表偏倚

漏斗圖顯示不對稱（圖8），Egger線性回歸顯示：P＜0.001，說明存在發表偏倚。

3討論

在本研究中，以SMD作為效應量進行Meta分析，對MIRI大鼠HMGB1表達水平進行了研究。這項研究是第一個為MIRI大鼠提供HMGB1表達水平的最佳證據。這項Meta分析結果顯示，MIRI大鼠HMGB1表達水平升高，預處理后表達水平降低。敏感性分析顯示Meta分析結果可信度較高。

再灌注治療是一把雙刃劍，在恢復冠狀動脈血流的同時，心肌細胞會進一步受到損傷［25］。全球每年有1800萬人死于心血管疾病，其中MIRI發生率約占50%，MIRI可引起心肌的額外損傷，從而部分抵消了血運重建的臨床益處［26］。MIRI是一個復雜的病理生理過程，其與鈣超載、氧化應激、炎癥反應、細胞凋亡和自噬等密切相關［27-28］。在MIRI實驗模型中，循環和心肌組織的HMGB1水平都有所增加，循環HMGB1主要來源于壞死的心肌細胞以及浸潤性炎性細胞的分泌，心肌HMGB1的表達在缺血后很快增加，再灌注幾天后仍保持高水平［29-31］。

目前，MIRI仍是心血管疾病治療的主要障礙，MIRI的防治是冠心病患者再灌注治療的關鍵環節，預防和治療MIRI一直是研究的熱點和瓶頸。由于HMGB1與MIRI過程中的炎性反應、細胞凋亡、氧化損傷等密切相關，故現代醫學對MIRI的防治主要集中于抗HMGB1抗體、膽堿能抗炎通路、他汀類藥物等［32］。由于心肌缺血再灌注是近代醫學的產物，故古代并沒有專門論述心肌缺血再灌注的研究。冠心病與MIRI發病機制不同，故治療有所不同。中醫治療具有整體理念，其主要通過活血化瘀、通經活絡等方式防治MIRI，具有多靶點、多環節、多途徑的優勢。2017年《經皮冠狀動脈介入治療圍手術期心肌損傷中醫診療專家共識》提出冠狀動脈介入治療圍手術期心肌損傷屬于中醫學“胸痹、心痛、真心痛”范疇［33］，其治療常采用益氣活血、行氣化痰治療MIRI。中藥在預防MIRI中發揮重要作用［34］。復方丹參方可以減少大鼠MIRI模型中惡性心律失常的發生，縮小心肌梗死的面積［35］。通心絡可改善MIRI的血管內皮功能，降低心肌出血發生率，縮小心肌梗死面積，抑制炎癥反應，保護心肌結構和功能的完整性［36］。針灸作為中醫特色治療之一，在防治MIRI方面也有很好的治療效果，其機制可能是通過刺激迷走神經減輕MIRI所引起的炎性反應。針灸“內關穴”對MIRI具有保護作用［37］。隨著對HMGB1研究的深入，通過干預HMGB1來防治心臟缺血再灌注損傷將會逐漸應用于臨床，為器官移植、心肌梗死后的血管開通及體外循環下心臟手術提供更高的安全保障［38］。

漏斗圖及Egger線性回歸說明存在嚴重發表偏倚，探討其原因可能如下：①檢索的數據庫有限。雖然盡可能采取多種途徑廣泛收集國內外文獻，但未檢索所有的中英文數據庫，也可能存在部分文獻的漏檢。②檢索到的外文文獻均未提供可提取的原始數據（樣本量、均數和標準差），納入的文獻均為中文文獻。③一些文獻報告為HMGB1水平中值或范圍，非正態分布不能用于最終分析。雖然本研究制訂了嚴格的納入和排除標準，但還存在著一些不足：①納入研究的預處理方式和時間不一樣，缺血時間及再灌注時間長短也不一樣，因此降低了分析結果的科學性。②研究樣本相對較小，需要更多的樣本數據驗證此分析結果的可靠性。

綜上所述，MIRI大鼠HMGB1的表達水平升高，通過治療可降低MIRI大鼠HMGB1的表達水平。

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