外周血干細(xì)胞聯(lián)合外泌體治療糖尿病足潰瘍創(chuàng)面療效觀察

[摘要]目的：探究自體PBSCs聯(lián)合SC-Exos對(duì)糖尿病足潰瘍（Diabetic foot ulcer，DFU）創(chuàng)面的治療效果。方法：將60例潰瘍患足隨機(jī)分為對(duì)照組、SC-Exos外敷組（治療組A）、PBSCs注射組（治療組B）、PBSCs聯(lián)合SC-Exos組（治療組C）各15足，在常規(guī)治療（對(duì)照組）基礎(chǔ)上，分別予以SC-Exos外敷或/和PBSCs創(chuàng)面周邊注射，2周后第2次給藥，并于第1次給藥后第4、8和12周觀察患者潰瘍創(chuàng)面面積變化，肉芽形態(tài)評(píng)分，患足疼痛、冷感和跛行癥狀評(píng)分，足背動(dòng)脈收縮期峰值流速（Peak systolic velocity，PSV）和血管內(nèi)徑及總有效率。結(jié)果：治療后，四組患足潰瘍創(chuàng)面面積變化，肉芽形態(tài)評(píng)分，患足疼痛、冷感和跛行癥狀評(píng)分，足背動(dòng)脈PSV和血管內(nèi)徑較治療前均有顯著改善，各指標(biāo)組間兩兩比較，治療組A與治療組B比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其余各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中，治療組C各指標(biāo)結(jié)果明顯優(yōu)于其他各組（P＜0.05）。治療12周后，對(duì)照組、治療組A、治療組B三組行兩兩比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療組C總有效率明顯高于其他各組（P＜0.05）。結(jié)論：PBSCs、SC-Exos和兩者聯(lián)合治療均能促進(jìn)DFU創(chuàng)面愈合，改善患足癥狀和血液循環(huán)，PBSCs和SC-Exos聯(lián)合應(yīng)用的療效比單一應(yīng)用更好。

[關(guān)鍵詞]自體外周血干細(xì)胞；外泌體；糖尿病足潰瘍；治療；創(chuàng)面愈合

[中圖分類號(hào)]R622 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A [文章編號(hào)]1008-6455（2024）08-0033-04

Therapeutic Effect of Peripheral Blood Stem Cells Combined with Exosomes on Diabetic Foot Ulcer Wounds

WANG Guoyan1， LI Qinyu2， JIA Yuping2， SANG Yuchao3， FU Songtao4， PENG Yan1， NIE Junyi1，

XIE Wenqin1， CAO Shuo1， HOU Xiuying2

（ 1.Department 1， the First Clinical College of Medicine， Shanxi Medical University， Taiyuan 030000， Shanxi， China; 2.Department of Plastic Surgery， the First Hospital of Shanxi Medical University， Taiyuan 030000， Shanxi， China; 3.Department of Chemistry and Molecular Biology， Shanxi Medical University， Taiyuan 030000， Shanxi， China; 4.Shanxi Penn Stem Cell Biotechnology Co.， Ltd， Taiyuan 030000， Shanxi， China ）

Abstract： Objective To investigate the therapeutic effect of autologous PBSCs combined with SC-Exos on diabetic foot ulcer （DFU） wound. Methods Sixty patients with ulcerated feet were randomly divided into control group， SC-Exos external application group （treatment group A）， PBSCs injection group （treatment group B）， and PBSCs combined with SC-Exos group （treatment group C） with 15 feet in each group. On the basis of conventional treatment （control group）， SC-Exos external application or/and PBSCs peripheral injection were given respectively， and the second dose was given 2 weeks later. The ulcer wound area， granulation morphology score， foot pain， cold sensation and lameness score， peak systolic velocity （PSV）， vessel diameter and total effective rate of the patients were observed at 4， 8 and 12 weeks after the first dose. Results After treatment， the wound area changes， granulation shape scores， pain， cold feeling and lameness scores of the affected foot， PSV and vessel diameter of the dorsal foot artery in the four groups were significantly improved compared with before treatment. Pairwise comparison of all indicators among groups showed no statistical significance between treatment group A and treatment group B （P＞0.05）. There were statistically significant differences among the other groups （P＜0.05）， and the results of C indexes in the treatment group were significantly better than those in the other groups （P＜0.05）. After 12 weeks of treatment， the control group， treatment group A and treatment group B were compared pair-to-pair， and the difference was not statistically significant （P＞0.05）. The total effective rate of treatment group C was significantly higher than that of other groups （P＜0.05）. Conclusion PBSCs， SC-Exos and their combined intervention can promote wound healing in patients with severe diabetic foot ulcer （DFU）， improve symptoms and blood flow of the affected foot， and the combined application of PBSCs and SC-Exos is better than the single application.

Key words： autologous peripheral blood stem cells; exosome; diabetic foot ulcer; treatment; wound healing

糖尿病足是指糖尿病患者因糖尿病所致的下肢遠(yuǎn)端神經(jīng)病變和/或不同程度的血管病變導(dǎo)致的足部潰瘍和/或深層組織破壞，伴或不伴感染[1]，是導(dǎo)致我國(guó)糖尿病患者致殘、致死的嚴(yán)重慢性并發(fā)癥之一[2]，其發(fā)病率高，治療困難，花費(fèi)巨大。近年來(lái)，糖尿病足潰瘍（DFU）外科輔助用藥成為重要研究方向，尤其在干細(xì)胞（Stem cell，SC）及其相關(guān)衍生生物制品治療DFU臨床應(yīng)用方面成果顯著。SC具有可增殖、多重分化及分泌大量細(xì)胞因子、外泌體等生物學(xué)特征。研究表明，外周血干細(xì)胞移植與血管內(nèi)皮細(xì)胞聯(lián)合可促進(jìn)新生血管形成，細(xì)胞移植顯著改善了缺血肢體的毛細(xì)血管密度[3-4]。骨髓動(dòng)員外周血干細(xì)胞（Peripheral blood stem cells，PBSCs）移植能促進(jìn)缺血肢體新生血管形成，有效改善缺血肢體的疼痛和步行距離，并促進(jìn)潰瘍愈合，且SC易于體外分離和擴(kuò)增，分離后在低溫環(huán)境下冷凍保存，不影響其生物學(xué)活性，便于制備利用[5]。同時(shí)，干細(xì)胞治療可以替代部分手術(shù)治療，在一定程度上減輕老年患者由于手術(shù)所承受的身體負(fù)擔(dān)及并發(fā)癥等[6]，尤其是下肢遠(yuǎn)端動(dòng)脈流出道差無(wú)法進(jìn)行搭橋的患者，可使一部分患者免除截肢或降低截肢平面，改善生活質(zhì)量。張璟林等[7]匯總66篇干細(xì)胞源外泌體（Exosomes，Exos）促進(jìn)糖尿病創(chuàng)面愈合的機(jī)制及應(yīng)用文獻(xiàn)，顯示Exos可通過(guò)調(diào)節(jié)炎癥、促進(jìn)血管新生、再上皮化和細(xì)胞外基質(zhì)重塑等促進(jìn)糖尿病傷口愈合。糖尿病足創(chuàng)面的本質(zhì)就是缺血，改善血供即可從根本上治療潰瘍，促進(jìn)創(chuàng)面愈合[8]。因此，本研究對(duì)局部應(yīng)用PBSCs、干細(xì)胞源Exos及兩者聯(lián)合治療DFU的療效和安全性進(jìn)行觀察，旨在為臨床防治DFU提供新的方法和理論依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 一般資料：選取2020年2月-2021年11月筆者醫(yī)院收治的糖尿病足潰瘍患者共43例，其中男28例，女15例，年齡42～75歲，平均61歲，雙下肢病變17例，單肢病變26例，患足共計(jì)60足。采用隨機(jī)數(shù)字表法將60足分為四組：對(duì)照組（常規(guī)治療組）15足，治療組A（Exos外敷組）15足，治療組B（PBSCs注射組）15足，治療組C（PBSCs注射+Exos外敷組）15足。所有患者均對(duì)檢測(cè)項(xiàng)目和本研究知情同意，本研究中的實(shí)驗(yàn)程序由筆者醫(yī)院臨床倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批號(hào)：SK006），并按照國(guó)家有關(guān)干細(xì)胞及外泌體采集、分離及移植的規(guī)定進(jìn)行。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：有明確的2型糖尿病病史；符合糖尿病足診斷且潰瘍經(jīng)過(guò)4周以上的治療未愈合。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：合并糖尿病酮癥酸中毒；合并下肢大動(dòng)脈閉塞；合并嚴(yán)重心功能衰竭、肝腎功能不全；合并精神心理疾病；合并惡性腫瘤；妊娠患者。

1.3 自體PBSCs混懸液分離：治療組B和治療組C患者皮下注射重組人粒細(xì)胞集落刺激因子150～300 μg/d，連用5 d，5 d后待白細(xì)胞達(dá)20.0×109/L以上，采集肝素抗凝外周血80～120 ml，在超凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用Ficoll梯度離心法進(jìn)一步分離PBSCs混懸液20～30 ml供移植用。流式細(xì)胞儀檢測(cè)PBSCs混懸液中CD34+細(xì)胞數(shù)，無(wú)菌分裝，一部分用于首次治療，另一部分凍存于-80℃冰箱保存。治療前，用生理鹽水洗滌細(xì)胞后，配制成CD34+細(xì)胞數(shù)量約為2×106/ml的PBSCs混懸液備用。PBSCs混懸液配制及PBSCs鏡下見圖1～2。

注：離心后可看到管內(nèi)分為三層，上層為血漿和緩沖液，下層為紅細(xì)胞和粒細(xì)胞，中間層為淋巴細(xì)胞分離液。上中層分界處有以單個(gè)核細(xì)胞為主的白色云霧層狹窄帶，即是PBSCs混懸液

圖1 Ficoll梯度離心法分離PBSCs混懸液

圖2 鏡下可見PBSCs細(xì)胞呈圓形或橢圓形，細(xì)胞體積小

1.4 SC-Exos：由山西醫(yī)科大學(xué)生化與分子生物學(xué)教研室制備，用生理鹽水定量為5 ug/ml，無(wú)菌分裝后冷藏備用。

1.5 治療方法：對(duì)所有患者進(jìn)行基礎(chǔ)治療，包括飲食控制、健康教育、采用胰島素或口服降糖藥物控制血糖（控制空腹血糖≤7.0 mmol/L，餐后血糖≤10.0 mmol/L，HbAlc＜6.5%）、改善微循環(huán)治療、營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)治療、抗生素抗感染治療等。

1.5.1 對(duì)照組：給予常規(guī)治療。對(duì)創(chuàng)面進(jìn)行清創(chuàng)消毒，敷料覆蓋包扎。

1.5.2 治療組A：給予SC-Exos外敷治療。創(chuàng)面清創(chuàng)消毒后，貼敷與創(chuàng)面面積相近的雙層無(wú)菌紗布，后在紗布上均勻滴加SC-Exos，用量為0.05 ml/cm[9]，敷料覆蓋包扎。

1.5.3 治療組B：給予自體PBSCs局部注射治療。創(chuàng)面清創(chuàng)消毒后，無(wú)菌條件下在潰瘍邊緣外1 cm處的正常組織內(nèi)點(diǎn)狀注射PBSCs（PBSCs直接到達(dá)目標(biāo)組織，在遷移過(guò)程中損失很小）[10]，注射點(diǎn)間距1.5～2.0 cm，每點(diǎn)注射干細(xì)胞懸液0.5 ml[11]，創(chuàng)面用敷料覆蓋包扎。

1.5.4 治療組C：創(chuàng)面清創(chuàng)消毒后，先后給予自體PBSCs局部注射和SC-Exos外敷，敷料覆蓋包扎。

以上每組均行常規(guī)換藥，治療組A、B、C于首次給藥2周后第2次給藥，共給藥兩次。第一次給藥后第4、8、12周分別對(duì)臨床療效進(jìn)行動(dòng)態(tài)評(píng)估。

1.6 觀察指標(biāo)

1.6.1 創(chuàng)面愈合情況：測(cè)量?jī)山M治療前和治療4周后的患足潰瘍創(chuàng)面面積（長(zhǎng)×寬），并評(píng)估創(chuàng)面肉芽形態(tài)。創(chuàng)面肉芽形態(tài)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[12]：愈合評(píng)為0分；肉芽為淡紅色，柔軟濕潤(rùn)，呈小顆粒狀評(píng)為2分；肉芽為鮮紅色，呈腫大的顆粒狀評(píng)為4分；肉芽色澤不鮮，顆粒大小不一評(píng)為6分。

1.6.2 臨床相關(guān)癥狀評(píng)分：治療前及治療8周后，統(tǒng)計(jì)比較兩組疼痛評(píng)分和間歇性跛行評(píng)分。疼痛評(píng)分采用視覺模擬評(píng)分法（Visual analogue scoring，VAS）進(jìn)行評(píng)估，0分表示無(wú)痛，10分表示劇烈疼痛。間歇性跛行評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：行走≥500 m無(wú)疼痛，記為0分；400 m≤行走＜500 m有疼痛感，記為1分；300 m≤行走＜400 m，有疼痛感，記為2分；100 m≤行走＜300 m，有疼痛感，記為3分；行走＜100 m或靜息痛記為4分。

1.6.3 足背動(dòng)脈血流動(dòng)力學(xué)相關(guān)指標(biāo)：治療前和第1次治療8周后，彩超（飛利浦 EnVisorC HD型，頻率5～18 MHz）探頭置于患側(cè)足背，取樣線與血流方向夾角＜60°，連續(xù)測(cè)3個(gè)心動(dòng)周期的PSV和血管內(nèi)徑。

1.6.4 臨床療效：根據(jù)治療前和治療12周后臨床癥狀和創(chuàng)面愈合情況，評(píng)估兩組患者臨床療效。痊愈為癥狀、體征徹底消失，且創(chuàng)面愈合良好；顯效為臨床癥狀、體征顯著改善，創(chuàng)面愈合面積超過(guò)70%；有效為臨床癥狀、體征稍有緩解，創(chuàng)面愈合面積占比為30%～69%；無(wú)效為未達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)或病情加重。治療總有效率=（痊愈+顯效+有效）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布，以（xˉ±s）表示，各組間兩兩比較行LSD-t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[例（%）]表示，各組間兩兩比較采用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四組患足創(chuàng)面愈合情況比較：治療4周后，四組患足創(chuàng)面面積及肉芽形態(tài)評(píng)分較治療前均有不同程度的減小和降低（P＜0.05），創(chuàng)面面積及肉芽形態(tài)評(píng)分各組間進(jìn)行兩兩比較，治療組A與治療組B比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其余各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中，治療組C創(chuàng)面面積及肉芽形態(tài)評(píng)分明顯低于其他各組（P＜0.05）。見表1。

2.2 四組患足疼痛和跛行評(píng)分比較：治療8周后，四組患足疼痛和跛行評(píng)分均有不同程度降低（P＜0.05），疼痛和跛行評(píng)分各組間進(jìn)行兩兩比較，治療組A與治療組B比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其余各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中，治療組C疼痛和跛行評(píng)分明顯低于其他各組（P＜0.05）。見表2。

2.3 四組患足足背動(dòng)脈彩超結(jié)果比較：治療8周后，四組患足足背動(dòng)脈彩超結(jié)果均優(yōu)于治療前（P＜0.05），各組間進(jìn)行兩兩比較，治療組A與治療組B比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其余各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中，治療組C患足足背動(dòng)脈彩超結(jié)果優(yōu)于其他各組（P＜0.05）。見表3。

2.4 四組患足療效比較：治療12周后，對(duì)照組、治療組A、治療組B三組總有效率兩兩比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療組C總有效率明顯高于其他各組（P＜0.05）。見表4。治療組C典型病例見圖3。

3 討論

DFU是一種累及神經(jīng)、血管、皮膚、肌腱甚至骨骼的慢性進(jìn)行性復(fù)雜病變，是糖尿病患者致殘、致死主要原因之一。DFU主要是由長(zhǎng)期高糖高滲環(huán)境所引起的周圍神經(jīng)病變，過(guò)度的氧化應(yīng)激引發(fā)大血管及微血管病變，從而導(dǎo)致保護(hù)性知覺喪失，潰瘍形成，由于神經(jīng)感覺的缺失，疼痛感減弱或喪失，創(chuàng)傷愈合困難，甚至?xí)?dǎo)致足部變形及截肢[13-14]。DFU的治療一直是臨床慢性傷口治療中的難題，近年來(lái)針對(duì)常規(guī)DFU治療方法的局限性，間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal stem cells，MSCs）移植在DFU臨床治療中逐漸成為研究熱點(diǎn)。MSCs是一類起源于中胚層的成體干細(xì)胞，具有自我更新和多向分化的潛能，并可通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞增殖分化、ECM的合成、釋放生長(zhǎng)因子、促進(jìn)血管形成及細(xì)胞募集，進(jìn)而促進(jìn)糖尿病潰瘍傷口的愈合[15]。對(duì)于糖尿病下肢缺血，MSCs可以在一定條件下促進(jìn)血管再生，形成新的側(cè)支循環(huán)，調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，從而達(dá)到治療下肢缺血的目的。此外，MSCs還可調(diào)整炎癥與組織重建的平衡，使受損組織處于相對(duì)穩(wěn)態(tài)的環(huán)境中，促進(jìn)組織修復(fù)與重建[16]。何雄文等[17]在足潰瘍邊緣處注射PBSCs細(xì)胞懸液，同時(shí)用活血生肌湯0.8 g/kg灌胃治療糖尿病足潰瘍模型大鼠，治療30 d后與模型組和對(duì)照組對(duì)比，治療組大鼠的血清VEGF水平、潰瘍局部組織中VEGF mRNA表達(dá)均顯著增加（P＜0.01），局部潰瘍組織CD34、CD44、CD38表達(dá)升高（P＜0.01）；同時(shí)潰瘍面的長(zhǎng)徑、短徑均縮小（P＜0.05、P＜0.01），表明活血生肌湯聯(lián)合外周血干細(xì)胞移植可促進(jìn)新生血管的形成與潰瘍創(chuàng)面的愈合。

筆者研究發(fā)現(xiàn)，PBSCs局部注射對(duì)重度DFU患足創(chuàng)面的愈合具有明顯的改善作用，表現(xiàn)為PBSCs注射和SC-Exos創(chuàng)面外敷均能促進(jìn)DF患者的潰瘍創(chuàng)面愈合，降低肉芽形態(tài)評(píng)分，兩者聯(lián)合應(yīng)用的效果優(yōu)于單一干預(yù)。研究表明動(dòng)物和人的外周血中可分離到內(nèi)皮細(xì)胞祖細(xì)胞（EPC），因此筆者采用患者經(jīng)動(dòng)員后的自體外周血干細(xì)胞移植治療糖尿病足，使干細(xì)胞在缺血的下肢組織內(nèi)分化成內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)局部血管新生。另外外周血中的內(nèi)皮祖細(xì)胞可從先前存在的血管發(fā)芽生成新的毛細(xì)血管，外泌體可以通過(guò)直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞，或使與血管生成有關(guān)的生長(zhǎng)因子等表達(dá)水平升高，從而間接作用于內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，并遷移到傷口區(qū)域，促進(jìn)血管生成[18]。外泌體可直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞，或通過(guò)調(diào)節(jié)血管生成相關(guān)的生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、趨化因子等的表達(dá)水平間接作用于內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)血管形成，為新生組織提供營(yíng)養(yǎng)和氧氣，PBSCs及SC-Exos均可間接促進(jìn)血管形成，從而改善創(chuàng)面血供；PBSCs注射和PBSCs注射聯(lián)合Exos外敷均能明顯改善DF患者患足的疼痛、冷感和跛行癥狀，明顯改善DF患者患足的血流供應(yīng)。筆者發(fā)現(xiàn)，四組患足的臨床療效總體有差別，但行PBSCs注射和SC-Exos創(chuàng)面外敷單一干預(yù)手段的組別與對(duì)照組之間兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，考慮是因納入研究的患足例數(shù)過(guò)少所致，兩者聯(lián)合應(yīng)用的組別其療效均優(yōu)于其余三組，也體現(xiàn)了聯(lián)合用藥的優(yōu)越性。

近年來(lái)，外泌體（Exosomes，Exos）在治療糖尿病足潰瘍方面受到廣泛關(guān)注，是創(chuàng)面修復(fù)和再生醫(yī)學(xué)的研究熱點(diǎn)。Exos是多種類型細(xì)胞分泌的一類納米級(jí)細(xì)胞外囊泡，可通過(guò)“配體-受體”模式，與靶細(xì)胞受體結(jié)合后激活信號(hào)通路，并將信息物質(zhì)傳遞到靶細(xì)胞內(nèi)，調(diào)節(jié)靶細(xì)胞內(nèi)的微環(huán)境和相關(guān)的蛋白功能。作為干細(xì)胞旁分泌的亞細(xì)胞成分，Exos在組織修復(fù)和再生方面顯示出優(yōu)越的特性，在調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、細(xì)胞免疫、促進(jìn)血管再生、控制細(xì)胞的增殖和凋亡、延緩神經(jīng)退行性變等生物過(guò)程中均發(fā)揮著重要的作用[19]。體外實(shí)驗(yàn)證明，人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞源外泌體（PMSCs-Exos）具有生成血管的能力[20]。蘇歡等[21]對(duì)外泌體促進(jìn)糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合的效果進(jìn)行meta分析顯示，外泌體組在糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合的第7天、第14天創(chuàng)面愈合率高于對(duì)照組，在創(chuàng)面愈合過(guò)程中創(chuàng)傷部位新生血管密度、膠原纖維沉積百分比、再上皮化程度高于對(duì)照組，瘢痕形成低于對(duì)照組，說(shuō)明外泌體應(yīng)用于糖尿病潰瘍，可以促進(jìn)創(chuàng)面新生血管產(chǎn)生、改善上皮化及膠原纖維沉積，明顯促進(jìn)創(chuàng)面愈合，并減少瘢痕形成。人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體還可通過(guò)逆轉(zhuǎn)外周胰島素抵抗和減輕胰島細(xì)胞的破壞來(lái)改善2型糖尿病[22]，這表明外泌體不僅在創(chuàng)面局部發(fā)揮作用，可能還涉及調(diào)節(jié)體內(nèi)多種機(jī)制，共同作用治療創(chuàng)面。盡管PBSCs、MSCs及其外泌體在促進(jìn)傷口愈合的治療中展示出了良好的治療效果，迄今，仍處于臨床前研究和臨床應(yīng)用的初級(jí)階段，其潛在的修復(fù)機(jī)制和長(zhǎng)期隨訪結(jié)果仍有待進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]趙晨旭，周慧敏.《中國(guó)糖尿病足診治指南》解讀[J].中國(guó)臨床醫(yī)生雜志，2021，49（12）：1405-1408.

[2]Eleftheriadou I， Tentolouris A， Tentolouris N， et al. Advancing pharmacotherapy for diabetic foot ulcers[J]. Expert Opin Pharmacother， 2019，20（9）：1153-1160.

[3]Fujita Y， Kawamoto A. Therapeutic angiogenesis using autologous cd34-positive cells for vascular diseases[J]. Ann Vasc Dis，

2022，15（4）：241-252.

[4]倪四陽(yáng)，戴玉洋，盧來(lái)春，等.干細(xì)胞治療糖尿病足潰瘍研究狀況[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2022，38（4）：356-359.

[5]鄭舒丹，吳金燕，張利平，等.間充質(zhì)干細(xì)胞源性外泌體在皮膚創(chuàng)傷修復(fù)和再生中的研究進(jìn)展[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2023，32（4）：189-193.

[6]何強(qiáng)，張培華.間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體在創(chuàng)面修復(fù)中的作用及其機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2018，27（9）：143-148.

[7]張璟琳，冷敏，朱博恒，等.干細(xì)胞源外泌體促進(jìn)糖尿病創(chuàng)面愈合的機(jī)制及應(yīng)用[J].中國(guó)組織工程研究，2022，26（7）：1113-1118.

[8]戴兵，戴偉，黃梅.糖尿病足下肢動(dòng)脈病變血管外科治療進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2021，34（10）：1102-1105.

[9]杜婧，魏翠英.間充質(zhì)干細(xì)胞治療2型糖尿病及其相關(guān)并發(fā)癥的可能機(jī)制研究進(jìn)展[J].山東醫(yī)藥，2021，61（22）：84-87.

[10]Huselstein C， Rahouadj R， de Isla N， et al. Mechanobiology of mesenchymal stem cells： Which interest for cell-based treatment？[J]. Biomed Mater Eng， 2017，28（s1）：S47-S56.

[11]鄒譯嫻，鄒曉玲，吳源陶.自體脂肪干細(xì)胞局部注射對(duì)糖尿病足創(chuàng)面愈合及細(xì)胞因子、Wnt/β-catenin通路的影響[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2019，18（9）：985-988.

[12]李響，梁學(xué)威，曹瑩瑩，等.臭氧水聯(lián)合銀黃洗劑治療糖尿病足潰瘍的臨床觀察[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2021，27（3）：411-415.

[13]Davis F M， Kimball A， Boniakowski A， et al. Dysfunctional wound healing in diabetic foot ulcers： new crossroads[J]. Curr Diab Rep， 2018，18（1）：2.

[14]Lim J Z， Ng N S， Thomas C. Prevention and treatment of diabetic foot ulcers[J]. J R Soc Med， 2017，110（3）：104-109.

[15]胡青林，黃平平.間充質(zhì)干細(xì)胞治療糖尿病下肢缺血研究進(jìn)展[J].中華細(xì)胞與干細(xì)胞雜志（電子版），2021，11（4）：246-250.

[16]Shi Y， Wang Y， Li Q， et al. Immunoregulatory mechanisms of mesenchymal stem and stromal cells in inflammatory diseases[J]. Nat Rev Nephrol， 2018，14（8）：493-507.

[17]何雄文，牛美蘭.活血生肌湯聯(lián)合外周血干細(xì)胞移植干預(yù)大鼠糖尿病足潰瘍模型的研究[J].中醫(yī)研究，2018，31（5）：63-66.

[18]邱堯，岳毅剛，邵家松，等.干細(xì)胞治療慢性難愈性創(chuàng)面的研究進(jìn)展[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2018，27（4）：148-151.

[19]丁科，韋積華，仇雯麗.不同源性外泌體促進(jìn)糖尿病足潰瘍修復(fù)的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2021，49（2）：243-247.

[20]Bakhtyar N， Jeschke M G， Herer E， et al. Exosomes from acellular Wharton's jelly of the human umbilical cord promotes skin wound healing[J]. Stem Cell Res Ther， 2018，9（1）：193.

[21]蘇歡，簡(jiǎn)華剛.外泌體促進(jìn)糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合的meta分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2022，51（2）：307-312，19.

[22]Sun Y， Shi H， Yin S， et al. Human mesenchymal stem cell derived exosomes alleviate type 2 diabetes mellitus by reversing peripheral insulin resistance and relieving β-cell destruction[J]. ACS Nano， 2018，12（8）：7613-7628.

[收稿日期]2023-05-11

本文引用格式：王國(guó)燕，李勤雨，賈玉萍，等.外周血干細(xì)胞聯(lián)合外泌體治療糖尿病足潰瘍創(chuàng)面療效觀察[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2024，33（8）：33-37.