miR-6849-3p對胃癌細胞增殖和遷移的影響及機制

［摘要］ 目的 探討miR-6849-3p對胃癌細胞增殖和遷移的影響及潛在機制。

方法 應用生物信息學方法分析驅動蛋白家族成員18B（KIF18B）在胃癌發生中的作用，通過miRwalk數據庫預測miR-6849-3p是否為其上游調控miRNA。根據轉染情況將細胞分為EGFP-KIF18B組、EGFP-KIF18B+miR-6849-3p mimic組和EGFP-KIF18B+miR-6849-3p inhibitor組，并轉染EGFP-C1、EGFP-C1+miR-6849-3p mimic、EGFP-C1+miR-6849-3p inhibitor作為對照組。采用實時熒光定量PCR（RT-qPCR）檢測各組細胞、胃癌組織及癌旁組織中miR-6849-3p及KIF18B的表達水平，通過CCK-8增殖實驗、劃痕實驗及Transwell遷移實驗檢測各組細胞增殖和遷移能力，采用Western blot法檢測各組細胞KIF18B蛋白表達量。

結果 與癌旁組織比較，胃癌組織中miR-6849-3p表達減少（t=3.7 Plt;0.05），KIF18B mRNA表達增加（t=2.9 Plt;0.05）。過表達miR-6849-3p抑制KIF18B mRNA和蛋白表達（F=27.24、17.2 Plt;0.05），抑制胃癌細胞的增殖和遷移。

結論 miR-6849-3p通過下調KIF18B表達發揮抑制胃癌細胞增殖和遷移的作用。

［關鍵詞］ 胃腫瘤；微RNAs；驅動蛋白；細胞增殖；細胞運動；計算生物學

［中圖分類號］ R735.2

［文獻標志碼］ A

［文章編號］ 2096-5532（2024）06-0807-08

doi：10.11712/jms.2096-5532.2024.60.191

［開放科學（資源服務）標識碼（OSID）］

［網絡出版］ https：//link.cnki.net/urlid/37.1517.R.20250103.1455.002;2025-01-06 11：59：24

Effect and mechanism of miR-6849-3p on the proliferation and migration of gastric cancer cells

XIA Zongyan， LI Wei， YU Hang， ZHU Qingkai， WANG Tianying， ZHOU Shaofei

（School of Clinical Medicine， Shandong Second Medical University， Weifang 261000， China）

［Abstract］ Objective To investigate the effect of miR-6849-3p on the proliferation and migration of gastric cancer cells and its potential mechanism.

Methods "The bioinformatics method was used to investigate the role of KIF18B in the development of gastric cancer， and the miRwalk database was used to predict whether miR-6849-3p was the upstream regulatory miRNA of KIF18B. According to the transfection status， the cells were divided into EGFP-KIF18B group， EGFP-KIF18B+miR-6849-3p mimic group， and EGFP-KIF18B+miR-6849-3p inhibitor group， and the cells transfected with EGFP-C "EGFP-C1+miR-6849-3p mimic， and EGFP C1+miR-6849-3p inhibitor were established as control group. Quantitative real-time PCR was used to mea-

sure the expression levels of miR-6849-3p and KIF18B in each group or cells， gastric cancer tissue， and paracancerous tissue; CCK-8 assay， scratch assay， and Transwell assay were used to observe the proliferation and migration abilities of cells in each group; Western blot was used to measure the protein expression level of KIF18B in each group.

Results "Compared with paracancerous tissue， gastric cancer tissue showed a significant reduction in the expression of miR-6849-3p （t=3.7 Plt;0.05） and a significant increase in the mRNA expression level of KIF18B （t=2.9 Plt;0.05）. Furthermore， miR-6849-3p overexpression inhibited the mRNA and protein expressions of KIF18B （F=27.2 17.2 Plt;0.05）， and inhibit the proliferation and migration of gastric cancer cells.

Conclusion This study shows that miR-6849-3p can inhibit the proliferation and migration of gastric cancer cells by downregulating the expression of KIF18B.

［Key words］ stomach neoplasms; microRNAs; kinesins; cell proliferation; cell movement; computational biology

胃癌在全球發病率和病死率均位居惡性腫瘤的第5位，晚期胃癌病人的預后較差^[1-2]。因此，探索胃癌的發病機制和開發新的胃癌治療靶點尤為重要^[3-5]。微小RNA（miRNA）是長度為20～25 nt的非編碼RNA ^[6-7]，可靶向多個信使RNA（mRNA），而1個mRNA也可以受多個miRNA的調控^[8-9]，這一特性使得基于miRNA的干預非常有效，從而使其成為有前景的新型靶向治療研究對象^[10-11]。KIF18B蛋白作為驅動蛋白超家族成員，通過與微管結合蛋白組成分子復合物，促進有絲分裂過程中微管的解聚，從而使紡錘體正常組裝以及細胞分裂^[12-14]。KIF18B 表達失調可導致微管解聚異常，從而引起細胞周期改變，在癌癥的發生發展中起著一定的作用^[15-16]。有研究表明，KIF18B通過調控CDCA8/p53信號通路影響胃癌細胞的增殖和遷移^[17]。然而，人們對KIF18B上游調控 miRNA的情況知之甚少。本研究通過生物信息學分析確定miR-6849-3p和KIF18B之間的調控關系，旨在探討miR-6849-3p是否通過靶向KIF18B影響胃癌細胞的增殖和遷移，為臨床胃癌的治療提供新的可能的潛在靶點。

1 材料與方法

1.1 生物信息學分析

從癌癥基因組圖譜（TCGA，https：//cancergenome.nih.gov/）數據庫中搜索并下載胃癌相關RNA-seq數據，并排除經化療治療的樣本，獲得222例胃癌組織和32例癌旁正常組織樣本的數據。應用R4.3.1軟件包EdgeR對TCGA數據庫中相對于癌旁組織的胃癌mRNA表達數據進行差異表達分析。將符合條件|Log2FC|＞1且FDRlt;0.05的分子設為差異表達mRNA，并用ggplot2軟件包繪制火山圖展示差異表達分析的結果。將胃癌中表達上調的mRNA上傳至STRING數據庫（https：//string-db.org/），并將相互作用評分設為最高置信度≥0.400，以構建蛋白相互作用（PPI）網絡。使用Cytoscape3.10.1軟件對PPI網絡進行可視化，并使用MCODE插件對PPI網絡進行模塊分析，以篩選與胃癌發生相關的關鍵功能模塊。應用miRwalk數據庫（http：//mirwalk.umm.uni-heidelberg.de/）預測靶向關鍵模塊基因的潛在上游調控miRNA，該數據庫整合了Targetscan、miRDB和miRTarbase數據庫中的miRNA-mRNA相互作用關系，篩選并保留其中至少2個數據庫中包含的miRNA-mRNA調控關系。利用R軟件對TCGA數據庫中249例胃癌組織和41例癌旁組織的miR-6849-3p表達數據進行差異表達分析。

1.2 實驗材料

T4 DNA連接酶、限制性內切酶Hind Ⅲ/Kpn Ⅰ和TRIzol試劑購自寶日醫生物有限公司；JM109感受態細胞購自昂羽生物；NC mimic、miR-6849-3p mimic、NC inhibitor、miR-6849-3p inhibitor、miR-6849-3p引物及KIF18B引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成；genOFF h-KIF18B_1999A購自廣州銳博生物科技有限公司；逆轉錄試劑盒及實時熒光定量PCR（RT-qPCR）試劑盒購自上海翌圣生物科技股份有限公司；pcDNA3.1（+）EGFP質粒（簡稱EGFP-C1）為課題組保存質粒（invitrogen公司）；AGS細胞購自武漢普諾塞生命科技有限公司；KIF18B抗體購自于上海艾博抗貿易有限公司；GAPDH抗體購自武漢伊萊瑞特生物公司。30例行胃癌切除術病人的癌組織及癌旁組織來自青島市市立醫院。本研究獲青島市市立醫院倫理委員會批準（倫理批號：KTLL202306132）。

1.3 EGFP-KIF18B質粒構建

以AGS細胞的cDNA為模板，通過PCR擴增KIF18B基因的CDS序列。以瓊脂糖凝膠電泳檢測并回收目的片段，用限制性內切酶Hind Ⅲ及Kpn Ⅰ分別對質粒EGFP-C1及擴增產物進行雙酶切。酶切體系：Hind Ⅲ 1 μL，Knp Ⅰ 1 μL，10×M buffer 2 μL，EGFP-C1質粒1 μL/擴增產物1 μL。酶切產物進行瓊脂糖凝膠電泳檢測并切膠回收純化。質粒和擴增產物應用T4連接酶連接。連接體系（20 μL）：10×buffer 2.0 μL、T4 DNA連接酶0.5 μL、EGFP-C1質粒0.5 μL、擴增產物15.0 μL和滅菌水2.0 μL。取20 μL連接產物加入感受態細胞中進行轉化、挑克隆。將菌液送測序，將測序正確的含KIF18B基因的質粒命名為EGFP-KIF18B，并用質粒提取盒提取菌液中的質粒。

1.4 細胞培養、轉染及分組

用AGS特異性培養液培養AGS細胞，置于體積分數為0.05 CO 2、37 ℃培養箱中培養，當細胞密度達到80%時，按照Lipofectamine^TM2000 Reagent試劑說明進行轉染。細胞培養48 h后進行下一步實驗。為了驗證miR-6849-3p對KIF18B基因表達的影響，根據細胞轉染情況將細胞分為EGFP-KIF18B組、EGFP-KIF18B+miR-6849-3p mimic組和EGFP-KIF18B+miR-6849-3p inhibitor組，并分別轉染EGFP-C1、EGFP-C1+miR-6849-3p mi-mic、EGFP-C1+miR-6849-3p inhibitor作為對照組，以排除載體質粒的影響。

1.5 RT-qPCR方法檢測miR-6849-3p和KIF18B mRNA表達水平

用TRIzol法提取細胞RNA，進行逆轉錄，之后進行RT-qPCR，并使用2^-△△Ct法計算miR-6849-3p和KIF18B mRNA的相對表達量。收集30例胃癌病人的癌組織和癌旁組織進行RT-qPCR檢測，測定miR-6849-3p和KIF18B mRNA的相對表達量。β-actin為KIF18B內參，U6為miR-6849-3p內參。miRNA的RT-qPCR程序：預變性 95 ℃、10 s，變性 95 ℃、5 s，退火/延伸 60 ℃、20 s，40個循環。mRNA的RT-qPCR程序：預變性 95 ℃、30 s，變性95 ℃、3 s，退火/延伸 60 ℃、20 s，設置40個循環。

1.6 CCK-8檢測AGS細胞增殖能力

細胞轉染48 h后，經胰酶消化、離心和重懸，以每孔6×10³個細胞的密度鋪于96孔板中，每組設置5個復孔，置于孵育箱孵育。細胞貼壁后，每孔加入100 μL含體積分數0.10 CCK-8培養液。之后分別于0、24、48、72 h使用酶標儀檢測吸光度（A）值，并繪制細胞增殖曲線。

1.7 劃痕實驗及Transwell實驗檢測AGS細胞遷移能力

1.7.1 劃痕實驗 各組細胞轉染后，用200 μL滅菌槍頭垂直畫橫線行細胞劃痕，置于倒置顯微鏡下拍照記為0 h，然后將細胞放入培養箱繼續孵育，培養24、48 h后取出拍照，進行細胞遷移率分析。細胞遷移率=（0 h劃痕面積-24 h/48 h劃痕面積）/0 h劃痕面積×100%。

1.7.2 Transwell遷移實驗 取5×10⁵個細胞接種于小室上部隔室中，用100 μL無血清培養液培養，將600 μL AGS專用培養液置于下部隔室中。放入孵育箱中孵育48 h，取出小室使用40 g/L多聚甲醛固定20 min，后用5 g/L結晶紫染液染色10 min，PBS清洗后將小室放于載玻片上，用倒置顯微鏡觀察細胞遷移狀態并拍照。

1.8 Western blot法檢測KIF18B蛋白表達水平

在6孔板中加入200 μL RIPA+PMSF蛋白裂解液提取蛋白，采用Elabscience BCA試劑盒進行蛋白濃度測定，加熱變性后上樣電泳，Western blot凝膠轉膜，快速封閉洗膜后加KIF18B一抗（1∶2 000）孵育，4 ℃過夜后洗膜加入二抗（1∶1 000），室溫孵育1 h后洗膜曝光，蛋白條帶灰度值使用Image J軟件進行分析。

1.9 統計學分析

采用GraphPad Prism 9軟件進行統計學分析。計量資料數據以±s表示，兩組數據間比較采用配對t檢驗，多組數據間比較采用單因素方差分析。Plt;0.05為差異有統計學意義。

2 結" 果

2.1 胃癌發生相關核心基因的生物信息學分析

對比TCGA數據庫中胃癌組織和癌旁組織的mRNA表達數據，結果顯示，與正常組織比較，胃癌組織中共有228個mRNA表達上調，330個mRNA表達下調（圖1A）。利用STRING數據庫對胃癌表達上調mRNA進行PPI分析，得到了一個包含130個節點和386條邊的PPI網絡（圖1B），進一步利用MCODE插件篩選網絡關鍵功能模塊，提取其中得分最高的模塊（得分：15.47 包含20個節點和147條邊），該模塊包含了癌癥發展相關基因KIF18B（圖1C），提示其可能在胃癌發展中發揮作用。

2.2 KIF18B對胃癌細胞增殖和遷移的影響

RT-qPCR結果顯示，與癌旁組織比較，癌組織中KIF18B mRNA表達增加（t=2.9 Plt;0.05）（圖2A）。利用構建的EGFP-KIF18B融合蛋白真核表達載體質粒及siKIF18B轉染AGS細胞系，并設置轉染EGFP-C1質粒的對照組。與對照組比較，轉染EGFP-KIF18B后KIF18B mRNA表達水平升高，轉染siKIF18B后KIF18B mRNA表達水平降低（F=4 618.00，Plt;0.05）（圖2B）。CCK-8實驗顯示，過表達KIF18B后細胞增殖能力增強，而敲低KIF18B表達后細胞增殖能力減弱（F=29.7 Plt;0.05）（圖2C）。劃痕實驗（圖2D、E）和Transwell實驗（圖2F、G）結果顯示，過表達KIF18B可增強胃癌細胞的遷移能力，而下調KIF18B表達則可降低胃癌細胞的遷移能力，差異均有統計學意義（F=29.56、70.9 Plt;0.05）。

2.3 miR-6849-3p對KIF18B表達的調控作用

利用miRwalk數據庫搜索可調控核心模塊中20個節點基因的miRNA，共得到19對miRNA-mRNA的調控關系（圖3A）。其中miR-6849-3p可以調控KIF18B表達（圖3B），Targetscan數據庫預測得到了miR-6849-3p與KIF18B的結合位點（圖3C）。利用TCGA胃癌與癌旁組織miRNA表達數據驗證miR-6849-3p在胃癌中的表達水平，結果顯示，與正常組織相比較，miR-6849-3p在胃癌組織中表達下調（Log2FClt;- FDRlt;0.000 1）（圖3D）。RT-qPCR檢測結果顯示，與正常組織比較，miR-6849-3p在胃癌組織中表達降低，差異有統計學意義（t=3.7 Plt;0.05）（圖3E）；多組細胞的miR-6849-3p基因表達水平比較，差異具有統計學意義（F=6 875.00，Plt;0.05）（圖3F）；miR-6849-3p高表達后KIF18B表達減少，miR-6849-3p表達減低引起KIF18B表達增加（F=27.2 Plt;0.05）（圖3G）。Western blot實驗顯示，過表達miR-6849-3p引起KIF18B蛋白表達量降低，抑制miR-6849-3p表達則引起KIF18B蛋白表達量增加（F=17.2 Plt;0.05）（圖3H、I）。

2.4 miR-6849-3p通過靶向KIF18B對胃癌細胞增殖和遷移影響

RT-qPCR結果顯示，與EGFP-KIF18B組相比較，EGFP-KIF18B+miR-6849-3p inhibitor組細胞KIF18B表達增多，EGFP-C1+miR-6849-3p mimic組KIF18B表達減少（F=38.55，Plt;0.05），提示miR-6849-3p過表達可以抑制KIF18B的表達。見圖4A。Western blot實驗顯示，miR-6849-3p過表達抑制KIF18B蛋白表達，敲低miR-6849-3p則促進KIF18B蛋白表達（F=27.48，Plt;0.05）。見圖4B、C。CCK-8實驗結果顯示，過表達miR-6849-3p可以抑制KIF18B的促細胞增殖作用，敲低miR-6849-3p則相反（F=16.09，Plt;0.05）。見圖4F。劃痕實驗（圖4D、E）和Transwell實驗（圖4G、H）顯示，過表達miR-6849-3p可以抑制KIF18B的促細胞遷移能力，而敲低miR-6849-3p后則相反（F=41.30、96.5 Plt;0.05）。

3 討" 論

目前已經開發出兩種基于miRNA的治療方法^[18-20]。一種是miRNA模擬物，該模擬物能與相應的mRNA序列相匹配，并能補充疾病中丟失的miRNA表達；另一種是miRNA抑制劑，它通過與體內成熟miRNA的強競爭性結合，阻止miRNA與其靶基因mRNA的互補配對^[21-24]。細胞周期進程失調導致細胞異常增殖是癌細胞的特征之一，細胞周期分為分裂間期和有絲分裂兩個階段^[25-27]。KIF18B可以控制有絲分裂過程中微管的長度，使紡錘體在有絲分裂中期居中，紡錘體的方向和定位確保了有絲分裂的對稱性和細胞周期的進行^[28-29]。既往研究結果表明，KIF18B在多種癌癥的發生發展過程中起著致癌作用，可通過激活Wnt/β-catenin信號通路促進肝細胞癌、宮頸癌及乳癌等癌癥的進展^[30-32]，并通過激活mTORC1信號通路促進肝細胞癌的復發^[3]。研究發現，敲低KIF18B的表達可增強肉瘤對放療的敏感性^[34]，敲低KIF18B可調節Akt/GSK-3β/β-catenin通路，從而限制乳癌細胞的增殖和侵襲，增強乳癌的化療敏感性^[35]。此外，由于在多種癌癥中過表達，且與不良臨床病理特征相關，故KIF18B可以用于獨立預測泛癌的不良預后；KIF18B與腫瘤免疫密切相關，可能是免疫療法的潛在治療靶點^[36-37]。

鑒于miRNA在癌癥治療中的廣闊前景，以及KIF18B在癌癥發生發展中的重要作用和作為治療靶點的潛力，本文重點研究了KIF18B的上游調控miRNA。本文研究結果顯示，KIF18B在胃癌組織中表達上調，可促進胃癌細胞的增殖和遷移；而miR-6849-3p在胃癌組織中表達下調，提示其可能發揮抑癌作用。miRwalk數據庫分析顯示，miR-6849-3p可能調控KIF18B的表達。本文進一步的研究結果顯示，miR-6849-3p可通過降低KIF18B表達抑制胃癌細胞增殖和遷移。miR-6849-3p作為一種新發現的miRNA，相關研究報道少見。本文驗證了miR-6849-3p通過靶向KIF18B在胃癌的發生發展中發揮作用，這為開發新的胃癌治療靶點奠定了基礎。

綜上所述，本研究驗證了在胃癌組織中miR-6849-3p表達下降，而KIF18B的表達增加，miR-6849-3p通過降低KIF18B表達在抑制胃癌細胞的增殖和遷移中發揮作用。本實驗可為開發治療胃癌的新分子靶點提供理論依據。

［參考文獻］

[1]BRAY F， LAVERSANNE M， SUNG H， et al. Global cancer statistics 2022： GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries[J]." CA： a Cancer Journal for Clinicians， 202 74（3）：229-263.

[2]SMYTH E C， NILSSON M， GRABSCH H I， et al. Gastric cancer[J]." Lancet （London， England）， 2020，396（10251）：635-648.

[3]ZENG Y J， JIN R U. Molecular pathogenesis， targeted therapies， and future perspectives for gastric cancer[J]." Seminars in Cancer Biology， 202 86（Pt 3）：566-582.

[4]LI X W， XU J， XIE J， et al. Research progress in targeted therapy and immunotherapy for gastric cancer[J]." Chinese Medical Journal， 202 135（11）：1299-1313.

[5]GUAN W L， HE Y， XU R H. Gastric cancer treatment： recent progress and future perspectives[J]." Journal of Hematology amp; Oncology， 202 16（1）：57.

[6]YATES L A， NORBURY C J， GILBERT R J C. The long and short of microRNA[J]." Cell， 201 153（3）：516-519.

[7]HE L， HANNON G J. MicroRNAs： small RNAs with a big role in gene regulation[J]." Nature Reviews Genetics， 200 5（7）：522-531.

[8]BARTEL D P. MicroRNAs： target recognition and regulatory functions[J]." Cell， 2009，136（2）：215-233.

[9]BRODERSEN P， VOINNET O. Revisiting the principles of microRNA target recognition and mode of action[J]." Nature Reviews Molecular Cell Biology， 2009，10（2）：141-148.

[10]RUPAIMOOLE R， SLACK F J. MicroRNA therapeutics： towards a new era for the management of cancer and other diseases[J]." Nature Reviews Drug Discovery， 2017，16（3）：203-222.

[11]NEMETH K， BAYRAKTAR R， FERRACIN M， et al. Non-coding RNAs in disease： from mechanisms to therapeutics[J]." Nature Reviews Genetics， 202 "25（3）：211-232.

[12]HIROKAWA N， NODA Y， TANAKA Y， et al. Kinesin su-perfamily motor proteins and intracellular transport[J]." Na-ture Reviews Molecular Cell Biology， 2009，10：682-696.

[13]TANENBAUM M E， MACUREK L， VAN DER VAART B， et al. A complex of Kif18b and MCAK promotes microtubule depolymerization and is negatively regulated by aurora kinases[J]." Current Biology， 201 "21（16）：1356-1365.

[14]MCHUGH T， WELBURN J P I. Potent microtubule-depolymerizing activity of a mitotic Kif18b-MCAK-EB network[J]." Journal of Cell Science， 202 136（5）：jcs260144.

[15]LEE Y M， KIM E， PARK M， et al. Cell cycle-regulated expression and subcellular localization of a kinesin-8 member human KIF18B[J]." Gene， 2010，466（1-2）：16-25.

[16]DEMA A， VAN HAREN J， WITTMANN T. Optogenetic EB1 inactivation shortens metaphase spindles by disrupting cortical force-producing interactions with astral microtubules[J]." Current Biology， 202 32（5）：1197-1205.e4.

[17]李怡君，王雨，原姍姍，等. KIF18B 在胃癌細胞增殖、遷移中的作用及機制研究[J]. 醫學分子生物學雜志， 202 8（1）：62-67.

[18]GARZON R， MARCUCCI G， CROCE C M. Targeting microRNAs in cancer： rationale， strategies and challenges[J]." Nature Reviews Drug Discovery， 2010，9（10）：775-789.

[19]SAMAD A F A， KAMARODDIN M F. Innovative approaches in transforming microRNAs into therapeutic tools[J]." Wiley Interdisciplinary Reviews RNA， 202 14（1）：e1768.

[20]KIM T， CROCE C M. MicroRNA： trends in clinical trials of cancer diagnosis and therapy strategies[J]." Experimental amp; Molecular Medicine， 202 55（7）：1314-1321.

[21]KARA G， CALIN G A， OZPOLAT B. RNAi-based therapeu-tics and tumor targeted delivery in cancer[J]." Advanced Drug Delivery Reviews， 202 182：114113.

[22]WANG P P， ZHOU Y， RICHARDS A M. Effective tools for RNA-derived therapeutics： siRNA interference or miRNA mimicry[J]." Theranostics， 202 11（18）：8771-8796.

[23]DIENER C， KELLER A， MEESE E. Emerging concepts of miRNA therapeutics： from cells to clinic[J]." Trends in Gene-tics： TIG， 202 38（6）：613-626.

[24]FU J Y， DONG H Y， WU J， et al. Emerging progress of RNA-based antitumor therapeutics[J]." International Journal of Biological Sciences， 202 19（10）：3159-3183.

[25]EVAN G I， VOUSDEN K H. Proliferation， cell cycle and apoptosis in cancer[J]." Nature， 200 411（6835）：342-348.

[26]MATTHEWS HK， BERTOLI C， DE BRUIN RAM. Cell cycle control in cancerz[J]." Nat Rev Mol Cell Biol， 202 "23（1）：74-88.

[27]LIU J， PENG Y H， WEI W Y. Cell cycle on the crossroad of tumorigenesis and cancer therapy[J]." Trends in Cell Biology， 202 32（1）：30-44.

[28]SHIN Y， DU Y Q， COLLIER S E， et al. Biased Brownian motion as a mechanism to facilitate nanometer-scale exploration of the microtubule plus end by a kinesin-8[J]." Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America， 2015，112（29）：E3826-E3835.

[29]MCHUGH T， GLUSZEK A A， WELBURN J P I. Microtubule end tethering of a processive kinesin-8 motor Kif18b is required for spindle positioning[J]." The Journal of Cell Biology， 2018，217（7）：2403-2416.

[30]WU Y Q， WANG A P， ZHU B Q， et al. KIF18B promotes tumor progression through activating the Wnt/β-catenin pathway in cervical cancer[J]." OncoTargets and Therapy， 2018，11：1707-1720.

[31]YANG B， WANG S Z， XIE H， et al. KIF18B promotes hepatocellular carcinoma progression through activating Wnt/β-catenin-signaling pathway[J]." Journal of Cellular Physiology， 2020，235（10）：6507-6514.

[32]LIU L， ZHANG Z F， XIA X L， et al. KIF18B promotes breast cancer cell proliferation， migration and invasion by targeting TRIP13 and activating the Wnt/β-catenin signaling pathway[J]." Oncology Letters， 202 23（4）：112.

[33]LI Q， SUN M Q， MENG Y， et al. Kinesin family member 18B activates mTORC1 signaling via actin gamma 1 to promote the recurrence of human hepatocellular carcinoma[J]." Oncogenesis， 202 12（1）：54.

[34]LIU W S， YU Z J， TANG H C， et al. Silencing KIF18B enhances radiosensitivity： identification of a promising therapeutic target in sarcoma[J]." EBioMedicine， 2020，61：103056.

[35]JIANG J， LIU T， HE X， et al. Silencing of KIF18B restricts proliferation and invasion and enhances the chemosensitivity of breast cancer via modulating Akt/GSK-3β/β-catenin pathway[J]." BioFactors， 202 47（5）：754-767.

[36]QIU M J， WANG Q S， LI Q T， et al. KIF18B is a prognostic biomarker and correlates with immune infiltrates in pan-cancer[J]." Frontiers in Molecular Biosciences， 202 8：559800.

[37]TANG S Q， WU Z Y， CHEN L S， et al. Multi-omics analysis reveals the association between elevated KIF18B expression and unfavorable prognosis， immune evasion， and regulatory T cell activation in nasopharyngeal carcinoma[J]." Frontiers in Immunology， 202 14： 1258344.

（本文編輯 牛兆山）