基于網絡藥理學及體外實驗方法探究和驗證理中丸治療慢性萎縮性胃炎的作用機制

[摘要]"目的"運用網絡藥理學及體外實驗方法探究并驗證理中丸治療慢性萎縮性胃炎（chronic"atrophic"gastritis，CAG）的分子機制。方法"借助中藥系統藥理學數據庫和分析平臺篩選理中丸的有效活性成分，并通過PubChem、Swiss"Target"Prediction數據庫獲取理中丸的相關作用靶點。借助GeneCards、OMIM和DisGeNET數據庫獲取CAG的相關靶點。利用Venn工具獲得理中丸治療CAG的藥物-疾病共同靶點，借助STRING數據庫構建理中丸治療CAG的藥物-疾病共同靶點互作網絡。應用Cytoscape軟件構建理中丸治療CAG的“藥物-疾病-靶點-通路”網絡，對理中丸治療CAG的藥物-疾病共同靶點進行基因功能和通路富集分析。運用Moe軟件對藥物活性成分與關鍵靶點進行分子對接和結合能力預測。構建脾胃虛寒型CAG大鼠模型，觀察理中丸對大鼠胃組織形態改變、胃黏膜細胞凋亡及CAG關鍵靶點信使RNA（messenger"RNA，mRNA）和蛋白水平表達的影響。結果"共篩選出理中丸有效活性成分57種，包括花生四烯酸、人參皂苷Rg5、五味子酯乙、阿樸天仙子堿和人參皂苷Rh2等；獲得理中丸相關作用靶點869個。獲得理中丸與CAG的共同靶點47個，其中關鍵靶點包括腫瘤蛋白P53（tumor"protein"P53，TP53）、白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子-α（tumor"necrosis"factor-α，TNF-α）、表皮生長因子受體（epidermal"growth"factor"receptor，EGFR）、B細胞淋巴瘤2（B-cell"lymphoma"2，Bcl-2）等。通路富集分析共獲得135條通路，主要包括腫瘤的發病途徑、腫瘤中的蛋白聚糖、膽堿能突觸、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信號通路等。分子對接結果顯示，TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2與五味子酯乙和人參皂苷Rh2有較好的結合活性。體外實驗發現，模型組大鼠的脾胃虛寒證候評分顯著高于空白組；理中丸可改善CAG大鼠的病理變化，顯著減少胃黏膜細胞凋亡，降低胃黏膜組織中TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2"mRNA和蛋白表達水平。結論"理中丸治療脾胃虛寒型CAG的作用可能與其調控TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2的表達、減輕炎癥反應、減少胃黏膜細胞凋亡有關。

[關鍵詞]"理中丸；慢性萎縮性胃炎；網絡藥理學；體外實驗；細胞凋亡

[中圖分類號]"R285.5""""""[文獻標識碼]"A""""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.34.015

Explore"and"verify"the"mechanism"of"action"of"Lizhong"Wan"in"treatment"of"chronic"atrophic"gastritis"based"on"network"pharmacology"and"in"vitro"experimental"method

WANG"Yan1，"ZHANG"Zhanhao2，"WANG"Jiahui2，"ZHENG"Yang2，"ZHAO"Tiejian2

1.Department"of"Spleen"and"Stomach"Diseases，"Hangzhou"Hospital"of"Traditional"Chinese"Medicine，"Hangzhou"310007，"Zhejiang，"China;"2.School"of"Basic"Medicine，"Guangxi"University"of"Chinese"Medicine，"Nanning"530200，"Guangxi，"China

[Abstract]"Objective"To"investigate"the"molecular"mechanism"of"Lizhong"Wan"in"treatment"of"chronic"atrophic"gastritis"（CAG）"using"network"pharmacology"and"in"vitro"experimental"method."Methods"The"active"ingredients"of"Lizhong"Wan"were"screened"by"Traditional"Chinese"Medicine"Systems"Pharmacology"Database"and"Analysis"Platform，"and"the"related"targets"were"obtained"from"PubChem"andnbsp;Swiss"Target"Prediction"databases."The"CAG-related"targets"were"obtained"from"GeneCards，"OMIM"and"DisGeNET"databases."The"drug-disease"common"targets"of"Lizhong"Wan"and"CAG"were"obtained"by"Venn"tool."The"interaction"network"of"common"targets"of"Lizhong"Wan"and"CAG"was"constructed"with"the"help"of"STRING"database，"and"the"drug-disease-target-pathway"network"was"constructed"with"the"help"of"Cytoscape"software."Gene"function"and"pathway"enrichment"analyses"were"performed"on"the"common"targets."The"molecular"docking"and"binding"ability"of"the"active"ingredients"of"the"drug"and"the"key"targets"were"predicted"by"using"Moe"software."The"mice"of"spleen"and"stomach"deficiency"cold"syndrome"CAG"was"established."The"effects"of"Lizhong"Wan"on"the"morphological"changes"of"gastric"tissue，"apoptosis"of"gastric"mucosa"cells"and"the"expression"of"messenger"RNA"（mRNA）"and"protein"of"the"key"target"of"CAG"were"observed."Results"A"total"of"57"active"ingredients"of"Lizhong"Wan"were"screened，"including"arachidonic"acid，"ginsenoside"Rg5，"gomisin"B，"aposiopolamine"and"ginsenoside"Rh2."869"active"targets"of"Lizhong"Wan"were"obtained."CAG"and"Lizhong"Wan"had"47"common"targets，"the"key"common"targets"including"tumor"protein"P53"（TP53），"interleukin-6"（IL-6），"tumor"necrosis"factor-α"（TNF-α），"epidermal"growth"factor"receptor"（EGFR），"B-cell"lymphoma"2"（Bcl-2），"etc.."A"total"of"135"pathways"were"obtained"by"enrichment"analysis，"mainly"including"tumor"pathogenesis，"proteoglycan"in"tumor，"cholinergic"synapse，"phosphoinositide"3-kinase/protein"kinase"B"signaling"pathway，"etc.."Molecular"docking"results"showed"that"TP53，"IL-6，"TNF-α，"EGFR，"Bcl-2"had"good"binding"activity"with"gomisin"B"and"ginsenoside"Rh2."Meanwhile，"in"vitro"experimental"found"that"the"scores"of"spleen"and"stomach"deficiency"cold"syndrome"in"model"group"were"significantly"higher"than"those"in"blank"group."Lizhong"Wan"could"improve"the"pathological"changes"of"CAG"mice，"could"significantly"reduce"the"apoptosis"of"gastric"mucosa"cells，"could"significantly"reduce"the"expression"of"mRNA"and"protein"of"TP53，"IL-6，"TNF-α，"EGFR，"Bcl-2."Conclusion"The"effect"of"Lizhong"Wan"in"treating"CAG"with"spleen"and"stomach"deficiency"cold"syndrome"may"be"related"to"regulating"the"expression"of"TP53，"IL-6，"TNF-α，"EGFR"and"Bcl-2，"alleviating"inflammation"and"reducing"apoptosis"of"gastric"mucosa"cells.

[Key"words]"Lizhong"Wan;"Chronic"atrophic"gastritis;"Network"pharmacology;"In"vitro"experimental;"Cell"apoptosis

慢性萎縮性胃炎（chronic"atrophic"gastritis，CAG）是以慢性進行性炎癥為病理基礎，胃腺體逐漸萎縮消失，伴或不伴假幽門腺化生、腸上皮化生、異型增生的一種常見消化系統疾病[1]。CAG的發病人群以中老年人居多，其癌變率為3%～8%；但近年來CAG在年輕人中的發病率逐年升高[2-4]。目前，臨床上沒有針對CAG的特效治療藥物。控制慢性炎癥、調節腺體形態是CAG研究的重點和熱點問題之一。中醫藥治療CAG的療效顯著，其可通過逆轉胃黏膜萎縮進程而減少癌變的發生[5]。中醫學理論將CAG歸于“胃脘痛”“嘈雜”等范疇，CAG與稟賦不足、外感邪氣、勞逸失調有關，以脾胃虛寒型最為常見。理中丸以干姜為君藥，大辛大熱、溫暖脾胃；人參為臣藥，益氣健脾、補虛助陽；白術為佐藥，甘溫苦燥、以助化生；炙甘草與諸藥等量，以助補虛助陽、緩急止痛，主要用于脾胃虛寒、陽虛失血、中陽不足等證，對脾虛型腹瀉具有確切療效。同時，理中丸可調控胃黏膜炎癥因子表達，介導胃腸激素調節胃腸運動，對多種消化系統疾病具有治療效果[6-8]。本文擬采用網絡藥理學和實驗驗證方法探討理中丸治療CAG的分子機制。

1""資料與方法

1.1""理中丸活性成分及其靶點的篩選

借助中藥系統藥理學數據庫和分析平臺（Traditional"Chinese"Medicine"Systems"Pharmacology"Database"and"Analysis"Platform，TCMSP）篩選理中丸的有效活性成分。篩選條件為口服生物利用度（oral"bioavailability，OB）和類藥性（drug"likeness，DL），根據OB≥30%和DL≥0.18篩選人參、白術和干姜；甘草以OB≥60%和DL≥0.18為條件篩選。將得到的有效活性成分通過PubChem和Swiss"Target"Prediction數據庫獲得其靶點信息。

1.2""CAG對應疾病靶點基因的篩選

以“chronic"atrophic"gastritis”為關鍵詞，在GeneCards、OMIM、DisGeNET數據庫中檢索CAG相關靶點，對得到的相關靶點去除重復后合并，運用Venn工具得到理中丸治療CAG的關鍵靶點。

1.3""關鍵靶點蛋白質-蛋白質相互作用網絡構建

在STRING數據庫中導入理中丸治療CAG的關鍵靶點，篩選物種為人，構建理中丸治療CAG關鍵靶點蛋白質-蛋白質相互作用（proteinprotein"interaction，PPI）網絡。

1.4""基因功能和通路富集分析

使用DAVID數據庫設置“homo"sapiens”和“Plt;0.05”為篩選條件，進行基因本體論（gene"ontology，GO）和京都基因與基因組百科全書（Kyoto"Encyclopedia"of"Genes"and"Genomes，KEGG）通路富集分析，運用微生信軟件進行結果可視化。

1.5""“藥物-疾病-靶點-通路”網絡構建

將理中丸的有效活性成分、交集基因、CAG相關靶點和KEGG通路富集分析中P值按照由小到大順序排列的前20條通路輸入Cytoscape"3.9.1中構建“靶點-通路”網絡，同時借助Network"Analyzer插件計算網絡拓撲參數。

1.6""分子對接分析

借助PDB數據庫獲取靶點結構，通過PubChem數據庫獲取理中丸有效活性成分的二維分子結構。通過Moe軟件對蛋白結構進行處理，從而完成分子對接和可視化。

1.7""體外實驗驗證

1.7.1""動物與試劑""清潔級SD大鼠30只，周齡6～8周，體質量200～220ｇ，購于湖南斯萊克景達實驗動物有限公司[許可證號：SYXK（桂）2019-0001]。理中丸[批準文號：國藥準字Z44023078，生產單位：國藥集團馮了性（佛山）藥業有限公司，規格：每丸重9g]。原位末端轉移酶標記（terminal-"deoxynucleotidyl"transferase-mediated"dUTP-biotin"nick"end"labeling，TUNEL）法試劑盒購于北京索萊寶科技有限公司。腫瘤蛋白P53（tumor"protein"P53，TP53）抗體購于武漢三鷹生物技術有限公司；白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）抗體購于Abcam公司，腫瘤壞死因子-α（tumor"necrosis"factor-α，TNF-α）抗體購于Abcam公司，表皮生長因子受體（epidermal"growth"factor"receptor，EGFR）抗體購于CST公司，B細胞淋巴瘤2（B-cell"lymphoma"2，Bcl-2）抗體購于Abcam公司。

1.7.2""動物CAG模型制備、分組及給藥""大鼠隨機分為空白組、模型組和理中丸組，每組10只。模型組和理中丸組大鼠給予1周2次60%冰乙醇灌胃，給藥容積100g/ml，同時給予2mmol/L冰脫氧膽酸鈉和30%冰乙醇交替飲用，并應用饑飽失常法（足量喂食1d，禁食1d，交替進行）飼養；空白組大鼠給予正常飼養及等量生理鹽水灌胃；造模時間均為12周[9]。造模結束后，理中丸組大鼠在正常喂食情況下給予理中丸灌胃，0.94g/kg，1次/d；模型組和空白組大鼠給予等量生理鹽水；連續給藥8周。

1.7.3""大鼠脾胃虛寒證候的觀察""通過大鼠舌象、體溫、體質量、糞便干稀程度、精神活力狀態等指標判斷大鼠是否為脾胃虛寒型CAG。設置大鼠脾胃虛寒證候評分表對大鼠進行評定。評分越高表明脾胃虛寒證越明顯，反之越輕，見表1。

1.7.4""觀察大鼠胃黏膜組織病理變化""大鼠最后1次給藥后，禁食不禁水24h，10%水合氯醛（0.4ml/100g）腹腔麻醉，剖腹取胃，沿胃大彎剪開，冰0.9%"NaCl溶液沖洗。取胃竇部組織0.5cm×0.5cm，10%甲醛固定24h，梯度乙醇脫水，常規石蠟包埋，切片厚3μm，蘇木精-伊紅（hematoxylin"and"eosin，HE）染色，在光學顯微鏡下觀察大鼠胃黏膜組織的病理變化。

1.7.5""觀察大鼠胃黏膜細胞凋亡情況""取4%多聚甲醛固定的胃黏膜組織，常規脫蠟、水化，加入蛋白酶K工作液修復組織，熒光標記TUNEL反應液染色，室溫避光孵育1h，加入4′，6-二脒基-2-苯基吲哚復染10min，抗熒光淬滅封片劑封片，置于熒光顯微鏡下觀察并采集圖像，計算細胞凋亡指數。細胞凋亡指數=陽性細胞數/視野下總細胞數×100%。正常細胞核呈藍色，陽性凋亡細胞核呈綠色。

1.7.6""檢測TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2"mRNA表達情況""取–80℃冰箱中保存的胃黏膜組織，冰浴剪碎裂解，TRIzol法提取總RNA，分析所得RNA的濃度與純度，逆轉錄合成互補DNA（complementary"DNA，cDNA），以cDNA為模板進行聚合酶鏈反應（polymerase"chain"reaction，PCR）擴增。引物序列見表2。擴增條件為：預變性95℃、30s，95℃、10s，60℃、30s，循環40次。溶解曲線95℃、15s，60℃、60s，95℃、15s。以GAPDH為內參，采用2-ΔΔCT法計算目的基因的相對表達量。相關引物由武漢領康時代生物科技有限公司合成。

1.7.7""檢測TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2蛋白表達水平""將石蠟包埋的胃黏膜組織切成2μm，常規脫蠟，3%"H2O2處理清除內源性過氧化物酶，將切片浸入0.01mol/L枸櫞酸緩沖液（pH=6.0）中抗原高壓修復。10%正常山羊血清封閉后，分別滴加相應抗體，–4℃過夜，然后依次滴加二抗、辣根過氧化物酶標記鏈親和素。顯微鏡下控制聯苯二胺顯色，蘇木素復染，脫水，透明，封片，顯微鏡觀察，應用Image"Pro"Plus"6.0軟件進行統計分析，計算相關蛋白陽性表達的平均光密度。

1.8""統計學方法

應用SPSS"27.0軟件對數據進行統計學分析。符合正態分布的計量資料以均數±標準差（"）表示，比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗。Plt;0.05為差異有統計學意義。

2""結果

2.1""理中丸活性成分和作用靶點及CAG相關靶點

借助TCMSP得到人參（22個）、白術（7個）、干姜（5個）、甘草（23個）的有效活性成分。通過Uniprot轉換相關靶點名稱后得到藥物作用靶點869個。借助GeneCards等數據庫共得到CAG相關靶點313個；將藥物作用靶點與CAG相關靶點交互處理后得到47個關鍵靶點。

2.2""關鍵靶點PPI網絡

借助STRING數據庫構建理中丸與CAG的共同靶點PPI網絡，見圖1A。用MCODE模塊將網絡進行模塊化，模塊中的score值反映該模塊節點與周邊節點的密集程度，score值越大說明該靶點在網絡中越重要，見圖1B。以度值為條件排列PPI網絡，該PPI網絡節點度值的平均值為13.74，共有12個靶點的度值大于平均值，見圖1C。其中，TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2的度值最高且與其他靶點關聯最密切，可能成為治療CAG的關鍵靶點。

2.3""GO功能分析

借助DAVID數據庫對理中丸治療CAG的關鍵靶點進行功能分析，共獲得308個條目，其中生物過程207個，分子功能43個，細胞組分24個。選取前10條GO項目，利用微生信進行可視化，顏色深淺與基因數量成正比，見圖2。

2.4""KEGG通路分析

KEGG通路富集分析共獲得135條通路，主要有腫瘤的發病途徑、腫瘤中的蛋白聚糖、膽堿能突觸、磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide"3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein"kinase"B，PKB，又稱Akt）信號通路等，見圖3。

2.5""“藥物-疾病-靶點-通路”網絡的構建

將藥物有效活性成分、交集基因、疾病靶點和KEGG通路富集分析中前20條通路導入Cytoscape"3.9.1軟件，剔除與疾病靶點無關聯的藥物活性成分，構建“關鍵靶點-通路”網絡，見圖4。結果顯示網絡包含70個節點，118條相互作用的邊。其中TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2在CAG的發病過程中有重要作用，可成為CAG治療的關鍵靶點。

2.6""“活性成分-靶點”分子對接

將核心活性成分花生四烯酸、人參皂苷Rg5、五味子酯乙、阿樸天仙子堿、人參皂苷Rh2與TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2進行分子對接，將結合能以熱圖呈現，見圖5。結果顯示，與TP53、IL-6、Bcl-2親和力最高的是人參皂苷Rh2，與TNF-α、EGFR親和力最高的是五味子酯乙。運用Moe軟件對結合活性較好的結果進行可視化，見圖6。

2.7""體外實驗結果

2.7.1""脾胃虛寒型CAG大鼠模型的構建""造模過程中動態觀察各組大鼠的毛發、進食、飲水、活動、大便、體溫、體質量等變化。造模第8周時，模型組部分大鼠出現毛發蓬亂枯燥、活動減少、肢體溫度降低。造模第11周時，模型組大部分大鼠出現進食飲水減少、蜷臥少動、體溫降低、體質量增長減慢、大便稀溏，提示脾胃虛寒型CAG大鼠模型已基本建成。造模第12周末時，與空白組比較，模型組大鼠形態消瘦，背毛枯槁、松散、易脫落、無光澤，精神萎靡，雙眼無神，活動遲鈍，食量下降，大便稀溏，肛周污染，體型偏小。模型組大鼠的脾胃虛寒證候評分顯著高于空白組[（8.30±0.60）分"vs."（3.90±0.56）分，Plt;0.05]。

2.7.2""各組大鼠胃黏膜組織的病理結果""空白組：胃底腺區胃腺豐富，排列緊密，細胞形態正常，組織未見異常。模型組：較大范圍胃腺萎縮，結構不清，可見較多膠原增生，并伴有炎癥細胞浸潤，黏膜下層間隙增寬，可見炎癥細胞滲出。理中丸組：胃黏膜病變較模型組有所好轉，炎癥細胞浸潤主要局限于黏膜淺層，胃腺萎縮，胃腺結構不清，細胞界限不清，可見較多膠原增生，組織未見明顯炎癥反應，見圖7。

2.7.3""各組大鼠胃黏膜組織細胞凋亡情況比較""空白組、模型組和理中丸組大鼠胃黏膜細胞凋亡指數分別為（2.45±0.22）%、（11.31±2.15）%和（6.51±0.88）%。與空白組比較，模型組和理中丸組細胞凋亡指數顯著增加（Plt;0.05）；而與模型組相比，理中丸組細胞凋亡指數顯著下降（P=0.005），見圖8。

2.7.4""各組TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2"mRNA表達水平比較""模型組的TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2"mRNA表達水平均顯著高于空白組（Plt;0.01）；理中丸組的TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2"mRNA表達水平均顯著低于模型組（Plt;0.01），見圖9。

2.7.5""各組P53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2蛋白表達水平比較""模型組的TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2蛋白表達水平均顯著高于空白組（Plt;0.01）；理中丸組的TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2蛋白表達水平均顯著低于模型組（Plt;0.05），見圖10。

3""討論

本文利用網絡藥理學和體外實驗法對理中丸治療脾胃虛寒型CAG的作用機制進行探究。篩選理中丸的有效活性成分，獲得花生四烯酸、人參皂苷Rg5、五味子酯乙、阿樸天仙子堿、人參皂苷Rh2等核心活性成分。花生四烯酸是體內廣泛存在的生物活性物質，對免疫、炎癥、腫瘤等發揮重要調控作用[10]。花生四烯酸代謝通路下游物質在胃黏膜損傷與修復方面扮演重要角色[11]。人參皂苷Rg5是人參的主要成分，屬于原生苷二醇人參皂苷家族，可通過G2/M期停滯抑制細胞增殖進而抑制CAG向胃癌的惡化[12]。人參皂苷Rh2表現出比較好的抗腫瘤活性，通過多靶點、多途徑產生抗腫瘤活性，對多種腫瘤有良好的抵抗效應[13]。在理中丸-CAG關鍵靶點網絡中，進一步篩選出TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2等核心靶點。TP53蛋白是一種能激活多個靶基因表達的轉錄因子，主要生物學功能是阻滯細胞周期、誘導細胞凋亡、調控DNA修復等[14]。TNF-α是由巨噬細胞分泌的重要促炎因子，其介導的腫瘤壞死因子受體相關因子1通路可引發胃黏膜組織細胞凋亡和炎癥反應[15]。EGFR過度表達可激活細胞中的增殖和分化通路，抑制細胞凋亡和血管生成導致腫瘤進展[16]。當CAG發生時，胃黏膜細胞處于活躍的增殖狀態，Bcl-2表達水平的增加可幫助細胞逃避凋亡[17]。KEGG信號通路富集分析顯示，關鍵靶點主要富集在腫瘤的發病途徑、腫瘤中的蛋白聚糖、膽堿能突觸、PI3K/Akt信號通路。KEGG通路富集血小板衍生生長因子受體β、誘導型一氧化氮合酶、蛋白激酶C"β型、谷胱甘肽硫轉移酶P1等20個交集基因，其中包括IL-6、Bcl-2、TP53、EGFR等關鍵基因。腫瘤中的蛋白聚糖富集關鍵基因包括TNF-α、EGFR和TP53。膽堿能突觸屬于生物體系統通路，是一種Ca2+介導電壓依賴性神經遞質釋放突觸，富集13種基因，包括核心基因Bcl-2[18]。PI3K/Akt信號通路的作用機制為PI3K特異性磷酸化Akt中的Thr308和Ser473，進一步調節靶基因表達以調控細胞表型[19]。PI3K/Akt信號通路富集16種基因，包括核心基因IL-6、TP53、EGFR和Bcl-2。在CAG的發病過程中，PI3K/Akt信號通路被激活，導致Bcl-2大量表達，誘導下游活性氧產生，激活氧化應激反應，加劇細胞損傷[20]。分子對接結果顯示理中丸的核心活性成分與關鍵靶點TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2均展現出較好的親和力。體外實驗結果表明理中丸可改善胃黏膜組織的病理改變，減少胃黏膜細胞凋亡，抑制TP53、IL-6、TNF-α、EGFR、Bcl-2"mRNA和蛋白的表達。

綜上，應用網絡藥理學結合體外實驗發現理中丸治療脾胃虛寒型CAG是通過多成分、多靶點、多通路的協同作用發揮療效。實驗驗證理中丸通過調控胃黏膜細胞的增殖-凋亡失衡狀態，降低炎癥反應，進而對胃黏膜萎縮小鼠黏膜細胞的損傷起到一定保護作用，發揮防治脾胃虛寒型CAG的作用，為后續深入研究提供科學依據，為理中丸的開發利用提供新思路和參考。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

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