磷脂酶CG2在潰瘍性結腸炎小鼠模型中的表達

［摘要］ 目的： 探討磷脂酶CG2（phospholipase C Gamma 2，PLCG2）在潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis，UC）小鼠模型中的表達及意義。方法： 選擇8～12周齡C57BL/6野生型（WT）雄性小鼠10只，其中5只分離不同腸段，另5只分離腸上皮細胞及固有層淋巴細胞，分別提取各個腸段和細胞總RNA，采用逆轉錄PCR（RT-PCR）和實時熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測 PLCG2 "mRNA表達。另選擇8～12周齡WT雄性小鼠15只，隨機分成3組，分別為對照組、急性發病期組和恢復期組，每組5只；急性發病期組和恢復期組用含2.5%葡聚糖硫酸鈉飲用水飼養5 d，隨后改為常規飲用水飼養，對照組予以常規飲用水飼養，在UC發展的不同階段處理小鼠并提取其結腸固有層淋巴細胞；另選擇8～12周齡WT雄性小鼠15只，以同樣方式造模，提取小鼠結腸上皮細胞；RT-PCR和qRT-PCR檢測結腸固有層淋巴細胞和腸上皮細胞中 PLCG2 "mRNA表達。結果： "PLCG2 "mRNA在WT小鼠結腸中表達與十二指腸、空腸、回腸、盲腸相比無明顯差異（ P gt;0.05）。 PLCG2 "mRNA在WT小鼠結腸固有層淋巴細胞中表達明顯高于腸上皮細胞（ P ＜ 0.05）。在小鼠結腸固有層淋巴細胞中，與對照組相比，急性發病期組（第3天）和恢復期組（第9天） PLCG2 "mRNA相對表達均明顯降低（ P ＜0.05）；在小鼠腸上皮細胞中， PLCG2 "mRNA在對照組、急性發病期組（第5天）和恢復期組（第9天）中相對表達無明顯差異（ P ＞0.05）。結論： "PLCG2 "mRNA在UC小鼠結腸固有層淋巴細胞中呈低表達，其可能在UC的發生發展中起一定作用。

［關鍵詞］ 潰瘍性結腸炎；磷脂酶CG2（PLCG2）；腸上皮細胞；固有層淋巴細胞

［中圖分類號］ R574.62" ［文獻標志碼］ A" ［文章編號］ 1671-7783（2025）01-0008-05

DOI： 10.13312/j.issn.1671-7783.y240012

［引用格式］陸雪珂， 楊燕， 婁運偉， 等. 磷脂酶CG2在潰瘍性結腸炎小鼠模型中的表達［J］. 江蘇大學學報（醫學版）， 2025， 35（1）： 8-12， 20.

［基金項目］河南省自然科學基金資助項目（222300420066）；河南省高?？萍紕撔氯瞬胖С钟媱澷Y助項目（23HASTIT049）

［作者簡介］陸雪珂（1998—），女，碩士研究生；常廷民（通訊作者），主任醫師，碩士生導師，E-mail： ctminmail@163.com

Expression of phospholipase C Gamma 2 in the mouse model of ulcerative colitis

LU Xueke¹ ， YANG Yan¹ ， LOU Yunwei² ， CHANG Tingmin¹

（1. Department of Gastroenterology， the First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical College， Xinxiang Henan 453003; 2. School of Medical Technology， Xinxiang Medical College， Xinxiang Henan 453100， China）

［Abstract］ Objective： To investigate the expression and significance of phospholipase C Gamma 2 （PLCG2） "in ulcerative colitis （UC） mouse model. Methods： Ten male C57BL/6 wild-type （WT） mice aged 8 to 12 weeks were selected， 5 of which were used to isolate different intestinal segments， and the other 5 were selected to isolate intestinal epithelial cells （IECs） and colonic lamina propria lymphocytes （LPLs）， and total RNA of each intestinal segment and cell was extracted， respectively. The expression of "PLCG2 "mRNA was detected by reverse transcription PCR （RT-PCR） and real-time fluorescence quantitative PCR （qRT-PCR）. Another 15 WT male mice aged 8 to 12 weeks were randomly divided into 3 groups： control group， acute onset group and convalescent group， with 5 mice in each group. Mice in the acute onset and recovery groups were fed with drinking water containing 2.5% dextran sulfate sodium for 5 days and then fed with conventional drinking water， while those in the control group were fed with conventional drinking water. The mice were treated at different stages of UC development and LPLs were extracted. In addition， 15 WT male mice aged 8 to 12 weeks were selected to establish the model in the same way and then IECs were extracted. "PLCG2 "mRNA expression in LPLs and IECs was detected by RT-PCR and qRT-PCR， respectively. Results： There was no significant difference in the expression of "PLCG2 "mRNA in the colon of WT mice compared with that in the duodenum， jejunum， ileum and cecum （ P gt;0.05）. The expression of "PLCG2 "mRNA in LPLs of WT mice was significantly higher than that in IECs （ P lt;0.05）. Compared with the control group， the relative expression of "PLCG2 "mRNA in the acute onset group （day 3） and convalescent group （day 9） was significantly decreased in LPLs （ P lt;0.05）. There was no significant difference in the relative expression of "PLCG2 "mRNA in IECs among the control group， the acute onset group （day 5） and the convalescent group （day "9） （ P gt;0.05）. Conclusion： The expression of "PLCG2 "mRNA is down-regulated in the LPLs of UC mice， which may play a role in the occurrence and development of UC.

［Key words］ ulcerative colitis; phospholipase C Gamma 2 （PLCG2）; intestinal epithelial cells; lamina propria lymphocytes

潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種影響結直腸黏膜的慢性炎癥性疾病，其黏膜炎癥特點為緩解與復發，典型癥狀包括腹瀉、黏液膿血便和腹痛等，目前UC發病機制尚不明確，可能涉及遺傳易感性、上皮屏障缺陷、免疫反應失調和環境因素等^［1-2］ 。目前臨床上治療UC的主要方法有傳統藥物及免疫抑制劑治療、生物制劑治療等^［3］ ，但是，均具有一定的不足之處。對可能參與UC發展的基因和遺傳位點的識別有助于進一步了解潛在的免疫調節途徑^［4］ 。

磷脂酶C（phospholipase C，PLC）將磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸水解為肌醇1，4，5-三磷酸和二酰甘油，有PLCβ、PLCγ、PLCδ、PLCε、PLCη和PLCζ同工型^［5］ 。磷脂酶CG2（phospholipase C Gamma 2， PLCG2 ）基因編碼PLCγ2，PLCγ2是磷酸肌醇特異性磷脂酶C家族的成員之一，主要在淋巴和骨髓細胞中表達，在各種免疫和炎癥中具有關鍵調節作用^［6-7］ 。PLCG2功能障礙與多種疾病有關，如自身炎癥和PLCG2相關抗體缺乏和免疫失調（auto-inflammation and PLCG2-related antibody deficiency and immune dysregulation，APLAID）、阿爾茨海默病和慢性淋巴細胞白血病等^［8-10］ 。全基因組關聯研究表明， PLCG2 常見變異與多基因炎癥性腸病相關^［11］ 。研究發現， PLCG2 基因P645L和N798S突變為兒童炎癥性腸病的致病性突變^［12］ 。目前，尚不清楚PLCG2是否參與UC的發生發展，本研究旨在探討PLCG2在UC小鼠模型中的表達及意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 C57BL/6野生型（WT）雄性小鼠，8～12周齡，體重22～26 g，40只，購于北京維通利華實驗動物技術有限公司，生產許可證號：SCXK（浙）2019-0001。小鼠飼養于新鄉醫學院第一附屬醫院生命科學技術中心SPF級動物實驗室，適應性喂養7 d。本實驗獲新鄉醫學院第一附屬醫院倫理委員會批準（倫理編號：EC-022-236）。

1.1.2 主要試劑與儀器 葡聚糖硫酸鈉（dextran sulfate sodium，DSS；相對分子量為36 000～50 000）購自美國MP Biomedicals公司；DNA酶Ⅰ/牛胰腺脫氧核糖核酸酶Ⅰ、膠原酶Ⅷ/溶組織梭菌膠原酶Ⅷ購自德國Sigma公司；Percoll液購買自美國Cytiva公司；Trizol試劑、逆轉錄試劑盒和逆轉錄PCR（RT-PCR）試劑盒購自日本TaKaRa公司；實時熒光定量-PCR（qRT-PCR）試劑盒購自南京Vazyme公司； β -肌動蛋白和 PLCG2 引物由生物工程（上海）股份有限公司合成；RT-PCR和qRT-PCR儀購自上海Thermo公司。

1.2 方法

1.2.1 消化液和Percoll液配制 在DMEM高糖溶液中加入5%胎牛血清和1∶100膠原酶Ⅷ，1∶100 DNA酶Ⅰ，配制消化液。Percoll細胞分離液、10×PBS、DMEM高糖溶液分別按體積比1∶9∶15和2∶ 18∶5混合，配制成40% Percoll溶液和80% Percoll溶液。

1.2.2 分離不同腸段 采用頸椎脫臼法處死5只小鼠，分離十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結腸并測量其長度；用剪刀縱向剪開結腸，PBS洗3遍。各個腸段分別取3 cm，加入1 mL Trizol研磨，于-80 ℃保存。

1.2.3 分離結腸上皮細胞 采用頸椎脫臼法處死小鼠，分離全結腸，用剪刀縱向剪開結腸，PBS洗3遍；剪成1 cm小塊，置于含雙抗、胎牛血清的HBSS中，37 ℃緩慢搖動30 min；用100 μm濾器過濾，取濾液備用。再將固體結腸組織放在含EDTA的PBS中37 ℃緩慢搖動30 min；再次用100 μm濾器過濾取濾液；將兩次獲得的濾液合并，于4 ℃行1 800 r/min離心5 min；棄上清液，取細胞沉淀；經上皮細胞特異性抗體——上皮細胞黏附分子染色，約85%以上細胞都是結腸上皮細胞。于-80 ℃保存。

1.2.4 分離結腸固有層淋巴細胞 將結腸上皮細胞分離后的固體結腸組織用PBS洗2遍，剪碎，置于配制好的消化液中37 ℃緩慢搖動90 min；用100 μm濾 器過濾，取濾液，于4 ℃行1 800 r/min離心5 min獲取單細胞；加入40% Percoll溶液混勻，將其沿管壁緩緩加入含2.5 mL 80% Percoll溶液的離心管中，使兩種溶液之間界限分明。以2 000 r/min離心20 min，吸取中層白色云霧狀單個核細胞層，即固有層淋巴細胞，于-80 ℃保存。

1.2.5 RT-PCR和qRT-PCR檢測 PLCG2 "mRNA表達 采用Trizol試劑提取上述組織及細胞中總RNA，按照試劑盒說明書行逆轉錄，即37 ℃ 15 min；85 ℃ 5 s；4 ℃保存，行RT-PCR，反應體系：10 μL，即3 μL雙蒸水，1 μL cDNA，5 μL Premix "Taq 和上、下游引物各0.5 μL；程序：94 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ "30 s，30個循環。

qRT-PCR體系10 μL，即3 μL雙蒸水，1 μL cDNA，5 μL ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix以及上、下游引物各0.5 μL；程序：95 ℃預變性30 s；95 ℃ 10 s，60 ℃ 30 s，40個循環；熔解曲線95 ℃ "15 s，60 ℃ 60 s，95 ℃ 15 s。采用2^-ΔΔCt 法計算mRNA相對表達量。所用引物序列如下： PLCG2 ，上游引物5′-CCAACTCCTACGCCATCACCTT-3′，下游引物5′-ATAGAGCGCGTGCTTCTCGTAG-3′； β -肌動蛋白，5′-GGCTGTATTCCCCTCCATCG-3′，下游引物5′-CCAGTTGGTAACAATGCCATGT-3′。

1.3 動物模型實驗

1.3.1 UC小鼠模型構建 取15只WT雄性小鼠，隨機分成3組，分別為對照組、急性發病期組和恢復期組，每組5只；對照組予以常規飲用水，急性發病期組和恢復期組用含2.5% DSS飲用水飼養5 d，然后予以常規飲用水；將小鼠飲用含DSS水當日設為第0天，次日設為第1天，以此類推。每天記錄小鼠體重變化及糞便情況，并行疾病活動指數（disease activity index，DAI）評分。

小鼠出現明顯體重下降、肉眼血便/隱血陽性以及DAI評分升高，即為急性UC模型構建成功。

1.3.2 DAI評分 根據小鼠大便性狀（正常為0分，松散為2分，稀便為4分）、體重下降百分數（不變為0分，1%～5%為1分，6%～10%為2分，11%～15%為3分，大于15%為4分）及隱血/肉眼血便情況（隱血陰性為0分，隱血陽性為2分，肉眼血便為4分）行DAI評分^［13］ 。

1.3.3 分離固有層淋巴細胞和結腸上皮細胞 采用頸椎脫臼法分別于第3天處死急性發病期組小鼠、第9天處死對照組和恢復期組小鼠，分離其固有層淋巴細胞。另取15只小鼠用相同方式誘導UC模型，采用頸椎脫臼法分別于第5天處死急性發病期組小鼠、第9天處死對照組和恢復期組小鼠，分離其結腸上皮細胞。

1.3.4 RT-PCR和qRT-PCR檢測小鼠不同腸段及結腸上皮細胞和結腸固有層淋巴細胞中 PLCG2 "mRNA表達 具體方法同“1.2.5”。

1.4 統計學處理

采用GraphPad Prism 8.0軟件進行統計學分析及繪圖，符合正態分布的計量資料采用均數±標準差（ x±s ）表示，兩組間比較采用獨立樣本 t 檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，組間多重比較采用LSD- t 檢驗， P ＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 "PLCG2 "mRNA在WT小鼠不同腸道組織中的表達

RT-PCR結果顯示， PLCG2 "mRNA在WT小鼠十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結腸中表達未見明顯差異（圖1A）；qRT-PCR結果顯示， PLCG2 "mRNA在結腸中表達與其他腸道相比差異無統計學意義（ P 均＞ 0.05，圖1B）。

2.2 "PLCG2 "mRNA在WT小鼠結腸固有層淋巴細胞和腸上皮細胞中的表達

RT-PCR結果顯示， PLCG2 "mRNA在WT小鼠結腸固有層淋巴細胞中表達高于腸上皮細胞（圖2A）；qRT-PCR結果顯示， PLCG2 "mRNA在WT小鼠結腸固有層淋巴細胞中表達明顯高于腸上皮細胞（ t =8.408， P ＜0.001，圖2B）。

2.3 UC小鼠不同時間點DAI評分比較

在分離結腸固有層淋巴細胞實驗中，與對照組相比，急性發病期組小鼠DAI評分第3天升高，恢復期組小鼠DAI評分于第3天開始升高，第6天開始下降（圖3A）；在分離腸上皮細胞實驗中，急性發病期組小鼠DAI評分第3天升高，第5天明顯升高；恢復期組小鼠DAI評分于第3天開始升高，第6天開始下降（圖3B）。

2.4 "PLCG2 "mRNA在UC小鼠結腸固有層淋巴細胞和腸上皮細胞中表達

RT-PCR結果顯示（圖4A），與對照組相比，急性發病期組結腸固有層淋巴細胞中 PLCG2 "mRNA表達降低，恢復期組表達變化不顯著；qRT-PCR結果顯示（圖4B），與對照組相比，急性發病期組和恢復期組結腸固有層淋巴細胞中 PLCG2 "mRNA相對表達均明顯降低（ t =0.800，0.630， P 均＜0.05），恢復期組 PLCG2 "mRNA相對表達較急性發病期組增加，但差異無統計學意義（ P＞ 0.05）。

在腸上皮細胞中，RT-PCR（圖5A）和qRT-PCR（圖 5B）結果均顯示，與對照組相比，急性發病期組和恢復期組 PLCG2 "mRNA相對表達變化不顯著（ P gt;0.05）。

3 討論

PLCG2在單核細胞、巨噬細胞、自然殺傷T細胞、樹突狀細胞和肥大細胞中表達，可通過多種途徑介導先天免疫反應及調節炎癥反應^{［5，14-15］} 。腸道固有層淋巴細胞包括B淋巴細胞、T淋巴細胞和巨噬細胞等，主要功能為合成、分泌IgA和IgM，是腸黏膜局部免疫的重要組分^［16］ 。本研究結果顯示， PLCG2 "mRNA在結腸及其他腸段表達無明顯差異，這可能與PLCG2主要在免疫細胞中表達相關。腸上皮細胞凋亡發生在UC早期階段，過度凋亡致上皮防御系統破壞，促進管腔抗原入侵，引發炎癥級聯反應并加快疾病進展^［17］ 。本研究結果顯示， PLCG2 "mRNA在WT小鼠結腸固有層淋巴細胞中表達高于腸上皮細胞，說明PLCG2主要在腸道免疫細胞中表達，其可能通過影響固有層淋巴細胞進而在急性UC中起一定的調控作用，但其具體作用機制有待進一步研究。

本研究結果顯示，在第3天時小鼠出現體重下降、大便性狀改變或者血便，DAI評分上升，提示小鼠出現腸道炎癥；因此，在第3天處死急性發病期組小鼠獲得急性發病期結腸固有層淋巴細胞樣本；在第9天時小鼠體重較之前增加，大便成形，血便減少，DAI評分下降，提示腸道炎癥恢復；因此，在第9天處死恢復期組小鼠獲得恢復期固有層淋巴細胞樣本。本研究結果顯示，與對照組相比，急性發病期組和恢復期組小鼠結腸固有層淋巴細胞中 PLCG2 "mRNA相對表達均明顯降低（ P lt;0.05）。PLCG2功能障礙可導致APLAID，在目前已報道的APLAID患者中，胃腸道可作為其累及的器官之一，主要的臨床表現包括UC和腹瀉、腹痛，此外部分患者可出現免疫缺陷，包括低IgG、低IgM、低IgA、低B淋巴細胞計數和低NK細胞計數^［18-19］ 。本研究發現 PLCG2 "mRNA在UC小鼠模型急性發病期及恢復期的結腸固有層淋巴細胞中的表達均下降，由此提示PLCG2通過影響結腸固有層淋巴細胞參與UC的發生發展，并且結合APLAID患者的免疫學特征，其可能通過調節B細胞、T細胞和（或）NK細胞功能從而影響UC的發生發展，具體機制有待進一步研究。此外，恢復期組 PLCG2 "mRNA相對表達較急性發病期組升高，但差異不顯著（ P gt;0.05），由于本實驗選取的是小鼠在第3天急性發病過程和第9天恢復過程中 PLCG2 "mRNA表達比較，可能無法完全反應在整個疾病發生發展過程中 PLCG2 "mRNA表達變化，后續可在急性發病期和恢復期各多選取幾個時間節點進行比較。

盡管UC確切病因尚不清楚，但已經證實腸道上皮屏障的破壞在UC發病過程中起關鍵作用^［17］ 。為了解PLCG2是否通過影響腸上皮細胞進而參與UC的發病，本研究再次用2.5% DSS飲用水飼養小鼠建造UC模型。在DSS誘導第3天時，小鼠體重變化不明顯、血便不明顯，因此繼續誘導，在第5天時，小鼠發病明顯，DAI評分明顯升高，因此在第5天處死急性發病期組小鼠獲得急性發病期結腸上皮細胞樣本；同樣在第9天處理恢復期組小鼠獲得恢復期腸上皮細胞標本；結果顯示， PLCG2 "mRNA相對表達量在急性發病期組和恢復期組腸上皮細胞中無明顯差異，進一步表明PLCG2可能是通過結腸固有層淋巴細胞而不是腸上皮細胞在急性UC的發生發展中發揮作用。

綜上所述， PLCG2 "mRNA在UC小鼠結腸固有層淋巴細胞中表達下調，其可能通過影響結腸固有層淋巴細胞功能等，在UC發生發展中發揮一定作用，具體何種作用還有待進一步研究。此外，本研究僅通過動物模型檢測小鼠結腸固有層淋巴細胞和腸上皮細胞中 PLCG2 "mRNA表達，未利用血細胞進行實驗，也未利用UC患者結腸樣本進行驗證，后續有待從蛋白和組織水平以及不同細胞水平探索PLCG2影響UC進程的具體機制。

［參考文獻］

［1］ Ungaro "R， Mehandru S， Allen PB， et al. Ulcerative colitis［J］. Lancet， 2017， 389（10080）： 1756-1770.

［2］ 商 夢晗， 張兆美， 焦建新. 潰瘍性結腸炎多組學生物標志物的研究進展［J］. 中國臨床研究， 2024， 37（3）： 455-459.

［3］ 陳 香， 許新微， 張朝陽， 等. 白藜蘆醇治療炎癥性腸病的研究進展［J］. 江蘇大學學報（醫學版）， 2019， 29（2）： 179-184.

［4］ Du "L， Ha C. Epidemiology and pathogenesis of ulcerative colitis［J］. Gastroenterol Clin North Am， 2020， 49（4）： 643-654.

［5］ Bae "YS， Lee HY， Jung YS， et al. Phospholipase Cγ in toll-like receptor-mediated inflammation and innate immunity［J］. Adv Biol Regul， 2017， 63： 92-97.

［6］ Szymanski "AM， Ombrello MJ. Using genes to triangulate the pathophysiology of granulomatous autoinflammatory disease： NOD2， PLCG2 and LACC1［J］. Int Immunol， 2018， 30（5）： 205-213.

［7］ Ombrello "MJ， Remmers EF， Sun G， et al. Cold urticaria， immunodeficiency， and autoimmunity related to PLCG2 deletions［J］. N Engl J Med， 2012， 366（4）： 330-338.

［8］ Jackson "JT， Mulazzani E， Nutt SL， et al. The role """""of PLCγ2 in immunological disorders， cancer， and neurodegeneration［J］. J Biol Chem， 2021， 297（2）： 100905.

［9］ Kutukculer "N， Topyildiz E， Berdeli A， et al. Four diseases， PLAID， APLAID， FCAS3 and CVID and one gene （PHOSPHOLIPASE C， GAMMA-2; "PLCG2 ）： striking clinical phenotypic overlap and difference［J］. Clin Case Rep， 2021， 9（4）： 2023-2031.

［10］ Zhou "Q， Lee GS， Brady J， et al. A hypermorphic missense mutation in PLCG2， encoding phospholipase Cγ2， causes a dominantly inherited autoinflammatory disease with immunodeficiency［J］. Am J Hum Genet， 2012， 91（4）： 713-720.

［11］ De "Lange KM， Moutsianas L， Lee JC， et al. Genome-wide association study implicates immune activation of multiple integrin genes in inflammatory bowel disease［J］. Nat Genet， 2017， 49（2）： 256-261.

［12］ 楊 惠芳. PLCG2基因P645L和N798S突變在兒童炎癥性腸病中的致病機制初探［D］. 汕頭： 汕頭大學， 2021.

［13］ 趙 珊， 王鵬程， 王秋紅， 等. 小鼠葡聚糖硫酸鈉急性潰瘍性結腸炎模型的建立和評價［J］. 遼寧中醫藥大學學報， 2016， 18（2）： 42-45.

［14］ Magno "L， Bunney TD， Mead E， et al. TREM2/PLCγ2signalling "in immune cells： function， structural insight， and potential therapeutic modulation［J］. Mol Neurodegener， 2021， 16（1）： 22.

［15］ Walliser "C， Tron K， Clauss K， et al. Rac-mediated stimulation of phospholipase Cγ2 amplifies B Cell receptor-induced calcium signaling［J］. J Biol Chem， 2015， 290（28）： 17056-17072.

［16］ 甄 建華， 黃光瑞. 潰瘍性結腸炎病因和發病機制的現代醫學研究進展［J］. 世界華人消化雜志， 2019， 27（4）： "245-251.

［17］ Yang "WJ， Han FH， Gu YP， et al. TGR5 agonist inhibits intestinal epithelial cell apoptosis via cAMP/PKA/c-FLIP/JNK signaling pathway and ameliorates dextran sulfate sodium-induced ulcerative colitis［J］. Acta Pharmacol Sin， 2023， 44（8）： 1649-1664.

［18］ Wu "N， Zhang B， Wang T， et al. Case report： A rare case of autoinflammatory phospholipase Cγ2 （PLCγ2）-associated antibody deficiency and immune dysregulation complicated with gangrenous pyoderma and literature review［J］. Front Immunol， 2021， 12： 667430.

［19］ Neves "JF， Doffinger R， Barcena-Morales G， et al. Novel "PLCG2 "mutation in a patient with APLAID and cutis laxa［J］ . Front Immunol， 2018， 9： 2863.

［收稿日期］ 2024-01-06" ［編輯］ 劉星星