肺癌患者腫瘤免疫細胞水平及其與臨床病理特征的關系

【摘要】" 目的" 探討肺癌患者腫瘤微環境中免疫細胞浸潤的特征及其與臨床病理特征（包括病理分期、病理類型、淋巴結轉移）的關系。方法" 回顧性選取2020年1月- 2023年12月在南通市腫瘤醫院確診的105例肺癌患者為研究對象。所有患者均接受手術切除，采用免疫組化方法檢測腫瘤組織中CD3+、CD8+、CD4+T淋巴細胞、Foxp3+及程序性死亡配體1（PD-L1）的表達水平。對比分析不同臨床病理特征（病理分期、病理類型、性別、年齡、腫瘤直徑、淋巴結轉移）下腫瘤組織中CD3+、CD8+、CD4+、Foxp3+及PD-L1的表達水平。結果" 與癌旁組織相比，肺癌組織中CD3+、CD8+、CD4+表達水平較高，差異有統計學意義（Plt;0.05）。而Foxp3+及D-L1表達在肺癌組織中顯著高于癌旁組織，差異有統計學意義（Plt;0.05）。患者的性別、年齡、腫瘤直徑與腫瘤組織中CD3+、CD8+、CD4+、Foxp3+及PD-L1表達水平無關（Pgt;0.05）。患者的病理類型、病理分期以及是否存在淋巴結轉移與腫瘤組織中CD3+、CD8+、CD4+、Foxp3+及PD-L1表達水平有關（Plt;0.05）。結論" 肺癌患者中腫瘤微環境中免疫細胞的CD3+、CD8+、CD4+、Foxp3+及PD-L1共同參與腫瘤的發生發展，與病理分期、病理類型與淋巴結轉移有關。

【關鍵詞】" 肺癌；腫瘤微環境；免疫細胞；變化；臨床意義

中圖分類號" R734.2" "文獻標識碼" A" " 文章編號" 1671-0223（2025）08--05

Changes in immune cells in the tumor microenvironment of lung cancer patients and their clinical significance" Yang Yang， Ni Xuejiao， Shi Lei， Ji Jinfeng.Department of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine， Nantong Tumor Hospital， Nantong 226006， China

【Abstract】" Objective To investigate the characteristics of immune cell infiltration in the tumor microenvironment of lung cancer patients and its relationship with clinicopathological features （including pathological stage， pathological type， and lymph node metastasis）. Methods" A retrospective study was conducted on 105 lung cancer patients diagnosed at Nantong Tumor Hospital from January 2020 to December 2023. All patients underwent surgical resection， and the expression levels of CD3+， CD8+， CD4+ T lymphocytes， Foxp3+， and programmed death-ligand 1 （PD-L1） in tumor tissues were detected using immunohistochemistry. The expression levels of CD3+， CD8+， CD4+， Foxp3+， and PD-L1 in tumor tissues were compared and analyzed under different clinicopathological features （pathological stage， pathological type， gender， age， tumor diameter， and lymph node metastasis）. Results" Compared with adjacent tissues， the expression levels of CD3+， CD8+， and CD4+were significantly higher in lung cancer tissues （Plt;0.05）. The expression levels of Foxp3+ and PD-L1 were also significantly higher in lung cancer tissues than in adjacent tissues （Plt;0.05）. Gender， age， and tumor diameter were not associated with the expression levels of CD3+， CD8+， CD4+， Foxp3+， and PD-L1 in tumor tissues （Pgt;0.05）. Pathological type， pathological stage， and the presence of lymph node metastasis were associated with the expression levels of CD3+， CD8+， CD4+， Foxp3+， and PD-L1 in tumor tissues （Plt;0.05）. Conclusion In lung cancer patients， CD3+， CD8+， CD4+， Foxp3+， and PD-L1 in the tumor microenvironment are jointly involved in the development and progression of tumors and are related to pathological stage， pathological type， and lymph node metastasis.

【Key words】" "Lung cancer; Tumor microenvironment; Immune cells; Changes; Clinical significance

肺癌作為當前臨床工作中一類較為常見的惡性腫瘤，是全球范圍內發病率最高的癌癥之一，其高發病率和高死亡率對公共健康構成了嚴重威脅。盡管近年來肺癌的診斷和治療技術取得了顯著進展，但其預后仍不容樂觀，這與腫瘤微環境（TME）的復雜性和異質性密切相關[1]。腫瘤微環境作為一個由腫瘤細胞、基質細胞、免疫細胞以及各種細胞因子和生長因子組成的復雜生態系統，不僅影響腫瘤的生長、侵襲和轉移，也深刻地影響著腫瘤的治療反應和患者的預后[2]。

近年來，越來越多的研究關注腫瘤微環境中免疫細胞的組成和功能，并將其作為新的治療靶點和預后預測指標[3]。已有研究表明，肺癌組織中免疫細胞浸潤的模式與患者的臨床病理特征和預后密切相關[4]。因此，深入研究肺癌組織中CD3+、CD8+和CD4+T細胞的浸潤情況，以及Foxp3+及程序性死亡配體1（PD-L1）的表達水平，對于理解腫瘤免疫逃逸機制以及預測患者預后至關重要。本研究對肺癌患者腫瘤微環境中免疫細胞浸潤的特征及其與臨床病理特征的關系進行了評估。

1" 對象與方法

1.1" 研究對象

回顧性選取2020年1月- 2023年12月在南通市腫瘤醫院確診的105例肺癌患者為研究對象。納入標準：經病理學檢查確診為肺癌[5]；具有完整的臨床病理資料；接受了根治性手術切除，并獲得足夠的腫瘤組織樣本用于免疫組化檢測；術后隨訪資料完整。排除標準：術前接受過新輔助治療，如放療或化療；腫瘤組織樣本質量差，無法進行免疫組化檢測的患者；臨床病理資料不完整，無法進行統計分析；患有其他嚴重合并癥，可能影響研究結果；無法獲得完整隨訪資料。本研究通過醫院倫理委員會批準。

1.2" 資料收集

包括一般資料（年齡、性別），詳細病理資料（病理類型、病理分期、淋巴結轉移情況、腫瘤大小等）。

1.3" 檢測方法

采用免疫組化方法檢測患者術后腫瘤組織中CD3+、CD8+、CD4+T淋巴細胞、Foxp3+及PD-L1的表達水平。對比該組患者的不同臨床病理特征（病理分期、病理類型、性別、年齡、腫瘤直徑、淋巴結轉移）下腫瘤組織中CD3+、CD8+、CD4+，Foxp3+及PD-L1的表達水平。免疫組化檢測具體操作流程：①樣本處理。腫瘤組織及癌旁樣本組織經4%多聚甲醛固定，石蠟包埋，切成4μm厚的切片[6]。②抗體。采用兔抗人CD3、CD8、CD4、PD-L1、Foxp3+抗體。③染色方法。采用免疫組化鏈霉素-生物素-過氧化物酶法（SP法）進行染色。④結果判定。采用H-score評分法進行半定量分析。

1.4" 數據處理

所有數據均使用SPSS 26.0軟件進行統計學分析。計量資料以“均數±標準差”（±s）表示，采用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗對比分析組間構成比差異。Plt;0.05為差異有統計學意義。

2" 結果

2.1" 腫瘤組織及癌旁組織中CD3+、CD8+、CD4+T淋巴細胞的表達水平對比

與癌旁組織相比，肺癌組織中CD3+、CD8+、CD4+表達水平較高，差異有統計學意義（Plt;0.05），見表1。

2.2" 腫瘤組織及癌旁組織中Foxp3+及PD-L1的表達水平對比

Foxp3+及D-L1表達在肺癌組織中顯著高于癌旁組織，差異有統計學意義（Plt;0.05），見表2。

2.3" 腫瘤組織中CD3+、CD8+、CD4+表達水平與臨床病理特征的關系

患者的性別、年齡、腫瘤直徑與腫瘤組織中CD3+、CD8+、CD4+表達水平無關聯（Pgt;0.05）；而病理類型、病理分期以及是否存在淋巴結轉移對腫瘤組織中CD3+、CD8+、CD4+表達水平有影響（Plt;0.05）。見表3。

2.4" 患者的不同臨床病理特征下腫瘤組織中Foxp3+及PD-L1的表達水平對比

對不同性別、年齡、腫瘤直徑下的腫瘤組織中Foxp3+及PD-L1表達水平比較，差異無統計學意義（Pgt;0.05）；對不同病理類型、病理分期以及是否存在淋巴結轉移下腫瘤組織中Foxp3+及PD-L1表達水平比較，差異有統計學意義（Plt;0.05）。見表4。

3" 討論

肺癌作為全球范圍內發病率和死亡率最高的惡性腫瘤之一，其巨大的公共衛生負擔不容忽視。調查資料顯示，肺癌的發生發展是一個復雜的過程，涉及遺傳因素、環境因素和免疫因素等多方面的影響[7]。研究表明，腫瘤微環境是一個復雜的生態系統，包含腫瘤細胞、免疫細胞、血管內皮細胞、成纖維細胞等多種細胞類型，以及細胞外基質等非細胞成分[8]。一方面，免疫系統可以識別并清除腫瘤細胞，發揮抗腫瘤作用；另一方面，腫瘤細胞可以通過多種機制抑制免疫反應，逃避免疫監視和殺傷，從而促進腫瘤生長和轉移[9-10]。因此，研究腫瘤微環境中免疫細胞的組成、功能及其與腫瘤細胞的相互作用，有助于理解腫瘤免疫逃逸機制，尋找新的治療靶點，并開發更有效的免疫療法[11-12]。

CD3被認為是所有T淋巴細胞共有的表面標志物，CD3+表達水平反映了腫瘤組織中總T細胞的浸潤程度。CD8+T細胞是細胞毒性T淋巴細胞（CTL），其主要功能是直接殺傷腫瘤細胞。而CD4+T細胞是輔助性T淋巴細胞，其主要功能是輔助其他免疫細胞發揮作用，包括激活CTL和促進B細胞產生抗體[13]。研究結果顯示，與癌旁組織相比，肺癌組織中CD3+、CD8+、CD4+的表達水平顯著升高，這表明肺癌組織中存在明顯的T細胞浸潤，提示機體免疫系統試圖清除腫瘤細胞。同時，癌旁組織中的免疫細胞表達是正常的免疫反應，機體會在腫瘤周圍聚集免疫細胞以對抗腫瘤。Foxp3是調節性T細胞（Tregs）的特異性轉錄因子，Tregs具有免疫抑制作用，可以抑制其他免疫細胞的活性，包括CD8+T細胞和CD4+T細胞，從而抑制抗腫瘤免疫反應[14]。Tregs的浸潤與腫瘤的生長、轉移和預后不良密切相關。PD-L1可以與T細胞表面的PD-1結合，抑制T細胞的活化和增殖，從而幫助腫瘤細胞逃避免疫監視和殺傷[15]。結果顯示，在不同病理類型、病理分期以及是否存在淋巴結轉移的情況下，腫瘤組織中Foxp3+及PD-L1的表達水平比較，差異有統計學意義。分析結果表明，腺癌和鱗癌可能誘發不同的免疫反應，導致Treg細胞（Foxp3+）的募集和活性以及PD-L1表達水平存在差異，從而影響腫瘤的免疫逃逸能力。腫瘤微環境，包括細胞外基質的組成、炎癥細胞的存在以及各種細胞因子和生長因子的表達，在腺癌和鱗癌中可能存在差異，進而影響免疫細胞的浸潤和功能。同時，Ⅲ/Ⅳ期癌癥中Foxp3+和PD-L1表達更高，提示疾病進展與免疫逃逸機制之間存在關聯。隨著腫瘤進展，腫瘤可能更擅長抑制抗腫瘤免疫。此外，有淋巴結轉移的患者中Foxp3+和PD-L1表達更高，提示這些免疫檢查點在促進轉移中發揮作用，這與免疫抑制促進腫瘤擴散的既定作用相符。

綜上所述，肺癌患者腫瘤微環境中的免疫細胞標志物（包括CD3+、CD8+、CD4+、Foxp3+及PD-L1）共同參與了腫瘤的發生發展，并與病理分期、病理類型及淋巴結轉移密切相關。未來的研究可以進一步探索不同免疫細胞亞群在肺癌發生發展中的具體作用機制，并基于這些信息開發個體化治療策略。

4" 參考文獻

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[2024-11-26收稿]