窄葉藍盆花野生品與栽培品的質量比較研究

【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】A 【文章編號】1007-8517（2025）10-0063-06

DOI： 10.3969/j .issn.1007-8517.2025.10. zgmzmjyyzz202510012

ComparativeStudyontheQualityofWildandCultivated ScabiosacomosaFisch.exRoem.etSchult

BAI Sanalatu1.2 HONG Yan1.2*XIN Ying1，2YANG Lingzhen1，2Tonglaga1.2 1.Inner Mongolia Minzu University，Tongliao O28OOo，China； 2.Mongolian Medicine National Local Joint Enginering Research Center Inner Mongolia，Tongliao O280oo，China

Abstract：Objective HPLC fingerprintand multi-componentcontent determinationmethodwereestablished tocompare the qualitydiferecebetweewildndultivatedproductsnddiferentfertilizationtreamntofnarrolafbluepotedflowdfer entharvesting periods，andtoprovidebasisforfurtherdevelopmentandutilizationofScabiosacomosa Fisch.exRoem.etSchlt. Method HPLCwasusedtoestablishfingerprintsof15batchesofScabiosacomosaandanalyzeteirsimilrity.Thecontentsof4componentsweredeterminedandtheirqualitydiferenceswerecompared.ResultAotalof12commonpeakswereidentifiedin15batches ofScabiosacomosa.Luteolin，isochlorogenicacidA，isochlorogenicacidCandapigeninwereidentifiedbycomparisonwiththecontrolproductseiiygetsgdfro6t998oetsoflisloccidA acid C and apigenin in 15 batches were 0.0512-0.1172mg/g ，0.1821-0.6986 mg/g， 0.0495-0.1140mg/g ，0.024 1 - 0.1697mg/g ，respectively.Thecontentof luteolininwild products was higherthan thatincultivated products，whilethecontentof theotherthreecompoentsincultivatedproductswas hgherthanthatinwildproducts.Ligantus，compoundferilizerandbiological fetilizerouldincreasethecontentofluteolininSabiosacomosaFisch.exRoemetSchult.andstressresistancecoulddecreasethe contentofluteolinThereasnosignificantefectonisochlorogenicacidAcontent；Thereasadecreasingtendencyforisocloogn icacidC.Biologicalfrtilizercanobviouslyincreasetheapigenincontent.ConclusionBycomparingthequalitydiferencebetween wildandcultivatedproductsanddiferentertilizationtreatment，tequalitycontrolofSabioscomosaFisch.exRom.etSultas provided，and the ideas for expanding the drug source were provided.

Keywords：Scabiosacomosa Fisch.ex Roem.etSchult.；Fingerprint；Content Determination；QualityDiference

窄葉藍盆花（Scabiosa comosa Fisch.ex Ro-em.etSchult.）為川續斷科（Dipsacaceae）藍盆花屬（Scabiosa）植物，又名細葉山蘿卜，主要分布于內蒙古、黑龍江、吉林、遼寧等地區1，是我國內蒙古地區民族特色藥，收載于《中華人民共和國衛生部藥品標準·蒙藥分冊》2。以干燥花序入藥，蒙藥名為套森－套日麻，具有清熱、清“協日”之功效，用于肺熱、肝熱、咽喉熱等疾病[3]，是蒙醫治療肝膽疾病的特色藥物，也是德都紅花-7味散、額力根-7等蒙醫經典藥方中的主要成分[4]。據文獻[5]報道，窄葉藍盆花主要含有黃酮類、酚酸類、萜類、香豆素類等多種成分，其中黃酮類和酚酸類化合物是窄葉藍盆花含有的主要活性成分。現代藥理研究發現窄葉藍盆花具有解熱抗炎[6-7]、抗氧化[8-12]、抗肝損傷[13-14]以及抗癌[15等藥理作用，與所含的木犀草苷、異綠原酸A、異綠原酸C、芹菜素等的藥理活性密切相關[16-18]。近年來，隨著醫療需求的增加與氣候環境的惡化以及野生資源的大肆開發與過度采挖，野生資源面臨資源枯竭的狀態，又因花序人藥，采集者通常在開花期采摘，引起種群個體數量迅速下降，藥材資源貧乏。張欣華等[9研究發現采自內蒙古呼倫貝爾市的藍盆花藥材木犀草素含量最高，其次是內蒙古興安盟。王樹梅等[2通過測定不同采收期窄葉藍盆花木犀草素含量發現，野生馴化的窄葉藍盆花于8月上旬至9月初采摘時其含量達到最高，與傳統的秋季采收時間基本相符。鋅凌娟等[21]通過不同施肥處理發現，施肥處理的覆盆子鞣花酸含量總體比不施肥的高，其中 200g 硫酸鉀復合肥的鞣花酸含量最高。可見，藥材質量差異與產地、采收、栽培方式等密切相關。目前，關于窄葉藍盆花栽培品與野生品、不同采收期以及不同施肥處理的有效成分有無差異，尚未有全面的研究報道。鑒于黃酮類、酚酸類均為窄葉藍盆花發揮藥效的基礎物質，本研究通過HPLC分析并建立其指紋圖譜，測定窄葉藍盆花所含木犀草苷、異綠原酸A、異綠原酸C、芹菜素4種成分的含量，對不同花期的野生品與栽培品、不同施肥處理的窄葉藍盆花進行比較，以期為窄葉藍盆花栽培品的質量控制奠定基礎，同時為窄葉藍盆花質量評價與藥用資源可持續開發提供參考。

1儀器與材料

1.1儀器Agilent1260 Infinity高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；HA125SM型電子天平（普利賽斯稱重設備有限公司，十萬分之一）；ME204/02型電子天平［梅特勒－托利多儀器（上海）有限公司，萬分之一]；KQ-600B型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；DFY-200C型搖擺式高速粉碎機（溫嶺市林大機械有限公司）。

1.2試藥對照品木犀草苷（批號：A22GB141264，純度 98% ）、異綠原酸A（批號：P11D11L134209，純度 98% ）、異綠原酸C（批號：M11GB140940，純度 98% ）、芹菜素（批號：M29GB150104，純度98% ）均購自上海源葉生物科技有限公司。甲醇（批號：20220401）、乙腈（批號：20220504）均為色譜純（天津市大茂化學試劑廠），磷酸（批號：20210802）為分析純（天津市大茂化學試劑廠），水為娃哈哈純凈水（杭州娃哈哈集團有限公司）。

供試肥料：利根生（有機質含量 ≥40% ，黑龍江農墾三龍生物科技有限公司生產）；抗逆態（黑龍江農墾三龍生物科技有限公司生產）；復合肥（總養分：氮17磷17鉀 17?51% ，天津市中填盛華農業科技有限公司）；生物肥（有機質 ? 45% ， N+P₂O₅+K₂O?5% 。

1.3藥材藥材樣品來自產地采集，共15批次窄葉藍盆花樣品，經內蒙古民族大學蒙醫藥學院紅艷副教授鑒定均為窄葉藍盆花（ScabiosacomosaFisch.exRoem.etSchult.）的干燥花序，樣品來源信息見表1。

2方法與結果

2.1 色譜條件采用Agilent Eclipse plus C₁₈ 色譜柱（ 250mm×4.6mm ， 5μm ）；以乙腈為流動相A，以 0.2% 磷酸溶液為流動相B，梯度洗脫（0～5min ， 5%A?15%A ； 5～25min ， 15%AA18% A； 25～35min ， 18%A20% A； 35～55min ，20%AA-80%A ），流速 1.0mL?min^-1 ，指紋圖譜檢測波長 350nm ，含量測定檢測波長 326nm ；柱溫 30% ，進樣量 10μL 。

2.2混合對照品溶液制備取木犀草苷、異綠原酸A、異綠原酸C、芹菜素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每 1mL 含木犀草苷 56μg 、異綠原酸A 50μg 、異綠原酸 C35μg 、芹菜素 30μg 的混合溶液，即得。

2.3供試品溶液制備取樣品粉末（過3號篩）約 0.5g ，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇 25mL ，稱量，浸泡 ¹h ，超聲處理（功率6 0 0W "，頻率 40kHz ） 40min ，放冷，再稱量，用甲醇補足減失的量，搖勻，取上清液用微孔濾膜（0.45μm） ）濾過，取續濾液，即得。

2.4指紋圖譜方法學考察

2.4.1精密度實驗取窄葉藍盆花樣品（S1）適量，按照“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下的色譜條件連續進樣6次，記錄色譜圖。以木犀草苷為參照峰，各特征共有峰相對保留時間RSD均小于 1% ，相對峰面積RSD均小于1% ，表明所用儀器精密度良好，符合指紋圖譜技術要求。

2.4.2重復性實驗 取窄葉藍盆花樣品（S1）適量，按照“2.3”項下方法制備供試品溶液6份，按“2.1”項下的色譜條件依次進樣，各特征共有峰相對保留時間RSD均小于 1% ，相對峰面積RSD均小于 2% ，表明本方法重復性良好，符合指紋圖譜技術要求。

2.4.3穩定性實驗取窄葉藍盆花樣品（S1）適量，按照“2.3”項下方法制備供試品溶液，分別在 0h 、2h、 ^4h ！ 6h ！ 、 ^12h ！ 24h 按“2.1\"項下的色譜條件進行分析，以木犀草苷為參照峰。結果表明，各特征共有峰相對保留時間的RSD均小于 1% ，相對峰面積RSD均小于 3% ，表明供試品溶液在 24h 內穩定性良好。

2.5指紋圖譜的建立及相似度評價

2.5.1指紋圖譜共有峰的指認與歸屬取15 批窄葉藍盆花樣品，分別按“2.3”項下方法配制供試品溶液，按“2.1”項下的條件進行測定，獲得各批次樣品的指紋圖譜。利用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統（2012版）》進行分析，以S1為參照圖譜，采用中位數法，通過多點校正和Mark峰匹配，生成15批樣品指紋圖譜及共有模式圖譜（R），如圖1。結果共標定了12個共有峰，4號色譜峰有較好的峰形，穩定性較好，故以4號峰為參照峰，并與4個對照品的圖譜及保留時間對比，指認了4個共有峰，分別為峰4木犀草苷、峰7異綠原酸A、峰10異綠原酸C、峰12芹菜素，如圖2所示。

2.5.2相似度評價以對照譜圖為參考，對15批窄葉藍盆花樣品的指紋圖譜進行相似度評價，結果表明，其相似度介于 0.963～0.998 ，見表2。表明不同花期野生品與栽培、不同施肥處理方式的窄葉藍盆花樣品中化學成分組成基本一致。

2.5.3聚類分析結果以15 批窄葉藍盆花樣品的12個共有峰峰面積為變量，通過SPSS27.0軟件，運用組間對比法進行系統聚類分析（CA），以平方歐氏距離為標尺計算樣品的相似程度，連接方法為組間連接，15批藥材的聚類分析樹狀圖如圖3所示。可看出，不同采收期的野生品與栽培以及不同施肥處理的窄葉藍盆花可以被較好地分開。當距離為5時，樣品可被劃分為7類：第I類為S5、S6；第Ⅱ類為S4；第ⅢI類為S1、S2；第Ⅳ類為S3、S15；第V類為S7、 、S12；第V類為S10、S11、S13、S14；第VI類為S8。當距離為10時，樣品可被劃分為4類：第I類為 S4～S6 ；第Ⅱ類為S1＼～S3、S15；第Ⅲ類為S7、 、S12；第V類為S8、S10、S11、S13、S14；當距離為20時，樣品可被劃分為2類：第I類為 S4～S6 ；第Ⅱ類為S1＼～S3、 S7～S15 。

2.6 多成分含量測定

2.6.1 標準曲線的繪制 精密吸取“2.2”項下混合對照品溶液 ？μL，4μL，6μL，8μL，10 μL 、 12μL 分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積 Y 對進樣量 X （ μg ）進行回歸分析。木犀草苷： Y=119.65X-0.5667 （ r=0.9997 ）；異綠原酸A： Y=475.65X+48.6 （ r=0.999 ；異綠原酸C： Y=107.99X+0.4533 （ r=0.9997 ）；芹菜素： Y=127.65X-0.7133 （ r=0.9998 ）。結果表明木犀草苷、異綠原酸A、異綠原酸C、芹菜素進樣量分別在 0.11～0.67μg ， 0.28～1.68μg ，0.07～0.42μg ， 0.06～0.36μg 范圍內與峰面積呈良好的線性關系。

2.6.2精密度試驗取窄葉藍盆花（S1）樣品適量，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件連續進樣6次，計算樣品中木犀草苷、異綠原酸A、異綠原酸C、芹菜素峰面積的RSD分別為 0.54% 、 0.54% 、 0.56% ！1.12% ，表明儀器精密度良好。

2.6.3重復性試驗取窄葉藍盆花（S1）樣品適量，稱取6份，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下的色譜條件進行測定，計算樣品中木犀草苷、異綠原酸A、異綠原酸C、芹菜素含量RSD分別為 0.7% 、 0.81% 、 0.53% 、 1.26% ，表明方法重復性良好。

2.6.4穩定性試驗取窄葉藍盆花（S1）樣品適量，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，分別于制備后 0h.2h.4h.6h.12h.24 按“2.1\"項下色譜條件進行測定，計算樣品中木犀草苷、異綠原酸A、異綠原酸C、芹菜素峰面積的RSD分別為 0.47% 、 0.61% 、 0.75% 、 0.85% ，表明供試品溶液在 24h 內的穩定性良好。

2.6.5加樣回收試驗取窄葉藍盆花（S1）樣品約 0.25g ，精密稱定，共6份，按1：1的比例分別精密加人混合對照品溶液 1mL （木犀草苷、異綠原酸A、異綠原酸C、芹菜素的質量濃度分別為0.05mg/mL 、 0.265mg/mL 、 0.05mg/mL 、0.055mg/mL ），按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件進行測定，計算上述成分的平均加樣回收率分別為 100% 、 98.9% 、 99.93% /96.82% ，RSD分別為 0.75% 、 0.53% 、 2.09% ！0.97% ，表明建立的含量測定方法準確性良好。

2.6.6樣品含量測定稱取不同批次的窄葉藍盆花樣品各3份，精密稱定，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件進行測定，記錄峰面積，按“2.6.1”項下線性回歸方程計算鹽窄葉藍盆花中4個成分的含量。見表3。

2.7不同采收期的野生品與栽培品差異比較通過對窄葉藍盆花4個成分進行含量測定發現，不同采收期的野生品與栽培品窄葉藍盆花（S1～S9）在成分含量上有一定的區別，從表3可以看出窄葉藍盆花木犀草苷含量最高的樣品為S1，其次為S2、S9；異綠原酸A含量最高的樣品為S9，其次為S7、S2；異綠原酸C含量最高的樣品為S7，其次為S8、S2；芹菜素含量最高的樣品為S5，其次為S4、S6。

2.8不同施肥處理差異比較從不同施肥處理的窄葉藍盆花4個成分含量測定結果（表3）可以發現，窄葉藍盆花木犀草苷含量最高的樣品為S10，其次為S12、S13；異綠原酸A含量最高的樣品為S14，其次是S10、S12；異綠原酸C含量最高的樣品為S14，其次為S10、S13；芹菜素含量最高的樣品為S15，其次為S13、S10。

3討論

3.1指紋圖譜中藥指紋圖譜從中藥整體化學物質基礎角度出發，是評價中藥優劣、鑒別真偽、區分藥材產地和確保其一致性、穩定性的有效方法，能夠全面、整體地反映出中藥材的化學物質的種類和數量，被越來越多的研究者應用于質量差異分析及有效成分的研究[23-24]。本研究建立了15 批窄葉藍盆花藥材的HPLC指紋圖譜，共標定了12個共有峰，通過與混合對照品色譜圖進行比對，共指認了4個指標成分，分別為木犀草苷（峰4）、異綠原酸A（峰7）、異綠原酸C（峰10）、芹菜素（峰12），指紋圖譜相似度軟件分析發現15批樣品相似度均在0.90及以上，說明樣品之間的相似性較高，指紋圖譜相似度未能對15批樣品進行區分，因此，后續通過聚類分析能較好地區分15批窄葉藍盆花樣品，可能是由于不同產地、環境、采收及不同處理等因素導致部分化學成分的含量具有一定的差異。

3.2多成分含量測定通過比較不同采收期的野生品與栽培品窄葉藍盆花發現，其中木犀草苷含量野生品較高于栽培品，而其余的3個成分含量栽培品較高于野生品，對兩個地區的栽培品進行比較發現，內蒙古通遼地區窄葉藍盆花栽培品的異綠原酸A和異綠原酸C含量均高于內蒙古呼和浩特地區的栽培品，芹菜素含量則是呼和浩特地區較高于通遼地區，這可能與藥材基原、地域分布、種植技術及區域的土壤、日照等生長環境有密切相關。不同采收期的窄葉藍盆花在成分含量上有一定的區別，但未呈現一定的規律性，且本文只對呼倫貝爾市、呼和浩特市、通遼市3個產區進行分析，不能代表所有野生品與栽培品的質量，故后續需進一步研究。

肥料是保障植物生長發育、產量、品質的重要因素，在藥用植物生長過程中參與化合物的合成與代謝，影響次生代謝產物的形成與積累，進而影響到藥材有效成分的含量[25]。本研究通過比較不同施肥處理發現，利根生、復合肥、生物肥會提高窄葉藍盆花中木犀草苷含量，抗逆態會降低木犀草苷含量；對異綠原酸A含量沒有明顯效果；對異綠原酸C有降低趨勢；生物肥對芹菜素含量有明顯提高作用。

目前，如何培育且栽培品質優良、均一穩定的藥材是最為重要的一個難題。本研究從化學角度分析不同采收期野生品和栽培品、不同施肥處理窄葉藍盆花的差異，以期為窄葉藍盆花的規范化栽培及品質評價標準提供參考。

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