獼猴桃潰瘍病菌抗藥性的研究進展

Research progress on drug resistance of Pseudomonas syringae pv. actinidiae

ZHANG Yao，ZUO Bo，WANGFengqi，LIU Xin，FANGaomin，ZHUANGQiguo （Sichuan Provincial AcademyofNatural Resource Sciencesl Kiwifruit Breedingand Utilization Key Laboratory ofSichuanProvincelChina-NewZealandBeltandRoadJointLaboratoryonKiwifruit，Chengdu，Sichuan 610015，China）

Abstract： The latest progress in resistance research of Pseudomonas syringae pv. actinidiae in recent years were summarized，including drug resistance performance，resistance monitoring， resistance mechanisms，and prevention and control strategies，aiming to provide reference for the scientific prevention and control ofkiwifruit bacterial cankerdisease.

Key words： kiwifruit; Pseudomonas syringae pv.actinidiae; drugresistance; comprehensive prevention and control; breeding of disease resistant varieties; efficient fungicide

弼猴桃潰瘍病是由細菌引起的嚴重病害，對弼猴桃產業構成重大威脅[1]。近年來，隨著化學殺菌劑的廣泛使用，弼猴桃潰瘍病菌（Pseudomonassyringaepv.actinidiae，簡稱Psa）的抗藥性問題日益突出，成為制約病害防控的瓶頸。通過綜合分析現有文獻，分析抗藥性監測、抗藥性機制及新型殺菌劑開發等方面的研究成果，對近年來弼猴桃潰瘍病菌抗藥性研究的最新進展進行綜述，以期為未來的研究和病害防控策略提供參考。

1弼猴桃潰瘍病菌的抗藥性表現

弼猴桃潰瘍病菌的抗藥性表現主要是指病菌在受到藥劑作用時，能夠存活并繼續繁殖，使得這些藥劑在防治潰瘍病時的效果降低或失效。首先，藥劑的種類會影響弼猴桃潰瘍病菌的抗性。陽廷密等提出不同藥劑對弼猴桃潰瘍病菌的抑制效果存在顯著差異，一些藥劑的防效較低，可能是因為病菌對其產生了抗性[2]。其次，藥劑的濃度變化也會影響其對弼猴桃潰瘍病菌的抑制效果。何紫梅探究不同濃度的 2% 春雷霉素對弼猴桃潰瘍病菌的影響，發現隨著春雷霉素濃度的增加，其對Psa的抑制效果增強，進一步代謝組學分析揭示了春雷霉素是通過影響Psa細胞內物質和能量代謝，抑制其呼吸作用，最終導致病菌死亡[3]。

2弼猴桃潰瘍病菌的抗藥性監測

2.1抗藥性的監測方法與技術

獼猴桃潰瘍病菌抗藥性的有效監測依賴于先進的技術手段。為精準追蹤病害抗藥性變化，研究者們開發了高效的環介導等溫擴增（LAMP）檢測技術，實現了病害的快速診斷與田間應用的精準防控。Ruinelli等通過比較基因組學方法，利用公開的Psa基因組數據，選定了獨特的靶標區域，開發出兩種LAMP檢測技術[4]，這兩種LAMP檢測技術均表現出高度特異性，能用于檢測Psa，并成功區分屬于Psa生物型3的菌株。強遙利用LAMP技術對23個弼猴桃品種進行抗病性鑒定，篩選出抗病性最強的毛花1號和最感病的云海1號，采用RNA-seq技術進行轉錄組測序，揭示了抗病品種中顯著上調的與抗病相關的基因，如MAPK級聯反應、類黃酮生物合成等，從基因表達層面分析了抗感病原因[5]。王一波等優化LAMP反應的檢測體系，實現了弼猴桃Psa病原菌的快速可視化檢測，檢測靈敏度達到100CFU/mL[6，并對田間樣品進行了測試，發現該方法應用效果好，為田間應用提供了技術支持。

2.2 抗藥性的監測結果與分析

近年來，針對弼猴桃潰瘍病菌的抗藥性監測結果與分析顯示，不同地區弼猴桃病害菌株對常用殺菌劑的抗藥性存在顯著差異，揭示了病菌抗藥性的地域性特征。

李春游等在陜西關中地區對弼猴桃潰瘍病菌進行鏈霉素抗藥性監測，發現部分菌株已產生抗藥性，提示鏈霉素在該地區使用的局限性[7]。Yang等針對安徽省弼猴桃潰瘍病菌進行鏈霉素敏感性基線調查，共收集了102個田間分離株，發現所有菌株均對鏈霉素敏感，為安徽省弼猴桃潰瘍病菌對鏈霉素的敏感性監測提供了重要基線參考[8]。韓寧等發現陜西關中地區的弼猴桃細菌性潰瘍病菌株對 CuSO₄ 表現出不同程度的抗性，且這種抗性在不同地區來源的菌株之間存在顯著差異[9]。裴艷剛等檢測了四川地區弼猴桃灰霉病菌對四種常見殺菌劑（嘧霉胺、咯菌腈、腐霉利和異菌脲）的抗藥性情況，發現灰霉病菌對嘧霉胺、咯菌腈和腐霉利的抗藥性頻率較高，對異菌脲的抗藥性相對較低[10]。劉小平等調查了江山市弼猴桃葉斑類病害，發現氟吡菌酰胺·菌酯對弼猴桃葉斑病防治效果最佳，不同濃度處理均表現出高防效[1]。裴艷剛和劉小平等的研究雖非直接針對潰瘍病菌，但能為潰瘍病菌監測中合理選擇殺菌劑、評估抗藥性風險提供理論依據，有助于制定更科學有效的潰瘍病菌監測方案。

3弼猴桃潰瘍病菌的抗藥性機制

弼猴桃潰瘍病菌的抗藥性機制復雜多樣，涵蓋基因表達調控、細胞膜破壞響應及多藥抗性形成等多個層面，涉及基因水平的變化及病菌對環境脅迫的適應策略。

韓寧等通過實時熒光定量PCR分析，發現不同濃度 CuSO₄ 誘導下，菌株的抗銅基因copA和copB表達水平與 CuSO₄ 濃度呈正相關，且菌株的抗性水平越高，這兩個基因的相對表達水平也越高[9]。何紫梅等通過測定噻霉酮處理后的Psa一系列指標變化，發現噻霉酮能破壞病菌細胞膜，引發氧化應激反應，并抑制病菌DNA合成，從而有效抑制Psa的生長和繁殖[12]。楊睿等對弼猴桃潰瘍病菌L211菌株開展全基因組測序，發現其攜帶多種毒力因子、植物互作因子和耐藥基因，這表明潰瘍病菌的抗藥性機制可能源于這些基因之間的協同作用[13]。宋佳露等深入分析植物病原菌對殺菌劑多藥抗性的現狀，詳細探討了病原菌多藥抗性的形成機制，包括外排泵過表達、解毒酶作用增強及靶標基因突變等，并強調了殺菌劑抗性治理策略的重要性[14]。

4弼猴桃潰瘍病菌抗藥性的防控策略

4.1抗病弼猴桃品種的選育

抗病品種的選育是基于深入的抗性機理研究和科學的抗性評價體系，篩選出遺傳抗性穩定、不易受環境影響的優質品種。選育推廣抗病弼猴桃品種，可以有效降低對化學農藥的依賴，減少病原菌因頻繁接觸農藥而產生抗藥性的風險[15]。

王發明等提出通過抗性材料的選育、抗性鑒定和評價技術的改進以及抗性機理的深入研究等多方面措施來加快抗性育種進程，強調建立一個科學、系統的潰瘍病抗性評價體系，以實現對弼猴桃種質資源進行大規模的抗性普查和評估[16。Qin等通過人工接種莖段的方法，對54份軟棗弼猴桃種質資源進行Pseudomonassyringaepv.actinidiaeR12抗病性鑒定，發現Jianfengkuilv和TL20013兩個高抗材料，占比3.70% ，而感病和高感材料占比超過 48%[17] 。這一研究為軟棗弼猴桃Psa抗性基因定位、抗性機制及抗病品種選育等后續研究奠定了基礎。Flay等通過改良的群體分離分析（BSA）方法，在不完全析因交叉種群中成功識別了11個與弼猴桃潰瘍病菌抗性相關的數量性狀位點（QTL），這些抗性QTL的鑒定為未來獼猴桃育種中通過標記輔助選擇培育Psa抗性品種提供了可能[18]。Zhao等通過篩選44個中華弼猴桃雜交品系，發現了兩個對Psa具有明顯抗性的品系RH12和SH14。通過比較轉錄組分析，發現與黃酮類合成、病原體互作和激素信號傳導途徑相關的高差異表達基因（DEGs）在抗病中起關鍵作用。進一步利用加權基因共表達網絡分析，確定了六個核心轉錄因子，并發現AcC3H1和AcREM14在抗病雜交品系中高表達，為弼猴桃抗病品種的選育提供了分子機制依據[19]。

4.2 高效殺菌劑的研發、篩選

面對弼猴桃潰瘍病菌等植物病原菌的威脅及抗藥性問題，高效、低毒、環境友好的新型殺菌劑的研發與篩選顯得尤為重要。研究人員通過化學合成、生物活性測試及作用機制探索，不斷發掘具有優異殺菌性能和田間防效的新型化合物。

陳佳通過篩選與復配開發了基于四霉素與戊唑醇協同增效的新型殺菌劑，該殺菌劑不僅具備優異的成膜性能，還展現出強大的生物活性和田間防效，尤其在預防弼猴桃潰瘍病菌侵染方面表現出色[20]。張嬌嬌設計的含異丙醇胺亞結構的新型二芳基醚衍生物展現出了良好的抗菌活性，特別是在針對弼猴桃潰瘍病菌的防治方面[21]。楚攀龍設計并合成了苯并噻唑衍生物，發現其中D3對弼猴桃潰瘍病菌等植物病原菌具有顯著抗菌活性，進一步研究發現D3通過抑制病原菌的毒力因子和群體感應（QS）相關基因表達來發揮抗菌作用。活體盆栽試驗也證實了D3對弼猴桃潰瘍病菌的防治效果，并發現添加有機硅或橙皮精油能增強其防效[22]。Zhao等設計并合成了一系列含有異丙醇胺結構的咔唑衍生物，發現其對弼猴桃潰瘍病菌等植物病原細菌具有顯著抑制效果[23]。Ding等設計并合成了新型含3－（哌嗪-1-基）丙-2-醇咔唑衍生物，這些分子通過不可逆破壞細菌細胞膜，導致細胞質成分泄漏，從而抑制細菌功能，體外實驗顯示這些衍生物對弼猴桃潰瘍病菌具有顯著抗菌活性[24]。Liu等通過轉錄組分析，研究了乙基大蒜素對弼猴桃潰瘍病菌的抑制機制，發現乙基大蒜素能夠干擾病原菌的細胞膜功能，進而抑制其生長，并且對弼猴桃植株無顯著不良影響[25]。王蕾探討了弼猴桃多肽的制備及其抗菌活性，弼猴桃多肽對細菌具有顯著的抗菌效果，且分子量小于 5000Da 的多肽抗菌活性最強[26。這一發現不僅提高了弼猴桃的實際應用價值，也為開發基于天然物質的新型抗菌劑提供了新的思路和方法。

4.3綜合防控技術的優化

綜合防控技術的優化也是提高防控效果的重要手段。鐘彩虹、方毅和張立等共同強調了綜合防治的重要性，提出了從種苗、建園、施肥到農藥防治的全面綜合防治策略[27-29]。包括通過檢疫選苗、建園技術改善生長環境、合理施肥控制結果量來增強樹體抵抗力，并詳細列舉了多種防治時期和施藥方法，以提高防治效果。同時，也倡導了預防為主、生物防治等綠色防控手段，以減少病害發生，提升經濟效益[30]。這些技術的綜合應用能夠有效降低病原菌的抗藥性風險，提高防控效果。

5結論與展望

當前，弼猴桃潰瘍病菌的抗藥性問題已引起廣泛關注，但系統性研究仍顯不足。未來研究應著重于以下幾方面：一是擴大監測范圍，加強對不同地區弼猴桃潰瘍病菌抗藥性的監測，掌握其抗藥性分布及變化趨勢；二是深入研究抗藥性機制，特別是多藥抗性和交叉抗性的分子基礎，為制定針對性防控策略提供理論依據；三是加強抗病育種研究，培育抗潰瘍病的弼猴桃新品種；四是開發新型殺菌劑，基于病原菌抗藥性機制，設計并合成高效、低毒、環境友好的新型殺菌劑；五是制定綜合防控策略，結合農業措施、生物防治和化學防治等多種手段，減少殺菌劑使用量，延緩病原菌抗藥性的產生。

綜上所述，通過持續的研究與創新，我們有望有效控制弼猴桃潰瘍病菌的危害，保障弼猴桃產業的可持續發展。

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