溫膽湯調控p38MAPK磷酸化對睡眠剝奪大鼠 失眠及伴發不良情緒的影響

[關鍵詞］失眠；睡眠剝奪；抑郁；焦慮；溫膽湯； p38 MAPK [中圖分類號]R285.5 [文獻標志碼]A [文章編號]doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2025.08.004

Effects of Wendan Decoction on insomnia and associated negative emotions in sleep-deprived rats via regulation of p38 MAPK phosphorylation

GU Xin1*， AN Jing2， ZHANG Hongyan’， ZHA NG Mingxue3， LOU Zhan' 1.DepartmentofNurologyTheFirstAfliatedHospitdlof HebeiNorthUniversityZhangjiakou，Hebe O75oCina; 2.ClinicalLaboratorTheFirstAfiliatedHospitalofHebeiNorthUniversityZhangjiakouHebeiO75oohind; 3.Departmentof Neurology， Chongqing Hechuan TraditionalChinese Medicine Hospital， Chongqing 4Ol520，China

[Abstract]ObjectiveTo investigate theeffectsof WendanDecoction （WDD）oninsomniaand associated negativeemotions insleep-deprivedratsviaregulationofp38mitogen-activatedproteinkinase（p38MAPK）phosphorylationMethodsMaleSDrats wererandomlydividedintosixgroups：control，model，Westemedicine，low-，medium-ndhigdoseWDgroups.eotol groupwasnotsubjectedtosleedeprivation，whiletheotherfivegroupsunderwentslepdeprivationfor21days.Aftersuccesful modelingtreatmentswereadministeredbygavage：animalsinthecontrolandmodelgroupsreceivednormalsaline;Western medicine groupreceivedescitalopram （0.9mg/kg·d）;WDDgroupsreceivedlowmedium，orhighdoses （0.5g/10g，1g/00g，2g/ 100g）of WDDfor14consecutivedays.Sleeplatencyandslepduration were measuredtoevaluateinsomniaTheopen field test andsucrosepreference test wereusedtoasess depresive-like behavior，whiletheelevatedplus maze testwasemployedto evaluateanxiety-likebehavior.Serumlevelsof5-hydroxytryptamine（5-HT），norepinephrine （NE），tumor necrosisfactor α （TNF- ??α∝ ） andinterleukin-6（IL-6aswellashippocampallevelsof5-HTandNE，weredetermindbyELISA.Theexpresionlevelsof brain-derived neurotrophic factor （BDNF），phosphorylated p65 nuclear factor-kB （p-p65 NF- ??κ B）， and p38 MAPK in the hippocampus weredetectedbyWestern blotanalysis.ResultsComparedwiththecontrolgroup，themodelgroupexhibitedprolongedsleep latency （ P lt;0.05）and reduced sleep duration （ P lt;0.05）.The model group also had lower scores in the open field test， decreased sucrose preferencerate，decreased percentageofopenarmentriesandtime spent inopenarms intheelevated plus maze test， reduced 5-HTand NE levels in serum and hippocampal tissue，and decreased hippocampal BDNF expression （ Pe lt;0.05）.Additionally， serum TNF- α and IL-6 levels，as well as the ratios of p-p65 NF- B/p65NF-kB and p-p38 MAPK/p38 MAPK in hippocampal tissue，were significantly increased （ P lt;0.05）. Compared with the model group， the Western medicine group and the medium-，and high-dose WDD groups showed reduced sleep latency and prolonged sleep duration （ P lt;0.05），the Western medicine group and the low-，medium-，andhigh-dose WDDgroupsshowedhadhigherscoresintheopenfieldtest，increasedsucrosepreferencerate， higherpercentageofopenarmentriesandtimespentinopenarms，elevatedlevelsof5-HTandNEinserumandhippocampal tissue，and increased expression of BDNF in the hippocampus （P0.05）. Conclusion WDDatdiferentdosescanimprovesleepandemotioninsleep-deprivedrats，andtheefctsofthehigh-doseWDD arecomparabletothoseofthe Westernmedicineescitalopram.Inhibitionofp38MAPK phosphorylationmaybeapotential molecular mechanism underlying the therapeutic effects of WDD.

[Keywords] insomnia; sleep deprivation; depression； anxiety；Wendan Decoction; p38 MAPK

失眠是常見的睡眠障礙，患者表現為對睡眠時間和/或睡眠質量不滿足的主觀體驗，會影響日常生活和工作，同時也促進焦慮和抑郁等不良情緒的產生；不良情緒又會影響失眠患者的睡眠時間或質量、加重失眠。在臨床實踐中，失眠與不良情緒互相促進，不僅影響患者身心健康，也增加治療難度[1-2]。p38 絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated proteinkinase，MAPK）的磷酸化參與失眠、抑郁、焦慮等疾病的發生發展，研究顯示失眠、抑郁、焦慮等疾病模型中p38MAPK的磷酸化水平增加，磷酸化的 p38 MAPK會加重神經元損傷、炎癥反應、細胞調亡[3-4]。因此，抑制p38MAPK磷酸化是改善失眠、抑郁、焦慮重要分子生物學靶點。

失眠屬于中醫理論“不寐\"范疇，其病機在于膽胃不和、痰熱內擾。溫膽湯是用于痰熱內擾證治療的經典中藥方劑，具有理氣化痰、健脾安神，臨床實踐中被用于失眠的治療5。相關的動物實驗表明，溫膽湯對焦慮性失眠大鼠的焦慮情緒及腦組織損傷具有改善作用：網絡藥理學分析表明，溫膽湯治療失眠的潛在生物學靶點包括p38MAPK、炎癥因子、凋亡因子等。目前，溫膽湯在失眠并發不良情緒中的治療價值及分子機制尚缺乏研究證據。因此，本研究擬通過動物實驗觀察溫膽湯調控p38MAPK磷酸化對睡眠剝奪大鼠失眠及伴發不良情緒的影響。

1材料與方法

1.1材料

成年雄性SD大鼠購自遠大賽威信生命科學（南京）有限公司，體質量（ 200±20 ） ^g，8～10 周齡，共60只。使用許可證號：SYXK（蘇）2022-0018，生產許可證號：SCXK（蘇）2025-0006。研究經河北北方學院附屬第一醫院醫學倫理委員會批準（K2024158）。

5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）（批號：D751013）、去甲腎上腺素（norepinephrine，NE）（批號：D711249）、腫瘤壞死因子- σ?α?α?α?α （tumor necrosis fac-tor- ??αα?αα ，TNF- σ?α?α?α?α ）（批號D741029）、白細胞介素-6（in-terleukin-6，IL-6）（批號D721022）的ELISA試劑盒購自生工生物工程（上海）股份有限公司，腦源性神經營養因子（brain-derived neurotrophic factor， BDNF）（批號ab108319）磷酸化p65核因子 -κB （nuclearfactor- ??κB ， NF-κB ）（批號ab76302） ?^p38 MAPK（批號：ab178867）、磷酸化 p38 MAPK（phosphorylated p38MAPK， p-p38 MAPK）（批號ab195049）的兔抗大鼠特異性一抗購自美國Abcam公司。

曠場（型號YAN-COF-02）、高架十字迷宮（型號YAN-EPR）購自上海玉研科學儀器有限公司，電泳系統（型號VE680）、凝膠成像系統（型號Tanon4600SF）均購自上海天能生命科學有限公司。

1.2 方法

1.2.1動物造模及評價參照陳雨菲的研究，采用改良多平臺法制備睡眠剝奪大鼠模型，將大鼠放置在睡眠剝奪箱的平臺上，保持水溫 W日光燈照射，大鼠進行自由活動、攝食和飲水，當大鼠進行快動眼睡眠期時會因肌肉松弛而發生鼻尖觸碰水面或跌入水中，進而驚醒并維持清醒狀態，每天進行1次睡眠剝奪、時間 12h（6：50-18：50） ，連續進行 21d_? 。

10只大鼠作為對照、不進行睡眠剝奪；50只大鼠作為造模組，進行睡眠剝奪。造模結束后，各組大鼠采用戊巴比妥鈉睡眠實驗對模型進行評價，方法如下：均給予 2% 戊巴比妥鈉 30mg/kg 腹腔注射，而后將大鼠腹部向上、身體垂直放置在平板上，觀察大鼠保持不動超過60s為翻正反射消失，從腹腔注射戊巴比妥鈉到翻正反射消失為睡眠潛伏時間；觀察大鼠 60s 內翻轉2次以上為翻正反射恢復，從翻正反射消失至翻正反射恢復的時間為睡眠持續時間。根據大鼠睡眠潛伏時間，睡眠持續時間/曠場實驗得分、蔗糖水偏好率、開臂入臂次數百分比、開臂滯留時間百分降低判斷造模成功，具體見表1。

1.2.2動物分組及給藥50只進行睡眠剝奪的大鼠隨機分為模型組、西藥組、低劑量溫膽湯組、中劑量溫膽湯組、高劑量溫膽湯組，每組各10只；另10只不進行睡眠剝奪的對照大鼠作為對照組。建模成功后各組大鼠進行灌胃治療，對照組和模型組給予生理鹽水 10mL/（kg?d） 灌胃，西藥組給予艾司西酞普蘭 0.9mg/（kg?d） 灌胃，低、中、高劑量溫膽湯組參照張慧的研究給予溫膽湯 0.5g/100g，1g/100g，2g/ 100g 灌胃，每天1次，連續 14d （204號

1.2.3曠場實驗完成藥物干預后進行曠場實驗，將大鼠放入曠場箱中央的方格，記錄大鼠 5min 內水平穿越的格數，即為曠場實驗水平運動得分；記錄大鼠 5min 內后肢直立次數，即為曠場實驗垂直運動得分。

1.2.4高架十字迷宮實驗完成曠場實驗后進行高架十字迷宮實驗，將大鼠放入 100cm×100cm×40cm 塑料盒內自由探索 5min ，而后迅速將大鼠頭朝迷宮開臂A放人高架十字迷宮，記錄 5min 內大鼠開臂進入次數、閉臂進入次數、開臂滯留時間、閉臂滯留時間，計算：（1）開臂進入次數百分比 開臂進入次數/（開臂進入次數 + 閉臂進入次數） ×100% ；（2）開臂滯留時間百分比 開臂滯留時間/開臂滯留時間 + 閉臂滯留時間） ×100% 。

1.2.5蔗糖水偏好實驗完成曠場實驗和高架十字迷宮實驗后進行蔗糖水偏好實驗，禁食禁水 24h 然后給予2瓶飲用水，一瓶為 1% 蔗糖水、一瓶為純凈水，大鼠自由飲水 30min 后調換蔗糖水和純凈水位置，繼續自由飲水 30min 。記錄大鼠攝入蔗糖水和純凈水的體積，計算蔗糖水偏好率 L= 蔗糖水消耗量/（蔗糖水消耗量 + 純凈水消耗量） ×100% 。

1.2.6血清指標檢測完成蔗糖水偏好實驗后腹腔 注射 2% 戊巴比妥鈉 30mg/kg ，麻醉后經腹主動脈 取血 3mL ，靜置 ¹h 后離心分離血清，采用酶聯免 疫吸附法檢測5-HT、NE、TNF- σ?α?α?α?α 、IL-6的水平。

1.2.7海馬組織中蛋白表達的檢測完成腹主動脈采血后解剖腦組織，分離海馬并加入裂解液進行勻漿，勻漿液進行離心并取上清液，檢測上清液的蛋白濃度并將 20μg 蛋白用于Westernblot實驗，依次電泳、電轉膜、 5% 脫脂牛奶室溫封閉， 4‰ 孵育BDNF一抗（1：1 000）、p-p65 NF- ??κB 一抗（1：800）、p38 MAPK一抗（1：800）、p-p38MAPK一抗（1：600）、β -actin一抗（1：4000）過夜。次日室溫孵育辣根過氧化物酶二抗 （1：2000）60min 。將膜放入凝膠成像系統，采用增強化學發光顯影液對BDNF、 NF-κB 、P-p38MAPK 和β-actin進行化學顯影，計算顯影條帶灰度值，以 β -actin為內參，對BDNF的蛋白表達水平進行定量分析，對 _NF-κB，p38 MAPK的磷酸化水平進行定量分析。

1.2.8海馬組織中5-HT、NE的檢測取海馬組織的勻漿液，采用ELISA法檢測 5-HT，NE 的水平，計算每克勻漿液蛋白中5-HT、NE的水平。

1.3 統計學處理

采用SPSS25.0軟件進行實驗數據的統計學處理，計量資料首先進行正態性檢驗和方差齊性檢驗，對符合正態分布且方差齊的計量資料以“ ”表示，

表1藥物干預前對照大鼠與睡眠剝奪大鼠各項指標的比較""）

Table1 Comparison of various indicators between control rats and sleep-deprived rats before drugintervention （±s）

注：與對照大鼠比較， ^?Plt;0.05

通過 χ_t 檢驗進行兩組間比較，通過單因素方差分析進行多組間比較并通過 LSD-t 檢驗進行兩兩比較。Plt;0.05 為差異有統計學意義。

2結果

2.1睡眠剝奪模型的評價

50只大鼠進行21d睡眠剝奪，與對照組比較，造模組大鼠睡眠潛伏時間延長，睡眠持續時間縮短，曠場實驗水平運動得分、曠場實驗垂直運動得分、蔗糖水偏好率、開臂入臂次數百分比、開臂滯留時間百分比降低，差異有統計學意義（ _{（Plt;0.05）} ，表明睡眠剝奪造模成功且模型大鼠合并焦慮、抑郁情緒。詳見表1。

2.2 各組大鼠一般情況的比較

對照組大鼠的精神狀態好、反應靈敏、毛發有光澤，體質量在實驗過程中有所增加；模型組大鼠的精神狀態不佳、焦躁，毛發晦暗，取材前體質量較對照組減輕（ Plt;0.05） ；西藥組和不同劑量溫膽湯組的精神狀態改善，焦躁行為減輕，取材前體質量較模型組增加 （Plt;0.05） 。詳見表2。

表2各組大鼠體質量的比較 0

Table 2 Comparison of the body weights among different groups of rats（x±s， n=10 ）

注：與對照組比較， ^*Plt;0.05 ；與模型組比較， ^#Plt;0.05 ；與西藥組比較， 。

2.3 各組大鼠睡眠情況的比較

與對照組比較，模型組的睡眠潛伏時間延長，睡眠持續時間較對照組縮短 （Plt;0.05） 。與模型組比較，低劑量溫膽湯組的睡眠潛伏時間、睡眠持續時間無顯著性差異 （Pgt;0.05） ；西藥組和中劑量、高劑量溫膽湯組的睡眠潛伏時間縮短，睡眠持續時間延長（Plt;0.05） 。與西藥組比較，低劑量和中劑量的睡眠潛伏時間延長，睡眠持續時間縮短（ （Plt;0.05） ；高劑量溫膽湯組的睡眠潛伏時間、睡眠持續時間無顯著性差異 （Pgt;0.05） 。詳見表3。

表3各組大鼠睡眠潛伏時間、睡眠持續時間的比較

Table 3Comparison of sleep latency and sleep duration among different groups of rats（x±s， n=10 ）

注：與對照組比較， ^*Plt;0.05 ；與模型組比較， ^*Plt;0.05 ；與西藥組比較， ^gPlt;0.05

2.4各組大鼠不良情緒的比較

與對照組比較，模型組的曠場實驗得分、蔗糖水偏好率、開臂人臂次數百分比、開臂滯留時間百分比降低（ （Plt;0.05） 。與模型組比較，西藥組和不同劑量溫膽湯組的曠場實驗得分、蔗糖水偏好率、開臂入臂次數百分比、開臂滯留時間百分比增加 （Plt;0.05） 。與西藥組比較，低劑量和中劑量溫膽湯組的曠場實驗得分、蔗糖水偏好率、開臂入臂次數百分比、開臂滯留時間百分比顯著降低（ （Plt;0.05） ；高劑量溫膽湯組的曠場實驗得分、蔗糖水偏好率、開臂入臂次數百分比、開臂滯留時間百分比無顯著性差異（ （Pgt;0.05） 。詳見表4。

2.5 各組大鼠血清5-HT、NE、TNF- σ?α?α?α?α 、IL-6水平的 比較

與對照組比較，模型組的血清5-HT、NE水平降低 （Plt;0.05） ，TNF- σ?α?α?α 、IL-6水平較對照組升高（ Plt; 0.05）；與模型組比較，西藥組和不同劑量溫膽湯組的血清5-HT、NE水平升高（ （Plt;0.05） ，TNF- σ?α?α?α?α IL-6水平降低 （Plt;0.05） ；與西藥組比較，低劑量和中劑量溫

表4各組大鼠不良情緒的比較

Table 4 Comparison of negative emotions among different groups of rats （x±s， n=10 ）

注：與對照組比較， ^*Plt;0.05 ；與模型組比較， ^*Plt;0.05 ;與西藥組比較， ^aPlt;0.05 （204號

表5各組大鼠血清5-HT、NE、TNF- σ?α?α?α?α 、IL-6的比較（x±s， n=10 ）

Table5Comparison of serum 5-HT，NE， TNF- ??αα ，and IL-6 among different groups ofrats

注：與對照組比較， ^*Plt;0.05 ；與模型組比較， ^#Plt;0.05 ；與西藥組比較， ^gPlt;0.05

膽湯組的血清5-HT、NE 水平降低（ Plt;0.05） ，TNF- ??αα 、IL-6水平升高（ （Plt;0.05） ；高劑量溫膽湯組的血清5-HT、NE、TNF- α_?α∝ 、IL-6水平無顯著性差異（ Pgt;0.05） 。詳見表5。

2.6各組大鼠海馬組織中5-HT、NE水平的比較

與對照組比較，模型組海馬組織中5-HT、NE的水平較對照組降低 （Plt;0.05） 。與模型組比較，西藥組和不同劑量溫膽湯組海馬組織中5-HT、NE的水平升高 （Plt;0.05） 。與西藥組比較，低劑量和中劑量溫膽湯組海馬組織中5-HT、NE的水平降低（ Plt; 0.05）；高劑量溫膽湯組海馬組織中5-HT、NE的水平無顯著性差異 （P50.05） 。詳見表 6 □

表6各組大鼠海馬組織中5-HT、NE水平的比較

Table6 Comparison of 5-HT and NE levelsin hippocampal tissues among different groups of rats

注：與對照組比較， ^*Plt;0.05 ;與模型組比較， ^*Plt;0.05 ;與西藥組比 較， ^gPlt;0.05 ；與低劑量組比較， ^aPlt;0.05 ；與中劑量組比較， （20

2.7各組大鼠海馬組織BDNF、p-p65 NF- σ_κB 及p38MAPK蛋白表達水平的比較

與對照組比較，模型組的腦組織BDNF蛋白表達水平較對照組降低（ （Plt;0.05） ）， p-p65 NF- ?κB/p65 NF-κB?p-p38 MAPK/p38MAPK蛋白表達水平比值升高 （Plt;0.05） 。與模型組比較，西藥組和不同劑量溫膽湯組的海馬組織BDNF蛋白表達水平升高（ Plt; 0.05），p-p65 NF-kB/p65 NF- ??κB 及p38 MAPK/p38MAPK蛋白表達水平比值降低（ （Plt;0.05） ）。與西藥組比較，低劑量和中劑量溫膽湯組的BDNF蛋白表達水平降低（ （Plt;0.05） ，p-p65 NF- κB/p65 NF- σ_κB p38MAPK/p38MAPK蛋白表達水平比值升高 （Plt;0.05） ;高劑量溫膽湯組的海馬組織BDNF、p-p65 NF- ??κB/Γ p65NF- σ_κB 、p38MAPK/p38MAPK蛋白表達水平比值無顯著性差異 （Pgt;0.05） 。詳見圖1。

3討論

失眠是一種影響正常工作及生活的生理心理疾患，失眠患者常常伴有焦慮、抑郁等不良情緒。本研究采用改良多平臺法制備睡眠剝奪大鼠模型，該模型不僅能夠有效的進行睡眠剝奪，還能通過設置多平臺避免單個大鼠因群體分離產生應激刺激，進而排除睡眠剝奪以外的因素對情緒造成影響。陳雨菲等研究發現，通過改良多平臺法可制備睡眠剝奪大鼠模型，大鼠表現出失眠以及抑郁情緒8。本研究對睡眠剝奪大鼠睡眠情況及抑郁情況的檢測結果與陳雨菲的研究結果一致，即睡眠剝奪大鼠的睡眠潛伏時間延長、睡眠持續時間縮短并且在反映抑郁的實驗中曠場實驗得分、蔗糖水偏好率均降低。此外，本研究還對焦慮情緒進行檢測，結果顯示：在反映焦慮的高架十字迷宮實驗中睡眠剝奪大鼠的開臂人臂次數百分比、開臂滯留時間百分比降低，提示模型大鼠出現顯著焦慮情緒。以上結果表明，本研究通過改良多平臺法制備的睡眠剝奪大鼠出現失眠以及抑郁、焦慮的不良情緒，與臨床實踐中失眠患者容易并發焦慮、抑郁的特點一致。

注：與對照組比較， ^*Plt;0.05 ;與模型組比較， ^#Plt;0.05 ;與西藥組比較， ；與低劑量組比較， ^aPlt;0.05 ；與中劑量組比較， ^bPlt;0.05

神經遞質紊亂、炎癥反應激活是失眠以及抑郁、焦慮過程中重要的生物學改變。p38MAPK是絲裂原活化蛋白激酶家族的成員之一，研究資料顯示：中樞神經系統中p38MAPK參與炎癥反應、神經遞質、BDNF的調控9-10。另有網絡藥理學分析的結果顯示，p38MAPK是溫膽湯治療失眠的潛在作用靶點。溫膽湯是臨床治療痰熱內擾證的經典方，由半夏、竹茹、麩炒積實、陳皮、炙甘草及茯苓6種中藥組成，該方兼具改善失眠以及情志雙相調節的治療價值，相關的臨床研究資料顯示：溫膽湯治療失眠伴焦慮抑郁共病患者能夠改善失眠、抑郁及焦慮[1I-12]。但相關的分子生物學機制尚不清楚。因此，本研究旨在以 p38 MAPK為切入點，對溫膽湯在失眠中的治療價值及相關分子機制展開探索。

中醫學認為失眠以及不良情緒病機在于膽胃不和、痰熱內擾、食滯內擾。溫膽湯的功效是調膽和胃，理氣化痰。根據《三因極一病證方論》卷八的記載，溫膽湯對膽胃不和、痰熱內擾引起的虛煩、不得眠具有治療價值。該方的君藥為半夏，能燥濕化痰、降逆和胃；臣藥為竹茹，能除煩止嘔、解少陽腑熱；輔以枳實、陳皮、炙甘草及茯苓能調和脾胃和膽氣，中和諸味藥物的藥性[12-13]。張慧的動物實驗使用溫膽湯治療焦慮性失眠大鼠，結果顯示溫膽湯具有抗焦慮作用。本研究使用溫膽湯治療睡眠剝奪大鼠，對失眠及不良情緒的觀察結果顯示：中劑量和高劑量溫膽湯改善睡眠，低、中、高3種劑量溫膽湯改善焦慮和抑郁，并且高劑量溫膽湯對睡眠及焦慮、抑郁的改善作用與西藥艾司西酞普蘭的治療效果相當。以上結果表明溫膽湯在睡眠剝奪大鼠中發揮改善睡眠以及抗焦慮、抗抑郁作用。

本研究進一步對溫膽湯改善睡眠以及抗焦慮、抗抑郁相關的分子機制進行探索。炎癥反應激活、神經遞質釋放紊亂、突觸可塑性受損等是影響睡眠和情緒的生物學過程。研究資料顯示，促進神經遞質5-HT和NE的分泌能夠改善睡眠、減輕抑郁[4；BDNF調控神經元分化和再生，增加BDNF表達能夠增加突觸可塑性、改善抑郁和焦慮[15];NF- σ_?κB 是調控炎癥因子表達的轉錄因子，通過增加TNF- α_ααα_α IL-6等炎癥因子表達影響神經遞質釋放，進而參與失眠及不良情緒的產生。p38MAPK的磷酸化抑制BDNF釋放、引起神經元損傷、降低突觸可塑性，同時也引起NF- ??κB 磷酸化、激活炎癥反應[]。本研究中，睡眠剝奪大鼠的血清5-HT、NE水平及海馬組織BDNF表達下降，血清TNF- α_ααα_αα_α IL-6水平及海馬組織 Δ_p65ΔNF-κB 和p38MAPK的磷酸化水平增加，與既往研究中相應神經遞質、細胞因子、轉錄因子參與失眠、抑郁、焦慮的結果一致；使用不同劑量溫膽湯治療睡眠剝奪大鼠后，血清神經遞質、炎癥因子的水平以及海馬組織BDNF的表達及 p65NF-κB 和 p38 MAPK的磷酸化水平均明顯改善，并且高劑量溫膽湯的改善作用與西藥艾司西酞普蘭相當。

綜上所述，溫膽湯對睡眠剝奪大鼠的睡眠、抑郁、焦慮具有改善作用，同時調控神經遞質、炎癥反應、細胞因子，高劑量溫膽湯在睡眠剝奪大鼠中的調控作用與西藥艾司西酞普蘭相當，進而對臨床使用溫膽湯治療失眠并發不良情緒提供依據。此外，本研究還證實溫膽湯對睡眠剝奪大鼠睡眠、抑郁、焦慮的改善作用與抑制p38MAPK磷酸化相關，進而為今后研究睡眠并發不良情緒的分子機制提供了新的分子靶點。

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