羊大腸埃希菌滅活苗微囊化制劑的研究

楊力偉　方芳　劉曉娜　孟小林

摘要：以海藻酸鈉為包被材料，采用噴霧干燥法對羊大腸埃希菌滅活苗進行微囊化包被，以包埋率、平均粒徑作為評價指標(biāo)，通過單因素試驗結(jié)合正交試驗對微囊配方及工藝進行優(yōu)化。結(jié)果表明，壁材濃度2%，芯材與壁材比例 1 ∶3，保護劑含量4%，乳化劑含量6%，進風(fēng)溫度200 ℃，出風(fēng)溫度90 ℃，蠕動泵速率70 mL/h，均質(zhì)速率16 000 r/min時，所得產(chǎn)品粒徑為（5.08±2.75） μm，包埋率達到75.23%，效果最佳。同時對產(chǎn)品進行體外釋放試驗，結(jié)果表明，所制備的微膠囊產(chǎn)品在人工胃液中2 h內(nèi)未完全溶解，可抵御胃酸，具有腸溶性。

關(guān)鍵詞：微膠囊；大腸埃希菌；海藻酸鈉；包埋

中圖分類號：R944.5；S858.265.1+2文獻標(biāo)志碼：A文章編號：1002-1302（2014）01-0177-03

收稿日期：2013-05-31

作者簡介：楊力偉（1984—），男，新疆昌吉人，碩士，主要從事動物疾病防治工作。E-mail：94696181@qq.com。疫苗是預(yù)防和控制傳染病的一種重要手段，我國研制的羊大腸埃希菌滅活苗是福爾馬林和氫氧化鋁苗，已用于生產(chǎn)，所采用的方法為注射法，具有良好的預(yù)防效果。但在使用中，注射過程往往會給動物造成較大應(yīng)激，使動物生產(chǎn)性能下降，甚至因為操作或護理不當(dāng)，引起動物死亡，造成較大的經(jīng)濟損失。

微膠囊[1]產(chǎn)品作為一種新型藥物劑型廣泛應(yīng)用于口服疫苗給藥中。口服疫苗[2]通過飲水或采食對動物進行預(yù)防接種，具有安全易行、實用方便、省時省力等優(yōu)點，但是由于反芻動物消化道的復(fù)雜性，其強大的瘤胃微生物消化功能使得常規(guī)口服制劑若不經(jīng)特殊處理，會在消化道內(nèi)被降解而減弱或失去效果。因此，本研究致力于開發(fā)羊大腸埃希菌疫苗新劑型改變傳統(tǒng)注射劑型，使免疫接種途徑更加簡單快捷，從而為開發(fā)反芻動物用大腸埃希菌口服疫苗奠定理論和實踐基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1菌株C83-1、C83-2、C83-3菌株，由中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所鑒定、保管和供應(yīng)。

1.1.2試驗動物健康昆明白小鼠，購自新疆醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗動物中心。

1.1.3試驗試劑麥康凱瓊脂（上海市醫(yī)學(xué)化驗所試劑廠），海藻酸鈉（天津市光復(fù)精細化工研究所），胃蛋白酶（上海藍季科技發(fā)展有限公司），吐溫80（天津市盛淼精細化工有限公司），BCA蛋白測定試劑盒（北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司）。

1.1.4試驗儀器PL2002電子天平[梅勒特-托利多儀器（上海）有限公司]，ST-98B搖床（北京桑翌試驗儀器研究所）、HG-76-6電熱恒溫兩用箱（湖南省長沙市西區(qū)起重電器廠），MM-I型微量振蕩器（江蘇省姜堰市健華醫(yī)療器械有限公司），YC-015試驗型噴霧干燥機（上海雅程儀器設(shè)備有限公司），KHB ST-360 全自動酶標(biāo)儀。

1.2試驗方法

1.2.1大腸埃希菌滅活苗的制備

1.2.1.1菌株的復(fù)蘇取適量3種凍干粉，分別接種于普通肉湯培養(yǎng)基中，37 ℃恒溫?fù)u床130 r/min培養(yǎng)24 h。

1.2.1.2菌株的復(fù)壯取復(fù)蘇菌液腹腔注射小鼠，待其死亡后，無菌剖取肝臟涂布于麥康凱培養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)24 h，伊紅美藍培養(yǎng)基劃線分純2代，革蘭氏染色，鏡檢。純化后挑取單個菌落接種于普通肉湯培養(yǎng)基中，作為種子菌備用。

1.2.1.3菌種保存純化鏡檢后，挑取單個菌落接種于半固體培養(yǎng)基中，37 ℃培養(yǎng)24 h，無菌甘油封存，于4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.1.4制苗用菌液制備將C83-1、C83-2、C83-3種子菌混合，按一定量接種于2%蛋白胨肉湯37 ℃恒溫?fù)u床中130 r/min培養(yǎng)24 h。

1.2.1.5菌液滅活檢驗按菌液總量的0.3%～0.45%加入甲醛溶液，經(jīng)37 ℃滅活48 h，吸取一定量滅活菌液，接種于普通瓊脂培養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)48 h，無菌生長。

1.2.1.6菌落計數(shù)吸取一定量的菌液以0.22 μm濾膜過濾除菌水作倍比稀釋，于血細胞計數(shù)器上菌落計數(shù)。

1.2.1.7配苗經(jīng)計數(shù)后，調(diào)整菌液含菌量作為羊大腸埃希菌滅活苗。

1.2.2羊大腸埃希菌的微囊化

1.2.2.1微囊化工藝流程取適量的羊大腸埃希菌滅活苗加入一定濃度的壁材溶液中，乳化均質(zhì)，進行噴霧干燥，冷卻，收集產(chǎn)品。

1.2.2.2壁材溶液配制海藻酸鈉磁力攪拌溶解過夜、高壓（115 ℃，10 min）備用。

1.2.2.3乳化均質(zhì)海藻酸鈉、乳化劑、保護劑及滅活抗原組織搗碎機高速乳化10 min，于均質(zhì)機上A擋（10 000 r/min）保溫均質(zhì)30 min。

1.2.2.4噴霧干燥將乳狀液置于噴霧干燥機內(nèi)，進行噴霧干燥。

1.2.2.5微囊包被配方篩選通過單因素正交試驗確定試驗4個影響因素：壁材溶液濃度、芯材與壁材的比例、保護劑含量以及乳化劑含量。采用L9（34）正交表設(shè)計配方正交試驗因素水平如表1所示。以包埋率和平均粒徑為指標(biāo)，確立最佳配方。

1.2.3微囊包被疫苗的參數(shù)測定

1.2.3.1微膠囊疫苗粒直徑的測定Motic數(shù)碼顯微鏡 1 000 倍視野下隨機觀察200個微膠囊顆粒形態(tài)，用 Adwanced 3.2軟件測量微膠囊的粒徑，取其平均值，并作出粒徑分布圖。

1.2.3.2微膠囊疫苗包埋率測定[3]精確稱取0.01 g微膠囊，溶解于經(jīng)0.22 μm濾膜過濾的滅菌水中，離心，洗去未包被的菌體；剩余產(chǎn)品精確定容至25 mL容量瓶中，用BCA蛋白試劑盒，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定其蛋白含量，計算微膠囊包埋率：微膠囊包埋率=（總蛋白含量-未包埋蛋白含量）/總蛋白含量×100%

1.2.3.3微膠囊體外釋放試驗按照文獻[4]中的附錄XC溶出度測定法進行試驗。稱取0.10 g微膠囊產(chǎn)品，以50 mL人工腸液作為溶出介質(zhì)，在 37 ℃ 恒溫?fù)u床150 r/min振蕩，分別于0、15、30、45、60 min吸取1 mL介質(zhì)溶液，同時補加等量的人工腸液，測定蛋白質(zhì)含量，計算釋放率。按上述方法加入人工胃液，分別在0、0.5、1.0、1.5、2.0 h時吸取溶液，同時補加等量的人工胃液，測定蛋白質(zhì)含量，計算釋放率，同時，以未包被羊大腸埃希菌的微膠囊作對照組。

1.3試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

本試驗所有數(shù)據(jù)均通過Excel 2003軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2結(jié)果與分析

2.1羊大腸埃希菌微膠囊配方和工藝正交試驗結(jié)果及分析

采用極差分析法對羊大腸埃希菌微膠囊配方和工藝正交試驗數(shù)據(jù)進行計算和分析，結(jié)果如表3、表4所示。

由表3可見，影響噴霧干燥微膠囊包埋率試驗因素的主次順序為乳化劑含量>芯材 ∶壁材>保護劑含量>壁材濃度。該指標(biāo)越大越好，因此最優(yōu)配方為：壁材濃度2%，芯材 ∶壁材1 ∶3，保護劑含量4%，乳化劑含量6%。影響微膠囊粒直徑指標(biāo)的主次順序為乳化劑含量>芯材 ∶壁材>壁材濃度>保護劑含量，該指標(biāo)越小越好，因此最佳配方為：壁材濃度2%，芯材 ∶壁材1 ∶1，保護劑含量2%，乳化劑含量4%。

2.3微膠囊包埋率

標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=20.807x-0.150 4（r2=0.992 3），計算出產(chǎn)品包埋率為75.23%。

2.4微膠囊體外釋放試驗結(jié)果

由圖4可以看出，在15 min時，人工腸液中的蛋白質(zhì)含量達到峰值，說明此時微膠囊大多數(shù)已經(jīng)崩解，暴露出菌體抗原，因而此時蛋白含量高；在15 min以后，由于膠囊已被腸液溶解，蛋白含量變化不大。

由圖5看出，在2 h內(nèi)，人工胃液中蛋白含量變化不大，說明微膠囊產(chǎn)品在2 h內(nèi)未被完全溶解，菌體蛋白沒有完全暴露。

微膠囊產(chǎn)品在人工腸液中15～30 min內(nèi)完全崩解，釋放疫苗，說明具有腸溶性；在人工胃液中2 h內(nèi)多數(shù)未被胃液消化，說明能夠耐胃酸（圖4、圖5）。

3結(jié)論與討論

通過口服疫苗進行免疫預(yù)防接種是實現(xiàn)局部黏膜免疫的主要和重要途徑，而胃腸道黏膜免疫系統(tǒng)則是口服疫苗產(chǎn)生免疫力的物質(zhì)基礎(chǔ)[5]。口服后體內(nèi)的攝取位點主要有4個，即小腸絨毛頂端、小腸內(nèi)的巨噬細胞、腸上皮細胞、派爾集合淋巴結(jié)（peyers patches，PP結(jié)）上皮。PP結(jié)分布于胃腸道，是最大的黏膜相關(guān)淋巴組織，它與腸腔僅隔一層上皮細胞，其腸黏膜誘導(dǎo)部位的特異性上皮細胞（M細胞）可攝取腸腔里的抗原物質(zhì)[6]。

有研究表明，粒徑在10 μm以下的顆粒都可被腸道PP結(jié)內(nèi)的M細胞攝取吸收，其中5～10 μm的微球滯留在該結(jié)內(nèi)釋放藥物；而小于5 μm的微球則通過PP結(jié)進入淋巴循環(huán)，說明粒徑越小，吸收越好[7-8]。例如，球蟲疫苗經(jīng)海藻酸包被后，拌料口服，有較好的效果。本試驗制得的微膠囊產(chǎn)品粒徑小且具有耐胃酸性和良好腸溶性，有利于抗原物質(zhì)在腸腔中的吸收。

本試驗最終確定以海藻酸鈉為包被材料制作羊大腸埃希菌微膠囊的最佳配方及最優(yōu)工藝結(jié)果如下：壁材海藻酸鈉溶

液濃度2%，芯材與壁材比例1 ∶3，保護劑含量4%，乳化劑含量6%；進風(fēng)溫度200 ℃，出風(fēng)溫度90 ℃，蠕動泵速度 70 mL/h，均質(zhì)速率16 000 r/min。所得產(chǎn)品平均粒徑為 （5.08±2.75） μm，包埋率達到75.23%。所制備的微膠囊產(chǎn)品可抵御胃酸，具有腸溶性。

參考文獻：

[1]Mark H F. Encyclopedia of polymer science and technology[M]. 2nd ed. New York：Wiley Press，1987：724.

[2]孫翰昌，楊帆. 腸型點狀氣單胞菌口服疫苗微粒的制備及體外釋放研究[J]. 水產(chǎn)科學(xué)，2008，27（12）：658-661.

[3]陳河如，鄒湘輝，馬民智. 頭孢唑啉鈉-海藻酸鈉微膠囊的制備及抗菌作用[J]. 應(yīng)用化學(xué)，2007，24（12）：1354-1358.

[4]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會. 中華人民共和國藥典：二部[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.

[5]馬興元. 動物口服疫苗研究進展[J]. 動物醫(yī)學(xué)進展，1998，2（2）：2-5.

[6]項琪，寧黎麗. 口服疫苗微球化研究進展[J]. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志：2001，18（2）：4-7.

[7]陳浮，張志榮，黃園. 口服疫苗給藥系統(tǒng)的研究進展[J]. 華西藥學(xué)雜志，2007，22（1）：69-71.

[8]Shakweh M，Besnard M，Nicolas V，et al. Poly （lactide-co-glycolide） particles of different physicochemical properties and their uptake by peyers patches in mice[J]. Eur J Pharm Biopharma，2005，61（1/2）：1-13.陳愛華，姚國興，吳楊平，等. 不同地理種群紅殼色文蛤的雜種優(yōu)勢[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（1）：180-183.

1.2.3.3微膠囊體外釋放試驗按照文獻[4]中的附錄XC溶出度測定法進行試驗。稱取0.10 g微膠囊產(chǎn)品，以50 mL人工腸液作為溶出介質(zhì)，在 37 ℃ 恒溫?fù)u床150 r/min振蕩，分別于0、15、30、45、60 min吸取1 mL介質(zhì)溶液，同時補加等量的人工腸液，測定蛋白質(zhì)含量，計算釋放率。按上述方法加入人工胃液，分別在0、0.5、1.0、1.5、2.0 h時吸取溶液，同時補加等量的人工胃液，測定蛋白質(zhì)含量，計算釋放率，同時，以未包被羊大腸埃希菌的微膠囊作對照組。

1.3試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

本試驗所有數(shù)據(jù)均通過Excel 2003軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2結(jié)果與分析

2.1羊大腸埃希菌微膠囊配方和工藝正交試驗結(jié)果及分析

采用極差分析法對羊大腸埃希菌微膠囊配方和工藝正交試驗數(shù)據(jù)進行計算和分析，結(jié)果如表3、表4所示。

由表3可見，影響噴霧干燥微膠囊包埋率試驗因素的主次順序為乳化劑含量>芯材 ∶壁材>保護劑含量>壁材濃度。該指標(biāo)越大越好，因此最優(yōu)配方為：壁材濃度2%，芯材 ∶壁材1 ∶3，保護劑含量4%，乳化劑含量6%。影響微膠囊粒直徑指標(biāo)的主次順序為乳化劑含量>芯材 ∶壁材>壁材濃度>保護劑含量，該指標(biāo)越小越好，因此最佳配方為：壁材濃度2%，芯材 ∶壁材1 ∶1，保護劑含量2%，乳化劑含量4%。

2.3微膠囊包埋率

標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=20.807x-0.150 4（r2=0.992 3），計算出產(chǎn)品包埋率為75.23%。

2.4微膠囊體外釋放試驗結(jié)果

由圖4可以看出，在15 min時，人工腸液中的蛋白質(zhì)含量達到峰值，說明此時微膠囊大多數(shù)已經(jīng)崩解，暴露出菌體抗原，因而此時蛋白含量高；在15 min以后，由于膠囊已被腸液溶解，蛋白含量變化不大。

由圖5看出，在2 h內(nèi)，人工胃液中蛋白含量變化不大，說明微膠囊產(chǎn)品在2 h內(nèi)未被完全溶解，菌體蛋白沒有完全暴露。

微膠囊產(chǎn)品在人工腸液中15～30 min內(nèi)完全崩解，釋放疫苗，說明具有腸溶性；在人工胃液中2 h內(nèi)多數(shù)未被胃液消化，說明能夠耐胃酸（圖4、圖5）。

3結(jié)論與討論

通過口服疫苗進行免疫預(yù)防接種是實現(xiàn)局部黏膜免疫的主要和重要途徑，而胃腸道黏膜免疫系統(tǒng)則是口服疫苗產(chǎn)生免疫力的物質(zhì)基礎(chǔ)[5]。口服后體內(nèi)的攝取位點主要有4個，即小腸絨毛頂端、小腸內(nèi)的巨噬細胞、腸上皮細胞、派爾集合淋巴結(jié)（peyers patches，PP結(jié)）上皮。PP結(jié)分布于胃腸道，是最大的黏膜相關(guān)淋巴組織，它與腸腔僅隔一層上皮細胞，其腸黏膜誘導(dǎo)部位的特異性上皮細胞（M細胞）可攝取腸腔里的抗原物質(zhì)[6]。

有研究表明，粒徑在10 μm以下的顆粒都可被腸道PP結(jié)內(nèi)的M細胞攝取吸收，其中5～10 μm的微球滯留在該結(jié)內(nèi)釋放藥物；而小于5 μm的微球則通過PP結(jié)進入淋巴循環(huán)，說明粒徑越小，吸收越好[7-8]。例如，球蟲疫苗經(jīng)海藻酸包被后，拌料口服，有較好的效果。本試驗制得的微膠囊產(chǎn)品粒徑小且具有耐胃酸性和良好腸溶性，有利于抗原物質(zhì)在腸腔中的吸收。

本試驗最終確定以海藻酸鈉為包被材料制作羊大腸埃希菌微膠囊的最佳配方及最優(yōu)工藝結(jié)果如下：壁材海藻酸鈉溶

液濃度2%，芯材與壁材比例1 ∶3，保護劑含量4%，乳化劑含量6%；進風(fēng)溫度200 ℃，出風(fēng)溫度90 ℃，蠕動泵速度 70 mL/h，均質(zhì)速率16 000 r/min。所得產(chǎn)品平均粒徑為 （5.08±2.75） μm，包埋率達到75.23%。所制備的微膠囊產(chǎn)品可抵御胃酸，具有腸溶性。

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[6]項琪，寧黎麗. 口服疫苗微球化研究進展[J]. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志：2001，18（2）：4-7.

[7]陳浮，張志榮，黃園. 口服疫苗給藥系統(tǒng)的研究進展[J]. 華西藥學(xué)雜志，2007，22（1）：69-71.

[8]Shakweh M，Besnard M，Nicolas V，et al. Poly （lactide-co-glycolide） particles of different physicochemical properties and their uptake by peyers patches in mice[J]. Eur J Pharm Biopharma，2005，61（1/2）：1-13.陳愛華，姚國興，吳楊平，等. 不同地理種群紅殼色文蛤的雜種優(yōu)勢[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（1）：180-183.

1.2.3.3微膠囊體外釋放試驗按照文獻[4]中的附錄XC溶出度測定法進行試驗。稱取0.10 g微膠囊產(chǎn)品，以50 mL人工腸液作為溶出介質(zhì)，在 37 ℃ 恒溫?fù)u床150 r/min振蕩，分別于0、15、30、45、60 min吸取1 mL介質(zhì)溶液，同時補加等量的人工腸液，測定蛋白質(zhì)含量，計算釋放率。按上述方法加入人工胃液，分別在0、0.5、1.0、1.5、2.0 h時吸取溶液，同時補加等量的人工胃液，測定蛋白質(zhì)含量，計算釋放率，同時，以未包被羊大腸埃希菌的微膠囊作對照組。

1.3試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

本試驗所有數(shù)據(jù)均通過Excel 2003軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2結(jié)果與分析

2.1羊大腸埃希菌微膠囊配方和工藝正交試驗結(jié)果及分析

采用極差分析法對羊大腸埃希菌微膠囊配方和工藝正交試驗數(shù)據(jù)進行計算和分析，結(jié)果如表3、表4所示。

由表3可見，影響噴霧干燥微膠囊包埋率試驗因素的主次順序為乳化劑含量>芯材 ∶壁材>保護劑含量>壁材濃度。該指標(biāo)越大越好，因此最優(yōu)配方為：壁材濃度2%，芯材 ∶壁材1 ∶3，保護劑含量4%，乳化劑含量6%。影響微膠囊粒直徑指標(biāo)的主次順序為乳化劑含量>芯材 ∶壁材>壁材濃度>保護劑含量，該指標(biāo)越小越好，因此最佳配方為：壁材濃度2%，芯材 ∶壁材1 ∶1，保護劑含量2%，乳化劑含量4%。

2.3微膠囊包埋率

標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=20.807x-0.150 4（r2=0.992 3），計算出產(chǎn)品包埋率為75.23%。

2.4微膠囊體外釋放試驗結(jié)果

由圖4可以看出，在15 min時，人工腸液中的蛋白質(zhì)含量達到峰值，說明此時微膠囊大多數(shù)已經(jīng)崩解，暴露出菌體抗原，因而此時蛋白含量高；在15 min以后，由于膠囊已被腸液溶解，蛋白含量變化不大。

由圖5看出，在2 h內(nèi)，人工胃液中蛋白含量變化不大，說明微膠囊產(chǎn)品在2 h內(nèi)未被完全溶解，菌體蛋白沒有完全暴露。

微膠囊產(chǎn)品在人工腸液中15～30 min內(nèi)完全崩解，釋放疫苗，說明具有腸溶性；在人工胃液中2 h內(nèi)多數(shù)未被胃液消化，說明能夠耐胃酸（圖4、圖5）。

3結(jié)論與討論

通過口服疫苗進行免疫預(yù)防接種是實現(xiàn)局部黏膜免疫的主要和重要途徑，而胃腸道黏膜免疫系統(tǒng)則是口服疫苗產(chǎn)生免疫力的物質(zhì)基礎(chǔ)[5]。口服后體內(nèi)的攝取位點主要有4個，即小腸絨毛頂端、小腸內(nèi)的巨噬細胞、腸上皮細胞、派爾集合淋巴結(jié)（peyers patches，PP結(jié)）上皮。PP結(jié)分布于胃腸道，是最大的黏膜相關(guān)淋巴組織，它與腸腔僅隔一層上皮細胞，其腸黏膜誘導(dǎo)部位的特異性上皮細胞（M細胞）可攝取腸腔里的抗原物質(zhì)[6]。

有研究表明，粒徑在10 μm以下的顆粒都可被腸道PP結(jié)內(nèi)的M細胞攝取吸收，其中5～10 μm的微球滯留在該結(jié)內(nèi)釋放藥物；而小于5 μm的微球則通過PP結(jié)進入淋巴循環(huán)，說明粒徑越小，吸收越好[7-8]。例如，球蟲疫苗經(jīng)海藻酸包被后，拌料口服，有較好的效果。本試驗制得的微膠囊產(chǎn)品粒徑小且具有耐胃酸性和良好腸溶性，有利于抗原物質(zhì)在腸腔中的吸收。

本試驗最終確定以海藻酸鈉為包被材料制作羊大腸埃希菌微膠囊的最佳配方及最優(yōu)工藝結(jié)果如下：壁材海藻酸鈉溶

液濃度2%，芯材與壁材比例1 ∶3，保護劑含量4%，乳化劑含量6%；進風(fēng)溫度200 ℃，出風(fēng)溫度90 ℃，蠕動泵速度 70 mL/h，均質(zhì)速率16 000 r/min。所得產(chǎn)品平均粒徑為 （5.08±2.75） μm，包埋率達到75.23%。所制備的微膠囊產(chǎn)品可抵御胃酸，具有腸溶性。

參考文獻：

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