酶聯免疫法與電化學發光法檢測血清甲胎蛋白腫瘤標志物結果的對比分析

李勇

【摘要】 目的 對比酶聯免疫法（ELISA）與電化學發光法（ECLIA）檢測血清甲胎蛋白（AFP）腫瘤標志物的結果。方法 腫瘤科住院患者72例， 采集血清標本， 分別利用酶聯免疫法與電化學發光法對各標本中AFP水平進行檢測， 對比兩組方法所得檢測結果。結果 ELISA與ECLIA均可清楚、準確反映血清AFP水平， 且兩種檢測方法相關系數在0.99以上， 在95% CI可信區間內， 雙尾檢驗P=0.2861， 說明ELISA與ECLIA的檢測結果差異無統計學意義（P>0.05）。結論 酶聯免疫法與電化學發光法可對血清甲胎蛋白這一腫瘤標志物的水平予以準確反映， 且檢測結果無顯著差異， 可為腫瘤診斷與治療提供重要依據。

【關鍵詞】 血清甲胎蛋白；酶聯免疫法；電化學發光法；相關性

血清甲胎蛋白（AFP）是胚胎發育早期的重要血清蛋白， 通常情況下健康人血清AFP含量均低于20 ng/ml， 而當患者出現惡性腫瘤時血清AFP含量會有不同程度的升高[1]， 故而血清AFP可作為判斷原發性肝癌及肝病預后判斷的重要依據[2]。酶聯免疫法（ELISA）是甲胎蛋白經典檢測方法， 而電化學發光法（ECLIA）是新型檢測方法。為探討這兩種檢測方法在AFP檢測中的應用價值， 作者選取72例腫瘤科住院患者血清， 對ELISA、ECLIA檢測結果進行分析， 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院腫瘤科2012年3月～2014年2月收治的住院患者72例， 其中男41例， 女31例， 年齡38～68歲， 平均年齡（53.6±2.8）歲；采集血清標本72份， 其中37份血清AFP處于正常范圍內， 其余35份標本血清AFP水平比正常范圍高。

1. 2 方法 對所有患者采集3 ml靜脈血液， 離心后分離得血清， 置于-20℃環境中保存待檢。ELISA法檢測：使用鄭州安圖綠科生物工程有限公司制造的試劑盒、深圳雷杜生命科學股份有限公司制造的酶標儀展開檢測。ECLIA法檢測時， 應用Cobase-411電化學發光自動分析儀（羅氏公司提供）和配套試劑、質控品及定標液展開檢測。在檢測時均嚴格根據儀器、試劑盒相應說明書展開操作。

1. 3 統計學方法 利用統計學分析軟件SPSS16.0對相關數據展開統計學分析， 計數資料采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

使用最小二乘法（OLS）擬合直線， 以ELISA檢測結果為Y軸， 以ECLIA檢測結果為X軸， 探討兩者間相關性。擬合直線為：Y=-3.255 51+1.211 006X （-6.138 57）（103.082 6）。通過對擬合直線結果進行分析， 可知截距頂t值為-6.138 57， 比臨界值大（P<0.05）， 處于95%CI可信區間內， 且截距頂顯著。X前系數項t值103.082 6， 比臨界值大（P<0.05）， 處于95%CI可信區間內， X前系數項顯著。由此可見， X和Y之間線性關系成立， 相關系數為0.995623， 與1十分接近， 由此可見X和Y高度相關。通過分析可知， 95%CI可信區間內， 雙尾檢驗P=0.2861， 由此可見ELISA與ECLIA對于血清AFP的檢測結果差異無統計學意義（P>0.05）。

3 討論

AFP是胚胎血清主要蛋白， 為腫瘤相關性抗原， 主要是在胎兒時期由肝臟組織合成， 在胎兒娩出后其體內AFP水平會快速下降， 出生1年內AFP水平即會下降到正常范圍內， 也即血清AFP水平在20 ng/ml以下。有關統計顯示， 70%～95%的原發性肝癌患者血清AFP水平會異常升高[3]， 急性病毒性肝炎、酒精性肝硬化及畸胎等患者體內AFP水平也可輕度增高， 而轉移性肝癌患者體內AFP水平也處于較高水平， 此類患者AFP水平均不超過350～400 IU/ml。

AFP是原發性肝癌特異性極強的腫瘤標志物， 已有報道顯示， 在肝癌診斷中， AFP診斷符合率達70%～90%。現階段AFP腫瘤標志物的檢測方法主要為免疫層析法、ELISA法、放射免疫法、ECLIA等。ELISA法是AFP經典檢測方法， 操作簡便且成本較低， 在基層醫院中甲胎蛋白篩查中極為適用。同時， 這一檢查方法敏感性、穩定性及準確性較低。ECLIA是近年來新興起來的新型標記免疫分析法， 是通過將免疫測定與電化學發光方法相結合， 對甲胎蛋白水平展開檢測。ECLIA檢測迅速且結果準確， 檢測范圍較寬， 不存在放射性污染， 同時其自動化程度較高， 在腫瘤標志物檢測的應用中日益廣泛， 然而其檢測試劑及相應設備價格較為昂貴， 限制了這一檢測方法在臨床中的大范圍推廣。通過分析可知， ELISA與ECLIA在AFP腫瘤標志物檢測上各有優劣， 臨床應用中各有局限， 當應用酶聯免疫法檢測出陽性或假陽性時， 可經由電化學發光法進一步確認。本次研究通過對72例腫瘤科住院患者血清AFP的ELISA檢測結果及與ECLIA檢測結果進行對比， 可知ELISA與ECLIA均可清楚、準確反映血清AFP水平。經最小二乘法擬合直線方式檢測， 經羅氏Cobase-411電化學發光法檢測結果作為參考標準， 擬合直線于95%CI可信區間內X前系數項顯著， 由此可見X和Y線性關系顯著， 說明ELISA與ECLIA檢測結果具有相關性， 且兩種檢測方法相關系數在0.99以上， 在95%CI可信區間內， 雙尾檢驗P=0.2861， ELISA與ECLIA的檢測結果差異無統計學意義（P>0.05）。

綜上所述， 酶聯免疫法與電化學發光法可對血清甲胎蛋白這一腫瘤標志物的水平予以準確反映， 且檢測結果無顯著差異， 可為腫瘤診斷與治療提供重要依據。

參考文獻

[1] 趙琛， 李冬嚴， 張振文.多項腫瘤標志物檢測在前列腺腫瘤鑒別診斷中的意義.中國老年學雜志， 2013，33（24）：6137-6138.

[2] 竇倩， 商海濤， 葉進， 等.血清及腹水腫瘤標志物對良惡性腹水的鑒別診斷價值.華中科技大學學報（醫學版）， 2014，43（1）： 98-101.

[3] 徐焰， 陳名聲， 郝曉柯.聯合檢測血清AFU、AFP腫瘤標志物在原發性肝癌診斷中的臨床價值.重慶醫學， 2008，37（24）： 2805-2807.

[收稿日期：2014-07-02]endprint