血漿LPA、Hcy聯合檢測在下肢深靜脈血栓早期診斷中初步研究

李玉妹，張謹超，劉彥玲，謝春艷，多亞莉，李生君，董士民

(1.衡水市哈勵遜國際和平醫院 a.神經內Ⅱ科;b.重癥監護室;c.發熱門診;d.檢驗科；e.科教科,河北 衡水053000；

2.河北醫科大學第三醫院 心內科)

血漿LPA、Hcy聯合檢測在下肢深靜脈血栓早期診斷中初步研究

李玉妹1a，張謹超1b，劉彥玲1c，謝春艷1d，多亞莉1e，李生君1e，董士民2

(1.衡水市哈勵遜國際和平醫院 a.神經內Ⅱ科;b.重癥監護室;c.發熱門診;d.檢驗科；e.科教科,河北 衡水053000；

2.河北醫科大學第三醫院 心內科)

摘要：目的探討血漿溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)聯合檢測在下肢深靜脈血栓(deep venous thrombosis,DVT)早期診斷的臨床意義。方法根據《深靜脈050051斷和治療指南》診斷標準，將30例DVT患者分為DVT組，另選60例健康者作為對照組。分別測定各組血漿LPA和Hcy水平。結果①治療前DVT組血漿LPA和Hcy水平較健康對照組明顯升高(P<0.001)；②治療后DVT組血漿LPA和Hcy水平較健康對照組無顯著性差異(P>0.05)。結論LPA和Hcy是深靜脈血栓的敏感指標，兩者結合對深靜脈血栓的早期診斷及預后有著重要的臨床價值。

關鍵詞：下肢深靜脈血栓；溶血磷脂酸；同型半胱氨酸；早期診斷

(ChinJLabDiagn,2015,19:2045)

下肢深靜脈血栓(deep venous thrombosis,DVT) 在臨床上是一種發生率較高的疾病，指的是由于各種原因導致的靜脈管腔內形成的血凝塊，其典型的癥狀包括局部深處觸痛，下肢腫脹以及足背屈性疼痛等[1，2]。DVT發展最嚴重的臨床特征即是肺栓塞(pulmonary embolism,PE)，死亡率高達9-50%[3]。目前，針對DVT重在預防，其早期診斷尤為重要，然而，由于DVT在形成的早期沒有十分明顯的臨床癥狀，且僅有10-17%的DVT患者發生時伴有明顯的特征，所以經常會導致DVT被忽略甚至發生漏診[4，5]。因此，探尋敏感特異性的生物標記物，以實現下肢深靜脈血栓早期診斷及預后監測有著重要的臨床價值。

1資料與方法

1.1研究對象研究對象為2012年1月-2013年6月于我院進行治療的DVT患者，患者因不同程度的患肢疼痛及腫脹進行就診。所有的入選患者均符合2012年中華醫學會制定的《深靜脈血栓形成的診斷和治療指南》中所述的診斷標準，DVT入組標準：①經靜脈造影顯示為深靜脈內管腔阻塞或充盈缺損患者；②經彩色多普勒檢查提示為DVT患者；③患者入院前無手術外傷史，所有病例資料完整，且獲得隨訪；④既往未曾發生過下肢靜脈血栓和肺栓塞。患者排除標準：①排除具有血栓家族史的患者；②排除近期服用或正在服用多種維生素及使用抗凝藥物患者。根據以上原則，共收集下DVT患者30例(DVT組)，年齡為45-70歲，平均60.3歲。對照組為我院健康體檢者60例(對照組)，年齡為40-75歲，平均58.4歲。兩組均排除既往有明確診斷的心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、腦血管事件、卒中、血栓栓塞、肺心病以及糖尿病合并嚴重臟器功能損害的患者。

1.2樣本采集與保存患者與健康對照組均清晨采集空腹靜脈血5 ml，其中4 ml加入肝素鋰抗凝管，混勻，3 000轉離心10 min分離血漿并測定相應LPA水平。1 ml加入K2EDTA抗凝管，混勻，3 000 轉5 min離血漿測定相應Hcy水平。

1.3血漿LPA及Hcy水平檢測血漿LPA的檢測試劑自北京泰福仕科技開發公司購買，Hcy水平檢測的試劑盒由山東博邁達公司購買，按試劑的說明書進行嚴格的操作。

2結果

2.1兩組血漿LPA水平比較

治療前DVT組血漿LPA水平明顯高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.001)，而治療后DVT組血漿LPA水平較對照組無顯著性差異(P>0.05)，見表1。

表1　　治療前后DVT組與對照組血漿LPA表達

2.2DVT組與對照組血漿Hcy水平比較

治療前DVT組血漿Hcy水平明顯高于健康對照組,差異有統計學意義(P<0.001)，而治療后DVT組血漿LPA水平較對照組無顯著性差異(P>0.05)，見表2。

表2　治療前后DVT組與對照組血漿Hcy表達水平

2.3血漿LPA、Hcy檢測結果的比較

治療前DVT組與對照組比較，血漿LPA、Hcy水平均明顯升高(P<0.001)，見表1，2。以血漿LPA水平高于2.5 μmol/L為LPA陽性(LPA+)，DVT組的陽性率為86.67%。以血漿Hcy水平高于12 μmol/L為Hcy陽性(Hcy+)，DVT組的陽性率為90.00%。LPA和Hcy檢測結果比較見表3。在治療前DVT組血漿LPA、Hcy兩檢測項目呈正相關(r=0.83，P<0.05)。

表3　治療前DVT組血漿LPA、Hcy檢測結果的比較

3討論

臨床上下肢深靜脈血栓是一種多發性疾病，近年來其發病率及死亡率呈現逐漸上升的趨勢。導致DVT發生的主要因素包含高齡、惡性腫瘤、手術之后長期的固定性的臥床、神經障礙、心肺功能衰竭、遺傳及獲得性血液疾病等[6]。但是，由于DVT在形成的早期沒有十分明顯的臨床癥狀，且僅有10-17%的DVT患者發生時伴有明顯的特征，所以經常會導致DVT被忽略甚至發生漏診，這些均對于DVT患者的及時治療起了很大的阻礙作用，導致了患者的長期病痛，對于患者的日常生活能力產生了嚴重的影響[4]。

目前，還沒有能夠徹底治愈下肢深靜脈血栓的特效的治療方法，且已證實，介入治療與藥物溶栓對于DVT后遺癥無明顯療效，雖然傳統的中醫治療取得了一定療效，但是仍然缺少循證醫學的進一步驗證[7]。所以，對于DVT應該關注于其預防，所以對于早期的診斷顯得尤為關鍵[8]。據報道[9]，LPA能夠促進血管粥樣硬化的發生、發展，并對于血小板聚集以及血管痙攣有極大的促進作用，近年來，LPA和靜脈血栓栓塞癥之間的關系越來越受到大家的關注。LPA是在磷脂合成時由細胞膜產生的小分子甘油磷脂，它為一種細胞膜的脂類衍生物，LPA經過和G蛋白耦聯受體相互作用對靶細胞的生物功能產生影響，進而引起多種生物學效應的發生[10]。凝血酶激活的血小板是血液之中的LPA的主要來源，LPA發揮作用主要經過對血小板上的E始受體的激活而改變血小板的形態，聚集和活化血小板，而血小板的聚集和活化的又能夠產生新的LPA[11]。這種經過放大的正反饋表明，在血栓的形成起始過程中LPA發揮著很關鍵的調節控制作用。國內張凱等[12]的研究表明，DVT患者的LPA濃度顯著高于健康人，該結果提示LPA在血栓形成的早期就已經被釋放，它標志著血小板的活化及凝血作用的開始。本研究結果顯示，治療前DVT組的血漿LPA濃度明顯的高于健康對照組，隨著治療的進行其水平逐漸趨于正常值，該結果提示LPA是下肢深靜脈血栓形成早期的獨立風險預測因素，它的水平與DVT的發展程度密切相關，對于DVT的早期診斷、預防以及療效的監測具有重要作用，適合作為DVT的生物標記物。

近年來研究表明，Hcy的水平的上升能夠對血管內屏細胞功能產生直接或間接的損害，導致膽固醇以及脂蛋白在血管壁產生沉積，并能夠滅活血管的舒張因子NO，進而發揮動脈粥樣硬化以及血栓形成的促進作用[13]。因此，Hcy代謝異常導致的高同型半胱氨酸血癥是動脈粥樣硬化及血栓形成的一個危險因素。最近，有研究發現，高同型半胱氨酸血癥與靜脈血栓栓塞癥存在關聯[14]。國內一項流行病學研究表明，大約25%的靜脈血栓栓塞患者存在不同程度的同型半胱氨酸升高，而1/3的靜脈血栓栓塞患者存在高同型半胱氨酸血癥[15]。高瑩，呂敏等[16]的研究顯示，隨著Hcy的水平增高，發生深靜脈血栓的危險性逐漸增大。深靜脈血栓的發生率的增加直接導致肺栓塞的發病率增高。Pickett CA等[17]的研究證實，高同型半胱氨酸血癥是動脈粥樣硬化及血栓疾病的獨立危險因素。

我們的研究結果顯示，治療前DVT組血漿LPA和Hcy水平顯著高于正常對照組(P<0.001)，其中LPA陽性率為86.67%，而Hcy的陽性率為90.00%，且二者呈正相關(r=0.83，P<0.05)，該結果提示LPA和Hcy濃度可能與血栓的形成的早期事件密切相關，標志著體內血小板的激活狀態。在通過治療之后，病情逐漸緩解時，DVT組的LPA和Hcy濃度逐漸下降并逐漸接近正常值，表明LPA和Hcy可以作為DVT治療的生物標記物。即當DVT患者出現血漿LPA或Hcy濃度上升時，則提示病情可能發生了進展，需盡快實施積極的治療方案。此外，對于可能發生DVT的高危人群的進行定期檢查，若發現LPA或Hcy濃度出現上升的現象，立刻進行對癥治療，在臨床上就會有足夠的治療時間，根據血管性檢查的結果進行及時有效的干預，就可以大大地降低深靜脈栓塞事件的發生，對于DVT的早期診斷以及預后監測有著重要的作用。

總之， LPA和Hcy在DVT患者的血漿中顯著增高，經治療后二者水平趨于正常，提示血漿LPA和Hcy是DVT形成早期的敏感指標，兩者結合對深靜脈血栓的早期診斷及預后有著重要的臨床價值。

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Combined Detection of Serum Lysophosphatidic Acid and Homocysteine in the Early Diagnosis of Deep Venous ThrombosisLIYu-mei，ZHANGJin-chao,LIUYan-ling,etal.(HarrisonInternationalPeaceHospital,Hengshui053000,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the expression of serum levels of lysophosphatidic acid (LPA) and homocysteine (Hcy) in the early diagnosis of patients with deep venous thrombosis (DVT).MethodsAccording to the Standard of “deep vein thrombosis diagnosis and treatment guidelines”，30 patients with DVT were grouped as DVT group.Additionally,60 healthy individuals were included as control group.The serum level of LPA and Hcy were measured,respectively.Results① Before treatment,the serum level of LPA and Hcy were significantly higher in DVT patients than that of the control group (P<0.001);② After treatment,the serum level of LPA and Hcy in DVT patients showed no significant difference than that of the control group(P>0.05).ConclusionThe serum level of LPA and Hcy in DVT patients was significantly increased,suggesting that Combined Detection may have potential clinical value for early diagnosis and prognosis of DVT.

Key words:Deep Venous Thrombosis;Lysophosphatidic Acid;Homocysteine;Early Diagnosis

(收稿日期：2014-10-09)

作者簡介：李玉妹(1977-)，女，主管檢驗師，研究方向：神經內科。

文獻標識碼：A

中圖分類號：R543.6

文章編號：1007-4287(2015)12-2045-04

基金項目：衡水市科學技術與研究發展計劃(項目編號：13022A)