液基細胞學聯合HPV基因分型檢測在宮頸癌前病變篩查中的應用探討

李云

[摘要] 目的 探討分析液基細胞學聯合HPV（human papillomavirus 人乳頭狀瘤病毒）基因分型檢測在宮頸癌前病變篩查中的臨床應用價值。方法 抽取在2013年1月—2014年8月間該院收治的380例經液基細胞學檢查有異常的為非典型鱗狀上皮細胞及以上的患者，對這些患者進行液基細胞學聯合HPV（human papillomavirus 人乳頭狀瘤病毒）基因分型檢測，對研究結果進行回顧性對比分析。結果 檢查結果為非典型鱗狀上皮細胞及以上患者同時合并HPV 陽性患者有130例， 其中ASCUS（非典型鱗狀上皮細胞）、LSIL（低度鱗狀上皮內病變）、HSIL（高度鱗狀上皮內病變）、SCC（人鱗狀細胞癌）的所占百分比分別為78（60%）、40（30.77%）、7（5.38%）、5（3.85%）；130例患者中 HPV高危型患者有48例，AUSCS、LISL、HISL、SCCHPV高危型患者所占百分比分別為22（27.85%）、17（42.5%） 、4（57.14%） 、5（100%），研究結果顯示SCC和HPV高危型感染有直接的聯系。HPV高危型患者有48例，平均年齡43.6歲； HPV低危型患者有 82例， 平均年齡32.7歲，差異有統計學意義（P<0.05）。 結論 采用液基細胞學聯合HPV基因分型檢測能夠有效的診斷出宮頸癌病變，數據比較準確可靠，值得在臨床上推廣應用。

[關鍵詞] 液基細胞學；HPV基因分型檢測；宮頸癌；前篩查；臨床應用

[中圖分類號] R737.33 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2015）03（a）-0008-02

Discussion on the Application of Liquid Based Cytology and HPV Genotyping in the Screening of Cervical Precancerous Lesions

LI Yun

Department of Obstetrics and Gynecology， The Second Hospital of Jintan， Jintan， Jiangsu Province， 213200， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical application value of liquid based cytology combined with human papilloma virus（HPV） genotyping for the screening cervical precancerous lesions. Methods 380 cases with abnormal atypical squamous cells and more detected by liquid based cytology in our hospital from January 2013 to August 2014 were selected. HPV genotyping was performed in all the patients. And the results were analyzed comparatively and retrospectively. Results The test results showed that 130 cases with atypical squamous cells and more and positive HPV， which included 78 cases with atypical squamous cells of undetermined significance（ASCUS）， 40 cases with low-grade squamous intraepithelial lesion（LSIL）， 7 cases with high-grade squamous intraepithelial lesion（HSIL）， 5 cases with squamous cell carcinoma （SCC）， accounting for 60%， 30.77%， 5.38%， 3.85%， respectively. Of the 130 cases， 48 cases had high risk HPV， and among them， the number of patients with high risk AUSCS， LISL， HISL， SCCHPV was 22 cases， 17 cases， 4 cases， 5 cases， respectively， accounting for 27.85%， 42.5%， 57.14%， 100%， respectively， the results of the study showed that SCC was directly related to high-risk infection of HPV.There were 48 high risk HPV patients with an average age of 43.6， and 82 low risk HPV patients with an average age of 32.7， with statistically significant difference（P<0.05）. Conclusion Liquid based cytology combined with HPV genotyping can effectively diagnose the cervical cancer lesions， and the data are comparatively accurate and reliable， so it is worthy of clinical application and promotion.

[Key words] Liquid based cytology； Detection of HPV genotyping； Cervical precancerous screening； Clinical application

宮頸癌是臨床上一種比較常見的惡性腫瘤，在中老年患者中的發病率比較高，隨著人們生活習慣的改變，宮頸癌的發病率呈上升趨勢，而且發病人群中青年人數在逐年增加。宮頸癌患者的臨床癥狀主要表現為陰道接觸性出血、陰道排液、排液增多甚至繼發感染等[1]。陰道出血量因人而異，主要根據患者病灶的范圍和病情的程度而決定。導致宮頸癌的因素尚不明確，主要和早婚、早育、性生活紊亂以及包皮垢中的膽固醇經細菌作用后可轉變為致癌物質等因素有關[2]。在臨床上如何及早的診斷和治療宮頸癌一直備受關注的課題，隨著醫學技術的不斷進步和發展，宮頸癌的診斷和檢測方法也在不斷的更新，HPV是人乳頭瘤病毒，它的持續感染是造成癌前病變和宮頸癌發病的主要的致病因子。為探討分析液基細胞學聯合HPV（human papillomavirus 人乳頭狀瘤病毒）基因分型檢測在宮頸癌前病變篩查中的臨床應用價值，該院2012年1月—2014年8月間就液基細胞學聯合HPV基因分型檢測在宮頸癌前病變篩查中的臨床應用價值這個課題展開研究，取得了令人滿意的成果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取該院收治的380例經液基細胞學檢查有異常的為非典型鱗狀上皮細胞及以上的患者，患者年齡為20～75歲，平均為（41.8±3.73）歲，這些患者中排除妊娠期、子宮切除、有盆腔放射治療史、急性生殖道炎癥、患有嚴重的內外科疾病以及惡性腫瘤患者，所有患者都為自愿接受研究治療。對所有患者都進行HPV基因分型檢測。

1.2 方法

儀器和試劑：TCT儀，選自美國新柏氏公司，HPV分型基因芯片試劑盒選用深圳凱普生物技術有限公司生產的，電子陰道鏡的類型為SLC—2000B型[3]。

液基細胞學標本的采集：清洗患者外陰，用TCT取樣器在患者的宮頸和頸管部位輕輕抵住，然后按照順時針的方向旋轉8圈后，取出放入到保存液瓶內振蕩搖勻后經過一系列的規范化的處理，制成薄層的圖片，用95%的酒精固定后，HE（hematoxylin-eosin staining 伊紅）染色，中性樹膠封片[4]。

HPV檢測方法：患者在月經開始前的3 d之內不能進行陰道的沖洗和放藥治療，2 d內不能進行性生活。用取樣刷在患者的宮頸口部位按照逆時針方向轉動3圈，然后停留10 s，將取樣刷在放有細胞保存液的試管中，由專業人士進行處理和送檢[5]。

1.3 觀察指標

臨床細胞學診斷指標根據2001年TBS（宮頸細胞學）診斷標準，即在正常范圍內的、意義不明的ASCUS、低度鱗狀上皮病變、高度鱗狀上皮病變、鱗狀細胞癌，除了在正常范圍內的，其余均為陽性[6]。

HPV基因分型檢測指標：當HPV單一性的感染時，可以在模芯片的對應位置處看到一個藍色的斑點，如果存在雙重或者多重的感染，則能看到兩個或者多個有顏色的斑點[7]。

1.4 統計方法

研究中的基本的數據都采用SPSS 12.0軟件進行統計處理，計數資料進行χ2值檢驗，以率（%）表示。

2 結果

檢查結果為非典型鱗狀上皮細胞及以上患者同時合并HPV 陽性患者有130例， 其中ASCUS、LSIL、HSIL、SCC的所占百分比分別為79（60.77%） 、40（30.77%）、7（5.38%） 、5（3.85%），見表1。

130例患者中 HPV高危型患者有48例，AUSCS、LISL、HISL、SCCHPV高危型患者所占百分比分別為22（27.85%）、17（42.5%） 、4（57.14%） 、5（100%），而在非典型鱗狀上皮細胞及以上患者同時合并HPV 陽性130例患者中，SCC患者5例，全部為高危型患者，即顯示SCC和HPV高危型感染有直接的聯系。HPV高危型患者有48例，平均年齡43.6歲； HPV低危型患者有 82例， 平均年齡32.7歲，差異有統計學意義（P<0.05）。

表1 液基細胞學檢測結果情況分析

3 討論

該院對液基細胞學聯合HPV基因分型檢測在宮頸癌前篩查中的應用展開研究，研究結果顯示SCC和HPV高危型感染有直接的聯系，而且患者年齡在很大程度上和HPV感染的程度有很大的聯系。高危型HPV病毒可以從感染到癌變的全過程中被檢測出，同時能夠確定已經發生細胞形態改變者的病因；液基細胞學能檢測已經發生的細胞學改變， 可判斷是否進入臨床期，兩者協同作用，效果顯著。

宮頸癌是臨床上一種比較常見的惡性腫瘤，目前宮頸癌的發病率呈現上升的趨勢，而且年輕患者的人數也在不斷的增加，所以，對宮頸癌進行及早的篩查、診斷和治療則顯得至關重要。采用液基細胞學聯合HPV基因分型檢測對宮頸癌進行篩查的應用前景比較廣闊，HPV在目前的臨床應用中具有較高的假陰性率，作為導致宮頸癌發病的重要因素，HPV基因分型檢測的結果在一定程度上顯得至關重要，但是部分的假陰性率會對結果造成干擾，所以逐漸的在臨床中被液基細胞學檢查所代替[8]。

液基細胞學檢查是采用液基薄層細胞檢測系統檢測宮頸細胞并進行細胞學分類診斷，它是目前臨床上使用較為廣泛的一種技術，宮頸防癌細胞學檢查對宮頸癌細胞的檢出率為100%，同時還能發現部分癌前病變，微生物感染如霉菌、滴蟲、病毒和衣原體等，液基測試子宮頸細胞樣本的數量，可以明顯提高癌變細胞的檢測率，減輕患者由于擔心被二次檢測而引起的擔心。人乳頭狀瘤病毒（HPV）與宮頸癌關系密切，宮頸癌是婦女第二大致死癌病，臨床證明95%～99.7%的宮頸癌病例和高危型HPV病毒感染有關，高危型HPV導致癌病的機會較高，科學研究發現至少有20種高危型HPV與95%的早期浸潤和浸潤性子宮頸癌有關。HPV感染，特別是高危型HPV感染，與宮頸癌的發生存在明確關系。對HPV病毒感染進行準確的檢測可提高宮頸癌前病變篩查的敏感性，同時改善婦女宮頸癌的防治。宮頸癌早期癥狀不明顯，篩查預警對早期發現宮頸癌，降低死亡率極為重要。

[參考文獻]

[1] 姜清明. 液基細胞學聯合HPV基因分型檢測在宮頸癌前病變篩查中的應用[J]. 現代醫學，2011，39（1）：45-46.

[2] 宗曉亮，申艷霞，賈志霞.液基細胞學聯合HPV基因分型檢測在宮頸癌前病變篩查中的應用分析[J].現代診斷與治療，2013，24（12）：2743-2745.

[3] 潘秦鏡，李凌，郎景和. 高危型人乳頭瘤病毒雜交捕獲法II評估宮頸上皮內瘤變的臨床價值[J]. 中國醫科科學院學報，2008（3）：395-398.

[4] 郭慧英，邱華珍. 陰道鏡在宮頸上皮內瘤變篩查中的應用[J]. 醫學論壇雜志，2010，31（23）：124-125.

[5] 郭柳薇，郭豪. TCT、HPV-PCR和陰道鏡檢查在宮頸癌疾病診斷中的應用研究[J].中國婦幼保健，2013（22）：136-138.

[6] 黎哲斌，魏煥娣. TCT、HPV-PCR和陰道鏡在宮頸癌疾病診斷中的應用研究[J].分子診斷與治療雜志，2011（6）：406-409.

[7] 何偉華.TCT和陰道鏡與TCT、HPV和陰道鏡在宮頸癌篩查中應用體會[J].中外福爾健康，2011（4）：164-165.

[8] 楊曉月. 液基細胞學聯合HPV-DNA檢測在宮頸癌及癌前病變中的臨床價值[D].濟南：山東大學，2011.

（收稿日期：2014-11-25）