乳酸左氧氟沙星注射液有關物質測定的不確定度分析

乳酸左氧氟沙星注射液有關物質測定的不確定度分析

高峰1，周維利2，王維劍2，杜亮3

(1.萊蕪市食品藥品檢驗檢測中心，山東 萊蕪 271100；山東省食品藥品檢驗研究院，山東 濟南 250101；

3.濟南軍區聯勤部疾病預防控制中心，山東 濟南 250014)

摘要：目的建立乳酸左氧氟沙星注射液有關物質測定的不確定度評定方法。方法建立數學模型，對含量測定過程中各影響因素進行分析評估。結果通過計算各變量的不確定度，合成不確定度，最終得出測定結果的擴展不確定度。結論該評定方法適用于HPLC法測定乳酸左氧氟沙星注射液有關物質的不確定度評定。

關鍵詞：左氧氟沙星；有關物質；不確定度

基金項目：國家科技重大專項課題-重大新藥創制(No.2009ZX09313-023)

作者簡介：高峰，男，研究方向：食品藥品檢驗，E-mail:lwgaofeng@126.com

通訊作者：杜亮，女，研究方向：藥學,Tel:0531-81216507；E-mail:michael19790623@hotmail.com

中圖分類號：R927.1文獻標識碼：A

Evaluation of uncertainty for the related substances test of Levofloxacin Lactate Injection

GAOFeng1,ZHOUWei-li2，WANGWei-jian2，DULiang3

(1.LaiwuInstituteforFoodandDrugControl,Laiwu271100,China;2.ShandongInstitutefor

FoodandDrugControl,Jinan250101,China;3.CenterforDiseasePreventionandControl

ofJinanMilitaryCommand,Jinan250014,China)

Abstract：ObjectiveTo establish a method of uncertainty evaluation for the related substances test of Levofloxacin Lactate Injection.MethodsThe uncertainty was evaluated by an established mathematical model and the analysis of various factors affecting sample detection.ResultsEach componet of uncertainty was calculated and then the combined uncertainty was finally obtained by synthesizing the uncertainties of various component variables.ConclusionThis method was appropriate to be used in the uncertainty evaluation for the related substances test of Levofloxacin Lactate Injection.

Key words:Levofloxacin；Related substances；Uncertainty

藥品檢驗的一項重要任務就是對藥品中特定成分的賦值，所賦值的準確性和可靠性直接影響到對藥品質量的評價。因而當報告測量結果時,必須對其質量給出定量的說明,以確定測量結果的可信程度。測量不確定度就是對測量結果質量的定量表征，測量結果的可用性很大程度上取決于其不確定度的大小。所以，測量結果必須附有不確定度說明才是完整并有意義的[1]。

本文以乳酸左氧氟沙星(Levofloxacin Lactate)注射液為例，根據國家質量技術監督局批準發布的JJF1059—1999計量技術規范《測量不確定度評定與表示》[2]，并參考有關文獻[3～5]，建立其有關物質測定的不確定度評定方法，對實驗過程中各影響因素進行分析評估，最終計算得出測定結果不確定度值。

1儀器與試藥

1.1儀器Agilent 1200高效液相色譜儀(檢定證書給出不確定度0.49%，K=3);BP211D電子天平(d=0.01 mg/0.1 mg)。

1.2供試品乳酸左氧氟沙星注射液(魯抗辰欣制藥有限責任公司，批號：09051152011)；乙腈為色譜純，其他試劑為分析純；玻璃器皿均為A級。

2方法

2.1色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；己烷磺酸鈉溶液[取己烷磺酸鈉0.98 g，加磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀6.8 g，加水1 000 mL，加0.05 mol·L-1磷酸500 mL，使pH值為2.4)1 000 mL]-甲醇(3∶1)為流動相；檢測波長：293 nm ；進樣量：10 μL； 流速： 1.0 mL·min-1；柱溫：40 ℃。

2.2供試品溶液的配制精密量取本品適量，加水稀釋制成0.5 mg·mL-1的溶液。

2.3對照溶液的配制精密量取供試品溶液5 mL，置500 mL量瓶中，加水溶解稀釋至刻度。

3.1數學模型

X：有關物質含量(%);At：供試品雜質峰面積;As：對照峰面積;Vs：對照溶液稀釋倍數。

由供試品溶液的制備過程可知Vs=500 mL/5 mL=100,實驗測得As=163.61，At=16.75,則靈敏系數為：

3.2不確定度分量來源的分析 (因果圖)

圖1　不確定度的來源分析圖

3.3不確定度的量化分析各不確定度分量的計算結果見表1。

表1　相對標準不確定度一覽表

3.3.1對照溶液稀釋過程中玻璃量器引入的相對標準不確定度urel(Vs)：玻璃量器引入的相對標準不確定度urel(V)。

u(Vs) =urel(Vs)×Vs= 0.185

3.3.2對照峰面積引起的相對標準不確定度urel(As)取對照溶液連續進樣5次，計算不確定度，峰面積結果見表2。

表2　對照品溶液測定結果

高效液相色譜儀引入的相對標準不確定度為：urel(A)=檢定證書給出的不確定度/K=0.49%/3 =0.001 63(K=3)。

u(As)=urel(As)×As=0.423 75

3.3.3供試品峰面積引起的相對標準不確定度urel(At)取對照溶液連續進樣5次，計算不確定度，峰面積結果見表3。

表3　供試品溶液側定結果

高校液相色譜儀引入的相對標準不確定度為：urel(A)=檢定證書給出的不確定度/K=0.49%/3 =0.001 63 (K=3)。

u(At)=urel(At)×At=0.086 10

3.3.4合成標準不確定度供試品溶液中雜質峰面積、對照峰面積、對照溶液稀釋體積等的不確定度相互獨立，故將上述數據合成得合成相對標準不確定度u(X)為

3.4擴展不確定度計算得鹽酸左氧氟沙星注射液中有關物質的含量的測定結果X=0.10%，測量結果的合成標準不確定度u(X)=0.000 61%。按慣例，若取包含因子K=2(95%的置信區間)，得測量結果的擴展不確定度：

U=K×u(X)=0.002%

3.5測量結果的表示供試品鹽酸左氧氟沙星注射液中有關物質的含量可表示為：X=0.10%±0.002%，K=2(95%的置信區間)。

4討論

本次檢測供試品溶液的稀釋體積不參與計算，所以供試品溶液稀釋過程對測定結果的不確定度中不會產生影響，并且由于實驗方法操作過程簡單，僅一步稀釋過程，從而較少了不確定度的影響因素，因此本方法的不確定度評估值較低。

靈敏系數反映了該輸入量標準不確定度對輸出量不確定度貢獻的靈敏程度，而且標準不確定度只有乘以該靈敏系數才能構成一個不確定度分量，即和輸出量有相同的單位，因此在不確定度評定過程中靈敏系數不能被忽視。

參考文獻：

[1]粟曉黎，李冠民，金少鴻.藥品檢驗一般檢測項目不確定度評定研究-1.B類評定[J].藥物分析雜志,2005,25 (6):699-705.

[2]中國實驗室國家認可委員會.CNAL檢測與校準實驗室認可準則[S].ISO/IEC17025:2005，2005.

[3]國家質量技術監督局.測量不確定度評定與表示[S].中華人民共和國國家計量技術規范JJF1059-1999，1999.

[4]王維劍,凌霄,譚會潔.HPLC法測定中藥中摻入雙氯芬酸鈉含量的不確定度評定[J].藥物分析雜志,2009,29 (1):130-133.

[5]王維劍,楊娜，謝元超.HPLC法標定頭孢呋辛對照品含量的不確定度分析[J].藥物分析雜志,2009,29 (5):864-867.