石油烴在遼寧省水產(chǎn)品中的生物富集與分析

郭楠　羅靳　薄爾琳

摘 要：2011年6月的蓬萊19—3油田溢油事故，對(duì)渤海海洋生態(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重的污染損害。事故發(fā)生半年后，蓬萊19-3油田周邊及渤海中部海域水質(zhì)、沉積物質(zhì)量呈現(xiàn)一定程度改善，但溢油事故造成的影響仍然存在。國(guó)家海洋局發(fā)布的《海洋溢油生態(tài)損害評(píng)估技術(shù)導(dǎo)則》，將溢油導(dǎo)致?lián)p失分為海洋生態(tài)直接損失、環(huán)境修復(fù)費(fèi)、生物種群恢復(fù)費(fèi)、調(diào)查評(píng)估費(fèi)四類。2013年和2014年遼寧省海洋與漁業(yè)廳撥付“渤海溢油養(yǎng)護(hù)修復(fù)費(fèi)”完成農(nóng)業(yè)部下達(dá)的2012年蓬萊溢油生物資源養(yǎng)護(hù)修復(fù)項(xiàng)目。遼寧省水產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測(cè)局經(jīng)過兩年的時(shí)間，對(duì)六個(gè)沿海市縣的13種水產(chǎn)品，295個(gè)樣品及水和底泥中石油烴殘留量的抽樣檢測(cè)，并統(tǒng)計(jì)出不同產(chǎn)品對(duì)石油烴的富集系數(shù)。

關(guān)鍵詞：渤海；溢油；修復(fù)；石油烴；水產(chǎn)品；殘留量；富集系數(shù)

石油烴是石油中的烴類化合物的總稱，烴類即碳?xì)浠衔铮谠秃鸵缬椭姓冀^大部分，約幾百萬(wàn)種，沒有明顯的總體特征，主要由烴組成。石油烴多種低沸點(diǎn)飽和烴會(huì)破壞動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)致死亡，因?yàn)榉紵N類毒性大，具有致癌性，能粘附到魚鰓和卵上使其窒息死亡，也可以使孵化受到影響，通過水產(chǎn)品魚類和貝類的富集通過食物鏈危害到人類。通過測(cè)定生物體中石油烴的含量可以分析其對(duì)生物體的影響程度以及人為活動(dòng)所造成的污染結(jié)果。我們采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法《GB17378.6-1998海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范》中的熒光分光光度法測(cè)定海參和貝類中石油烴的含量。樣品組織經(jīng)氫氧化鈉皂化后用二氯甲烷萃取，萃取液旋蒸后殘留物用石油醚溶解，在激發(fā)波長(zhǎng)310 nm，發(fā)射波長(zhǎng)360 nm下進(jìn)行熒光分光光度法的測(cè)定。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

根據(jù)《農(nóng)業(yè)部關(guān)于下達(dá)2012年蓬萊溢油生物資源養(yǎng)護(hù)與漁業(yè)生態(tài)修復(fù)項(xiàng)目任務(wù)的通知》的要求，遼寧省海洋與漁業(yè)廳對(duì)遼寧省水產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測(cè)局下達(dá)抽檢任務(wù)，連續(xù)兩年在沿渤海城市營(yíng)口市、錦州市、丹東市、盤錦市、葫蘆島市和綏中縣六個(gè)地區(qū)抽取樣品295個(gè)。抽檢樣品種類包括貝類、海參、鮐魚、鲅魚、對(duì)蝦、小黃魚、鷹爪蝦、鮟鱇、梭魚、玉面筋、鯧魚、鯔魚12個(gè)品種，并抽取相應(yīng)的水樣及底泥，樣品采用GB17378.6-2007熒光分光光度法進(jìn)行檢測(cè)。

1.2 儀器和試劑

儀器：熒光分光光度計(jì)，日本日立F2700；

電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱：DHG-9140A，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；

分液漏斗萃取儀：北京國(guó)環(huán)高科自動(dòng)式技術(shù)研究所；

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：N1001，EYELA公司；

油標(biāo)準(zhǔn)溶液，1 000 mg/L；石油醚（沸點(diǎn)60-90 ℃），色譜純，沃凱；無水乙醇優(yōu)級(jí)純；二氯甲烷，色譜純，F(xiàn)asher；氯化鈉，分析純；氫氧化鈉，優(yōu)級(jí)純。

1.3 溶液配制

分別量取0、0.10、0.30、0.50、0.70、0.90 mL油標(biāo)準(zhǔn)使用液100 μg/mL于100 mL具塞三角瓶中和樣品一同進(jìn)行前處理制作標(biāo)準(zhǔn)曲線；氫氧化鈉6 mol/L，稱取240 g氫氧化鈉溶于水中，加水至1000 mL。

1.4 樣品制備、提取和凈化

準(zhǔn)確稱取2.000 g的樣品于100 mL具塞三角瓶中[1]，加入20 mL 的6 mol/L氫氧化鈉溶液在38 ℃烘箱中避光皂化17 h[2]，同時(shí)進(jìn)行空白樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備；皂化后加入20 mL無水乙醇溶液充分搖勻，每半個(gè)小時(shí)振搖一次。4 h后將皂化液轉(zhuǎn)入250 mL分液漏斗中，用15 mL二氯甲烷洗滌皂化瓶，洗滌液轉(zhuǎn)入分液漏斗中，依次加入30 mL飽和氯化鈉和100 mL水，分液漏斗萃取儀上萃取振蕩4 min（放氣），靜止分層2 h；把下層有機(jī)相收集到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，用15 mL二氯甲烷再萃取一次，合并有機(jī)相在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中蒸發(fā)至干。加入10.0 mL石油醚溶解殘留物；將石油醚溶解液移入1 cm石英比色皿內(nèi)，用熒光分光光度測(cè)定[1]。

1.5 光譜條件及參數(shù)

在激發(fā)波長(zhǎng)310 nm，發(fā)射波長(zhǎng)360 nm處進(jìn)行熒光分光光度測(cè)定。

2 檢測(cè)結(jié)果分析

水產(chǎn)品樣品經(jīng)過皂化、萃取、旋蒸濃縮、溶解定容和上機(jī)測(cè)定，同時(shí)進(jìn)行樣品空白和質(zhì)量控制的檢測(cè)，測(cè)得的檢測(cè)結(jié)果符合GB17378.6-2007中的要求。2013年和2014年抽檢的樣品種類和數(shù)量比例示意圖如圖1，2。

圖3 所示為2014年在營(yíng)口市、錦州市、丹東、盤錦市、葫蘆島市和綏中縣六個(gè)城市抽取的12種產(chǎn)品各自所占的數(shù)量比。檢測(cè)數(shù)據(jù)顯示，質(zhì)量控制回收率是75.2%～90.7%，重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.9%～5.7%，符合標(biāo)準(zhǔn)NY5073-2006中的要求。從圖3可以看出，貝類多數(shù)采自盤錦，海參采樣地區(qū)很廣泛，錦州樣品種類是最多的。

生物富集系數(shù)BCF是衡量環(huán)境中化和物在生物體內(nèi)富集趨勢(shì)的參數(shù)[3]，每種產(chǎn)品抽檢的樣品也相應(yīng)地抽檢了水樣和底泥進(jìn)行檢測(cè)，并計(jì)算了產(chǎn)品的富集系數(shù)，從圖4可以看出，對(duì)石油烴富集能力最強(qiáng)的是貝類和海參，蝦類的富集能力最弱。

四種產(chǎn)品中石油烴含量的統(tǒng)計(jì)分析見表1。從四種產(chǎn)品整體水平分析，石油烴含量水平出現(xiàn)頻率最高的范圍是0～5 mg/kg，其中魚類占47%，出現(xiàn)頻率最低的范圍是石油烴含量>15 mg/kg[4]。根據(jù)檢測(cè)數(shù)據(jù)顯示，檢測(cè)的4類水產(chǎn)品中石油烴含量最高的是貝類，其次是海參。

3 結(jié)語(yǔ)

隨著石油工業(yè)的發(fā)展，海水中受到石油污染的事件屢見不鮮，已經(jīng)成為海洋污染的主要原因之一[5]。根據(jù)查閱資料顯示，當(dāng)水中的石油烴含量超過20 mg/kg的時(shí)候，魚體不能存活。石油烴的親油性使得它進(jìn)入水體后吸附在懸浮顆粒上，進(jìn)而逐步沉積在海水底層，更或者在水體中呈膠體顆粒懸浮狀態(tài)存在，而濾食性生物攝入這兩種顆粒后在體內(nèi)積累成大量的有機(jī)污染物，這四類所抽檢的樣品中又以貝類富集能力最強(qiáng)，所以受到的危害也是最大的。通過食物鏈進(jìn)而威脅到人類的身體健康。

遼寧省將根據(jù)2013年和2014年的抽檢情況繼續(xù)做好2015年的抽樣檢測(cè)工作，進(jìn)一步更好地完成農(nóng)業(yè)部下達(dá)的2012年蓬萊溢油生物資源養(yǎng)護(hù)修復(fù)項(xiàng)目。

參考文獻(xiàn)：

[1] GB17378.6-2007，海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范 第6部分：生物體分析中的13 石油烴-熒光分光光度法.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008

[2] 張海燕，周德慶.熒光分光光度法測(cè)定水產(chǎn)品中石油烴的方法研究[J].海洋水產(chǎn)研究，2008，29（4）：106-111

[3] 郜紅建，蔣新.有機(jī)氯農(nóng)藥在南京市郊蔬菜中的生物富集與質(zhì)量安全[J].環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2005，25（1）：90-93

[4] GB 18421-2001，海洋生物質(zhì)量 4 海洋貝類生物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)值. 北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004

[5] 張海燕，周德慶.水產(chǎn)品中石油烴的測(cè)定及其風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估初探[D].上海：上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文：2008

（收稿日期：2015-03-09）