腦卒中患者血液感染中產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌分離率及耐藥性分析

張洪亮　楊海霞　吳　睿　趙國強

1)河南省省直第二醫(yī)院　450003　 2)河南新密市鄭州新華醫(yī)院　新密　452370　3)鄭州大學第二附屬醫(yī)院　鄭州　450014　4)鄭州大學基礎醫(yī)學院　鄭州　450001

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腦卒中患者血液感染中產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌分離率及耐藥性分析

張洪亮1)楊海霞2)吳睿3)趙國強4)

1)河南省省直第二醫(yī)院450003 2)河南新密市鄭州新華醫(yī)院新密4523703)鄭州大學第二附屬醫(yī)院鄭州4500144)鄭州大學基礎醫(yī)學院鄭州450001

【摘要】目的調(diào)查分析4 a間腦卒中住院患者血液感染中產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的分離率和對常用抗生素的耐藥率。方法細菌鑒定采用VITEK 2 Compact全自動微生物鑒定儀方法，ESBLs檢測采用篩選和確認的方法，藥敏試驗采用MIC法和K-B法。結(jié)果4 a間腦卒中住院患者血液感染中共分離肺炎克雷伯菌1 264株，產(chǎn)ESBLs的為916株，占72.47%.4個年度的產(chǎn)酶率分別為61.6%，69.7%，88.7%，92.3%.對碳青霉烯類和四代頭孢耐藥率為零，對1～3代頭孢和磺胺類幾乎全耐藥；對喹諾酮、氨基糖苷類耐藥率也較高。結(jié)論腦卒中住院患者血液感染中，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌無論是分離率還是耐藥率都是逐年上升的，正確合理的使用抗生素，對控制產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的傳播顯得尤為重要。

【關鍵詞】腦卒中；血液感染；ESBLs；肺炎克雷伯菌；耐藥性

肺炎克雷伯菌是臨床標本中的常見菌，為條件致病菌，常可引起典型的原發(fā)性肺炎，也可造成肺外感染，是醫(yī)院感染中的重要病原菌，尤其是產(chǎn)ESBLs(超廣譜β-內(nèi)酰胺酶)肺炎克雷伯菌的耐藥率越來越高[1-2]。產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌是醫(yī)院感染控制科和微生物室重要的檢測內(nèi)容[3]。為了解產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌在腦卒中住院患者血液感染中的分離率和對常用抗生素的耐藥率，并進一步對我院產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的傳播進行有效的控制提供科學依據(jù)，我們特對三家不同醫(yī)院2011—2014年的腦卒中臨床住院患者血液感染中分離的肺炎克雷伯菌的產(chǎn)酶情況及耐藥性進行了統(tǒng)計分析。現(xiàn)報告如下。

1材料與方法

1．1材料

1．1.1材料來源：收集2011—2014年河南省省直第二醫(yī)院、新密市鄭州新華醫(yī)院、鄭州大學第二附屬醫(yī)院臨床送檢血培養(yǎng)標本中分離的肺炎克雷伯菌1 264株。

1．1.2培養(yǎng)基：血平板、中國藍平板及MH平板(鄭州安圖生物有限公司)，需氧厭氧培養(yǎng)瓶(法國梅里埃生物公司)。

1．1.3藥敏紙片：AMP(氨芐西林)、AMS(氨芐西林/舒巴坦)、PIP(哌拉西林)、TZP(哌拉西林/他唑巴坦)、CZ(頭孢唑林)、CXM(頭孢呋新)、CTT(頭孢替坦)、ATM(氨曲南)、CRO(頭孢曲松)、CAZ(頭孢他啶)、CFP/SU(頭孢哌酮/舒巴坦)、FEP(頭孢吡肟)、IPM(亞胺培南)、MEM(美羅培南)、NIT(呋喃妥因)、SXT(復方新諾明)、CIP(環(huán)丙沙星)、LEV(左氧氟沙星)、GEN(慶大霉素)、AK(阿米卡星)、TOB(妥布霉素)，購自英國OXOID公司。

1．1.4儀器：Vitek 2 Compact微生物鑒定儀(法國梅里埃生物公司)

1．2方法

1．2.1菌株分離與鑒定：按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版執(zhí)行。

1．2.2ESBLs篩選試驗：將肺炎克雷伯菌進行藥敏試驗，如抗生素抑菌環(huán)直徑頭孢他啶≤22 mm，氨曲南≤27 mm；頭孢噻肟≤27 mm或頭孢曲松≤25 mm，有上述情況之一者，為產(chǎn)ESBLs可疑菌株，需要進行確認試驗[4]。

1．2.3ESBLs確認試驗：根據(jù)CLSI2012推薦的酶抑制劑增強紙片擴散試驗，將菌液配制成0.5麥氏單位，均勻涂抹MH平板。將頭孢他啶(30 μg)和頭孢他啶/克拉微酸(30 μg/10 μg)、頭孢噻肟(30 μg)和頭孢噻肟/克拉維酸(30 μg/10 μg)貼在涂有菌液的MH平板上，35℃培養(yǎng)18 h，測量抑菌環(huán)直徑，兩對紙片或一對紙片直徑相差≥5 mm即為產(chǎn)ESBLs菌株[4]。

1．2.4藥敏試驗：采用K-B紙片擴散法，將0.5麥氏單位菌液均勻涂抹在MH平板上，貼上相應的藥敏紙片，紙片中心相距約為24 mm。35℃培養(yǎng)18 h，結(jié)果按CLSI2012標準判斷[4]。

2結(jié)果

2．1產(chǎn)ESBLs分離率4 a間共分離出肺炎克雷伯菌1 264株，其中產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌為916株(72.47%)。 見表1。

2．2產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對各種抗生素耐藥率見表2。

表1　2011—2014年肺炎克雷伯菌檢出情況比較　(n)

表2　產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對各種

3討論

隨著廣譜抗生素尤其是第三代頭孢菌素的廣泛使用，臨床上腦卒中患者血液感染中檢出的產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌在不斷增多[5-6]。ESBLs可水解這些廣譜抗生素從而使其失活，同時由于細菌質(zhì)粒介導，使耐藥基因在不同細菌間相互傳遞，從而造成耐藥菌廣泛傳播[7]。

從表1中可以看出，腦卒中患者血液感染中產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌檢出率逐年上升；從表2中看出，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對同一抗生素有逐年上升趨勢，對1～3代頭孢菌素幾乎全耐藥，對喹諾酮類和氨基糖苷類耐藥率也逐漸接近100%，對四代頭孢和碳青霉烯類耐藥率為0%。 腦卒中患者血液感染中，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌分離率及耐藥率在逐年增高，應引起我們臨床診療活動時的高度重視。如我們要重點加強重點患者、重點部位和重點科室的監(jiān)管工作，其次我們要繼續(xù)做好抗菌藥物的敏感性試驗，臨床醫(yī)生也應根據(jù)藥敏試驗結(jié)果進行合理選用抗菌藥物，同時我們也要做好醫(yī)務人員手衛(wèi)生、醫(yī)院環(huán)境學監(jiān)測，從而防止多重耐藥菌和醫(yī)院內(nèi)感染的發(fā)生，有效控制產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌在醫(yī)院的傳播。

本研究中進行試驗數(shù)據(jù)采集時，未考慮腦卒中患者的病程及年齡、性別差異對腦卒中患者血液感染中產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌檢出率的潛在影響，需大樣本更詳實的分析。

4參考文獻

[1]Paterson DL，Ko WC，Von Gottberg A，et al.International prospective study of Klebsiella pneumoniae bacteremia:implications of extended-spectrum β-lactamase production in nosocomial infections[J]．Ann Intern Med，2004，140(1):26-32．

[2]Kim YK，Pai H，Lee HJ，et al.Bloodstream infections by extended-spectrum β-lactamase-producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae in children:epidemiology and clinical outcome[J]．Antimicrob Agents Chemother，2002，46(5):1 481-1 491．

[3]Steward CD，Rasheed JK，Hubert SK，et al.Characterization of clinical isolates of Klebsiella pneumoniae from 19 laboratories using the National Committee for Clinical Laboratory Standards extended-spectrum β-lactamase detection Methods[J]．J Clin Microbiol，2001，39(8):2 864-2 872．

[4]Hoban DJ，Lascols C，Nicolle LE，et al.Antimicrobial susceptibility of Enterobacteriaceae，including molecular characterization of extended-spectrum beta-lactamase-producing species，in urinary tract isolates from hospitalized patients in North America and Europe:Results from the SMART study 2009—2010[J]．Diagn Microbiol Infect Dis，2012，74(1):62-67．

[5]Subha A，Ananthan S.Extended spectrum beta lactamase (ESBL) mediated resistance to third generation cephalosporins among Klebsiella pneumoniae in Chennai[J]．Indian J Med Microbiol，2002，20(2):92-95．

[6]Rahman M，Shoma S，Rashid H，et al.Extended-spectrum β-lactamase-mediated third-generation cephalosporin resistance in Shigella isolates in Bangladesh[J]．J Antimicrob Chemother，2004，54(4):846-847．

[7]Kwak JH，Kim MY，Choi EC.A novel plasm id-mediated β-lactamase that hydrolyzes broad-spectrum cephalosporins in a clinical isolate of Klebsiella pneumoniae[J]．Arch Pharm Res，2001，24(6):590-596．

(收稿2015-05-26)

【中圖分類號】R743.3

【文獻標識碼】A

【文章編號】1673-5110(2016)14-0051-02