ELISA法檢測乙肝表面抗原結果影響因素探究

許澍妮

【摘要】 目的 探討酶聯免疫吸附法（ELISA法）檢測慢性乙型肝炎（乙肝）表面抗原中的有關影響因素。方法 231份乙肝表面抗原樣本， 采用ELISA法檢測， 針對影響檢測結果的各方面因素進行分析。結果 第一組樣本在0.5 h檢測陽性率為12.50%（11/88）， 1 h后檢測陽性率為7.95%（7/88）， 2 h后檢測陽性率為1.14%（1/88）。第二組4支試管檢測陽性率：不抗凝管為2.86%（2/70）， 枸櫞酸鈉管為0（0/70）、肝素鈉抗凝管為7.14%（5/70）、EDTA-K2管為0（0/70）。第三組樣本檢測陽性率與血細胞水平濃度由低到高依次為9.59%（7/73）、54.79%（40/73）、100.00%（73/73）。結論 采用ELISA法檢測乙肝表面抗原過程中， 其檢測結果受多方面因素影響， 為保證檢測的準確率， 需要進行重復性試驗并換用不同方式進行測定， 以保障檢測準確性。

【關鍵詞】 酶聯免疫吸附法；乙肝表面抗原；影響因素

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.33.016

采用ELISA法對乙肝表面抗原結果進行檢測為臨床最常用檢測方式， 該檢測方式具備操作簡單、靈敏度高且存在有較高特異性等方面特點， 可有效提升臨床對乙肝病癥診斷效率。而結合實際情況可知， 在采用該法檢測過程中存在有一定假陽性率[1]， 很容易對被采集者造成精神壓力。為有效保證該檢測技術準確性， 使得該檢測方案臨床價值進一步彰顯。本次本院就針對ELISA法檢測乙肝表面抗原過程中有關影響因素加以分析， 報告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料來源 收集本站2016年1～12月乙肝表面抗原樣本231份， 本組血液樣本男131例， 女100例， 年齡28～48歲， 平均年齡（31.01±1.74）歲。

1. 2 方法 采用ELISA法檢測， 所用試劑均符合臨床檢測標準， 所用設備為RT-2000i酶標儀。在檢測過程中， 各方面操作均嚴格按照規定進行， 并結合檢測情況將樣本劃分為3組。第一組：在本組待檢測樣本中隨機選取88份作為不抗凝血液樣本， 將每份樣本均分為3支試管， 分別靜止0.5、1、2 h后， 于常規離心機中進行離心處理， 轉速設定為3500 r/min，

離心時間為15 min左右， 待血清后對乙肝表面抗原進行檢測。第二組：于本組待檢測樣本中隨機抽取70份， 均分于4支試管中（不抗凝管、枸櫞酸鈉管、肝素鈉抗凝管以及EDTA-K2管）其中不抗凝管， 靜置2 h后進行離心檢測， 其他試管3 h

后去血漿檢測。第三組：以余下73份樣本（含血細胞）， 按照3個濃度（0.25×1012/L、0.125×1012/L、0.065×1012/L）梯度實施稀釋操作后再進行檢測。觀察三組樣本的檢測陽性率。

2 結果

第一組樣本在0.5 h檢測陽性率為12.50%（11/88）， 1 h后檢測陽性率為7.95%（7/88）， 2 h后檢測陽性率為1.14%（1/88）。第二組4支試管檢測陽性率：不抗凝管為2.86%（2/70）， 枸櫞酸鈉管為0（0/70）、肝素鈉抗凝管為7.14%（5/70）、EDTA-K2管為0（0/70）。第三組樣本檢測陽性率與血細胞水平濃度由低到高依次為9.59%（7/73）、54.79%（40/73）、100.00%（73/73）。

3 討論

乙肝為臨床較為常見病癥類型， 主要因乙型肝炎病毒感染而導致， 存在較高的傳染性及危害性。臨床多采用ELISA法對血液樣本進行檢測， 基于該檢測方式具備操作簡單、靈敏度高等方面特點， 在很大程度上提升了臨床對乙肝的檢出效率。而結合實際可知， 該檢測方式在運用中容易受多方面因素影響。

3. 1 不抗凝血液樣本 結合本次觀察可知， 在不同自凝時間進行檢測， 在檢測結果上存在一定差異。在實際檢測工作中， 出于多方面原因， 血液尚未開始凝固時便開始進行檢測， 很容易導致假陽性結果。主要因血清中存在有少量纖維蛋白原， 易在反應孔壁中黏附， 甚至在孔中出現凝集， 使得酶結合物在孔中被吸附所致。同時， 纖維蛋白原的反應微環境發生改變同樣會使得檢驗的靈敏度降低， 造成假陰性[2， 3]。

3. 2 加抗凝劑標本 主要因在使用抗凝劑的過程中， 其在發揮抗凝作用的同時， 會與血液中有關物質形成結合物， 起到對檢測系統中過氧化物酶顯色反應抑制或者促進的效果， 影響到檢測結果。

3. 3 保障檢測結果準確性有關對策 結合上述因素分析， 為有效保障該檢測系統在運用中的準確性， 需要對以下幾方面內容加以重視：①做好檢測前質量控制工作。在檢測前需考慮采集者是否存在黃疸、高脂血癥等， 同時更需要考慮到采集方式是否會導致溶血情況發生等。②檢測中質量控制。在正式對待檢測樣本進行檢測過程中， 檢驗醫師需要做好檢測前樣本檢測工作， 確保樣本質量符合檢測要求。同時， 各方面檢測操作均需要嚴格按照操作流程進行。同時， 為避免不同處理方式對檢測結果造成影響。針對疑似樣本， 還需要通過其他方式進一步進行檢測。必要時對脫氧核糖核酸（HBV-DNA）水平進行測定[4-7]。

結合本次分析可知， 在采用ELISA法檢測乙肝表面抗原過程中， 在多方面因素的共同作用下， 將直接影響到檢測準確性， 很容易導致假陽性結果的發生[8-10]。在使得被采集者形成巨大心理壓力的同時， 更容易誘發醫療糾紛， 不利于醫療工作的順利進行。

總之， 為使得該檢測方式的臨床綜合價值進一步得到彰顯， 實現對乙肝的有效篩查， 還需要對檢測過程中各方面細節問題加以重視， 嚴格按照操作流程實施檢測， 以保障檢測的準確性。

參考文獻

[1] 何瑞平. ELISA法檢測乙肝表面抗原結果影響因素分析. 世界最新醫學信息文摘， 2016， 16（A3）：141， 156.

[2] 龔靜. 溶血標本對乙肝表面抗原ELISA法檢測準確性的影響. 中國衛生檢驗雜志， 2013， 34（14）：2943-2944.

[3] 姜志康. ELISA法檢測乙肝表面抗原產生假陽性的臨床應用. 中國醫藥指南， 2013， 25（16）：394-395.

[4] 莊岳鵬， 莊惠萍， 吳雙， 等. 影響乙肝表面抗原檢測結果的因素及對策. 標記免疫分析與臨床， 2012， 14（6）：380-382.

[5] 王碧玉. 溶血對ELISA一步法檢測HBsAg陰性結果的影響及抗溶血因素干擾的研究. 右江民族醫學院學報， 2011， 33（5）：673-674.

[6] 謝艷玲， 甘紹軍. 臨床標本溶血對檢測乙肝表面抗原影響的探討. 中國社區醫師（醫學專業）， 2010， 12（32）：150.

[7] 陳寶輝. 標本溶血對ELISA法檢測HBsAg結果的影響分析. 求醫問藥（學術版）， 2012， 10（7）：404.

[8] 周曄， 張莉. 分析及處理用ELISA法檢測乙肝表面抗原產生“假陽性”. 實用醫技雜志， 2008， 15（28）：3866-3867.

[9] 吳麗娟. 溶血標本對ELISA檢測乙肝表面抗原的影響. 赤峰學院學報（自然版）， 2012（6）：62.

[10] 王葉芳， 密輝， 王霞. ELISA法檢測乙肝表面抗原影響因素的探討. 淮海醫藥， 2000， 18（4）：79.

[收稿日期：2017-07-14]endprint