卡培他濱聯(lián)合奧沙利鉑治療胃癌療效及對(duì)相關(guān)基因靶點(diǎn)的作用研究

姜洪勝，孫建華，吳泉峰，黃國全

（湖北省恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院胃腸外科，湖北 恩施 445300）

胃癌是嚴(yán)重威脅人類健康與生命的一種惡性消化道腫瘤，世界范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率均逐年上升[1]。胃癌的病因及發(fā)病機(jī)制尚不明確，早期胃癌的臨床癥狀并不明顯，手術(shù)后復(fù)發(fā)率較高，且易失去最佳手術(shù)時(shí)機(jī)。近年來，臨床多采取毒副作用小、有效率更高的藥物聯(lián)合化學(xué)治療（簡稱化療）胃癌[2]?？ㄅ嗨麨I和奧沙利鉑作為主要的抗腫瘤藥物，可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡和分化，參與多種途徑調(diào)節(jié)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程[3]。本研究中采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法檢測卡培他濱和奧沙利鉑聯(lián)合治療胃癌時(shí) C-MET，VEGFR2，AXL，RET基因的突變情況及靶向治療作用。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院胃腸外科2015年5月至2017年5月收治的60例胃癌患者的組織學(xué)標(biāo)本，均經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診為胃癌。其中男14例，女16例；平均發(fā)病年齡（45.37 ± 4.19）歲；平均病程（2.35 ± 0.43）年；乳頭狀腺癌12例，管狀腺癌7例，黏液腺癌3例，鱗腺癌6例，低分化腺癌2例。研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)?；颊呔栽附邮芘R床檢查，并簽署知情同意書。治療前均未進(jìn)行其他化療，患者的血檢無化療禁忌證。

1.2 治療方案

采用卡培他濱聯(lián)合奧沙利鉑連續(xù)治療2個(gè)療程：奧沙利鉑（杭州賽諾菲安萬特民生制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字J20050065，規(guī)格為每瓶50 mg）第1和8天按體表面積，1 次 135 mg/（m2·d），連續(xù)給藥 4 次為 1 個(gè)療程；卡培他濱（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H20133365，規(guī)格為每片 0.5 g）第 1 至 14 天 1000mg/m2，口服，2次/日，21 d為1個(gè)療程。

1.3 觀察指標(biāo)及療效判定標(biāo)準(zhǔn)

靶點(diǎn)基因檢測：于患者入院當(dāng)日和治療結(jié)束后次日，抽取患者空腹靜脈血4mL，血清管低溫離心3000r/10min，分離血清待測。提取血清內(nèi)DNA，并采用無分光光度法測定血清DNA的濃度和純度（德國Qagen血液DNA提取試劑盒）。采用擴(kuò)增受阻突變系統(tǒng)（amplification refractory mutation system）進(jìn)行 PCR擴(kuò)增，檢測患者血清中C-MET，VEGFR2，AXL ，RET基因在卡培他濱聯(lián)合奧沙利鉑化療后的變化。C-MET，VEGFR2，AXL，RET應(yīng)用檢測試劑盒（美國Santa生物科技有限公司）進(jìn)行檢測，參照試劑盒說明書操作。

依據(jù)實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)（RECIST）評(píng)定肺癌患者化療的臨床療效。完全緩解（complete remission，CR）：化療后腫瘤完全消失，持續(xù)超過1個(gè)月；部分緩解（partial remission，PR）：化療后腫瘤及其他病變無擴(kuò)展，腫瘤的最大直徑及最大垂直直徑的乘積縮小達(dá)50%，持續(xù)超過 1 個(gè)月；穩(wěn)定（stable disease，SD）：化療后腫瘤病變兩徑乘積縮小不超過50%，增大不超過25%，持續(xù)超過1 個(gè)月；進(jìn)展（progressive disease，PD）：化療后腫瘤病變兩徑乘積增大超過25%。以CR和PR計(jì)為有效，SD和PD計(jì)為無效。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料滿足方差齊性和正態(tài)分布，行 t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料行 χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

治療后，患者 CR 0例，PR 17例，PD 4例，SD 9例，總有效率為56.67%。患者出現(xiàn)不良反應(yīng)，包括白細(xì)胞減少 8例，血小板減少 7例，手足綜合征5例，惡心嘔吐10例，腹瀉 9例，外周神經(jīng)炎5例和肝功能異常6例。不良反應(yīng)均為Ⅰ～Ⅱ級(jí)，未影響繼續(xù)化療。治療后，患者靶點(diǎn)基因突變情況與療效見表1。

表1 患者治療后C-MET，VEGFR2，AXL，RET靶點(diǎn)基因的突變與療效

3 討論

卡培他濱是新一代口服氟尿嘧啶類化合物，口服后可被胃腸道黏膜迅速吸收及活化，直接以較高活性作用于腫瘤組織細(xì)胞內(nèi)。卡培他濱的主要選擇性靶向治療的關(guān)鍵即為經(jīng)胸腺嘧啶磷酸化酶催化5-脫氧氟尿苷(5-DFUR)轉(zhuǎn)變?yōu)?-氟尿嘧啶（5-FU）?？ㄅ嗨麨I是通過三重酶的活化反應(yīng)完成選擇性的靶向治療，且對(duì)化療不敏感的缺氧區(qū)域活性更高，毒副作用小[4]。奧沙利鉑屬第3代鉑類化合物，臨床廣泛應(yīng)用于腸道惡性腫瘤的化療，是用于阻斷腫瘤細(xì)胞周期的非特異性藥物，其主要抗癌譜和作用機(jī)制與第1代順鉑類似，主要是通過形成DNA鏈的交聯(lián)來阻斷腫瘤細(xì)胞內(nèi)DNA的合成，從而產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞毒性和抗腫瘤活性。奧沙利鉑可明顯抑制多種腫瘤細(xì)胞，能表現(xiàn)較強(qiáng)的抗腫瘤細(xì)胞活性，毒副反應(yīng)較輕，是胃腸癌聯(lián)合化療的基本藥物[5]。

C-MET是一個(gè)新的不同于已知癌基因RAS家族的轉(zhuǎn)化基因，是編碼MET受體的基因配體。研究表明，許多腫瘤患者在其腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移過程中出現(xiàn)C-MET過度表達(dá)和基因擴(kuò)增[6]。MET與HGF/SF的結(jié)合可激活下游信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，進(jìn)入細(xì)胞核影響基因表達(dá)和細(xì)胞周期進(jìn)程。血管內(nèi)皮生長因子VEGF（vascular endothelial growth factor，VEGF）是血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性的肝素結(jié)合生長因子，可在體內(nèi)誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，具有促進(jìn)血管新生再生、維持血管內(nèi)皮完整性、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲等功能[7]。Axl（anexelekto）基因的異常表達(dá)可參與誘導(dǎo)多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程，包括抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和抗凋亡、調(diào)節(jié)腫瘤黏附、遷移與識(shí)別等過程，是受體酪氨酸激酶亞家族成員之一，同時(shí)Axl還可調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷徙及存活，參與腫瘤性血管生成[8-9]。RET基因位于10號(hào)染色體的長臂上，編碼1個(gè)受體酪氨酸激酶。在正常的神經(jīng)元、交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)節(jié)和泌尿生殖道細(xì)胞、睪丸生殖細(xì)胞中都有表達(dá)。RET蛋白活化后會(huì)激活下游的信號(hào)通路（包含 RAS，MAPK，ERK，PI3K，AKT 等），導(dǎo)致細(xì)胞增殖、遷移和分化。RET基因的激活突變與人的惡性腫瘤相關(guān)[10]。

本研究結(jié)果表明，給予胃癌患者卡培他濱和奧沙利鉑聯(lián)合化療雖有療效，但會(huì)出現(xiàn)白細(xì)胞減少、血小板減少、手足綜合征、惡心嘔吐、外周神經(jīng)炎及肝功能異常等不良反應(yīng)，多為患者血液學(xué)毒性、周圍神經(jīng)感覺障礙和消化道不良反應(yīng)等，不良反應(yīng)均為臨床Ⅰ～Ⅱ級(jí)，給予其對(duì)癥處理后臨床癥狀好轉(zhuǎn)，未影響卡培他濱聯(lián)合奧沙利鉑的繼續(xù)化療，具有臨床癥狀和體征可逆性，是限制劑量提高的主要因素，但停藥后可恢復(fù)。同時(shí)，卡培他濱聯(lián)合奧沙利鉑可有效針對(duì)患者體內(nèi)特異性靶點(diǎn)C-MET，VEGFR2，AXL，RET進(jìn)行靶向治療。

綜上所述，卡培他濱聯(lián)合奧沙利鉑針對(duì)胃癌具有一定的臨床治療意義，且可有效針對(duì)患者體內(nèi)靶點(diǎn)進(jìn)行誘導(dǎo)和治療，為臨床治療胃癌的靶向研究提供了線索。

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