通州地區3～6歲兒童反復呼吸道感染病原菌分布及免疫監測結果分析

劉偉　吳鴻波

[摘要] 目的 分析通州地區3～6歲兒童反復呼吸道感染病原菌分布及免疫監測結果。 方法 選取2015年3月～2017年7月首都醫科大學附屬北京潞河醫院（以下簡稱“我院”）收治的135例反復呼吸道感染患兒作為觀察組，提取患兒分泌物樣本并進行病原菌培養及鑒定，分析病原菌分布情況。另選同期在我院進行體檢的健康兒童87名作為對照組。比較兩組體液免疫指標、細胞免疫指標、炎性細胞因子水平。 結果 觀察組患兒共檢出94株病原菌，革蘭陽性菌占27.66%，革蘭陰性菌占72.34%，革蘭陽性菌的檢出率顯著低于革蘭陰性菌（P < 0.01）；兩組免疫球蛋白A（IgA）、C4比較，差異無統計學意義（P > 0.05），觀察組免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、C3顯著低于對照組（P < 0.01）；兩組CD4+比較差異無統計學意義（P > 0.05），觀察組CD3+、CD4+/CD8+顯著低于對照組，CD8+顯著高于對照組（P < 0.01）；觀察組白細胞介素-4（IL-4）、IL-6、IL-10顯著高于對照組，IL-12顯著低于對照組（P < 0.01）。 結論 3～6歲反復呼吸道感染患兒的免疫功能低下，革蘭陰性菌是主要的感染病原菌，可根據病原菌以及免疫功能檢測結果，選擇適當抗菌藥物或免疫增強劑治療患兒，改善預后。

[關鍵詞] 反復呼吸道感染；病原菌；體液免疫；細胞免疫；炎性細胞因子

[中圖分類號] R725.7 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2018）11（b）-0084-04

[Abstract] Objective To analyze the pathogen distribution and immunological monitoring results of recurrent respiratory infection in 3-6 years old children in Tongzhou District. Methods A total of 135 children with recurrent respiratory infection admitted to Beijing Luhe Hospital， Capital Medical University （"our hospital" for short） from March 2015 to July 2017 were selected as the observation group， the samples of children′s secretions were extracted and pathogenic bacteria were cultured and identified， and the distribution of pathogenic bacteria was analyzed， another 87 healthy children carried physical examination in our hospital in the same period were selected as control group， the humoral immunity index， cellular immunity index and inflammatory cytokine level were compared between the two groups. Results Ninety-four pathogenic bacteria were detected in the observation group， Gram-positive bacteria accounted for 27.66%， Gram-negative bacteria accounted for 72.34%， detection rate of Gram-positive bacteria was significantly lower than that of Gram-negative bacteria（P < 0.01）； there was no significant difference in immunoglobulin A （IgA） and C4 between the two groups （P > 0.05）， the immunoglobulin M （IgM）， immunoglobulin G （IgG） and C3 in observation group were significantly lower than those in control group （P < 0.01）； there was no significant difference in CD4+ between the two groups （P > 0.05）， the CD3+ and CD4+/CD8+ in observation group were significantly lower than those in control group， and the CD8+ was significantly higher than control group （P < 0.01）； the interleukin-4 （IL-4）， IL-6 and IL-10 in the observation group were significantly higher than those in the control group， the IL-12 was significantly lower than the control group （P < 0.01）. Conclusion 3-6 years old children with recurrent respiratory tract infection have low immunologic function， Gram-negative bacteria are the main pathogens of infection， according to the detection results of pathogenic bacteria and immunologic function， appropriate antibiotics or immunologic enhancers should be selected to treat the children and improve their prognosis.

[Key words] Recurrent respiratory infection； Pathogenic bacteria； Humoral immunity； Cellular immunity； Inflammatory cytokine

反復呼吸道感染作為兒科常見的疾病，是指在1年內發生7次以上的上、下呼吸道感染，具有較高發病率。因3～6歲兒童的機體免疫功能較差，感染率較高。該病臨床癥狀主要表現為食欲不振、體重不增、面色偏黃等，若未得到有效救治，甚至可引發心肌炎、哮喘等疾病，將嚴重影響患兒的發育與健康[1-2]。當前臨床多應用藥物治療，但是易反復發作，而長期服藥易產生耐藥性，整體抗感染效果不佳。本研究對反復呼吸道感染患兒病原菌進行檢測，并與健康兒童的免疫功能進行比較，為臨床治療作指導，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年3月～2017年7月于首都醫科大學附屬北京潞河醫院（以下簡稱“我院”）收治的135例反復呼吸道感染患兒作為本次研究的觀察組。納入標準：①符合反復呼吸道感染的診斷標準[3]；②1年感染次數≥7次；③經我院醫學倫理委員會同意，患兒及家屬簽訂知情同意書。排除標準：①合并心、肝、腎等其他嚴重疾病患兒；②免疫系統疾病患兒；③兩次呼吸道感染時間間隔≤1周患兒；④營養不良、貧血、變應性疾病等導致呼吸道感染疾病患兒；⑤精神疾病患兒。觀察組男74例，女61例；年齡3～6歲，平均（4.83±0.62）歲。另選同期在我院進行體檢的87名健康兒童作為對照組，男53名，女34名；年齡3～6歲，平均（4.75±0.69）歲。兩組性別、年齡等基本資料比較，差異無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 觀察指標

①分析觀察組患兒的病原菌分布情況，患兒入院后，將上呼吸道感染患兒的鼻咽分泌物樣本以及下呼吸道感染患兒的下呼吸道感染分泌物樣本送至檢驗科檢驗，立即進行病原菌培養及鑒定。②對比兩組體液免疫指標，檢測當日空腹抽取靜脈血，采用日立全自動生化分析儀以及配套試劑盒，并應用免疫比濁法檢測免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、C3、C4。③對比兩組細胞免疫指標，使用流式細胞儀檢測CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+。④對比兩組炎性細胞因子水平，采用酶聯免疫吸附法檢測血清白細胞介素-4（IL-4）、IL-6、IL-10、IL-12。

1.3 統計學方法

采用SPSS 18.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病原菌分布情況

135例患兒共檢出94株病原菌，其中革蘭陽性菌26例，占27.66%，革蘭陰性菌68例，占72.34%，革蘭陽性菌檢出率顯著低于革蘭陰性菌，差異有高度統計學意義（χ2=35.766，P < 0.01）。見表1。

2.2 兩組體液免疫指標比較

兩組IgA、C4比較差異無統計學意義（P > 0.05）；觀察組IgM、IgG、C3顯著低于對照組，差異有高度統計學意義（P < 0.01）。見表2。

2.3 兩組細胞免疫指標比較

兩組CD4+比較差異無統計學意義（P > 0.05）；觀察組CD3+、CD4+/CD8+顯著低于對照組，CD8+顯著高于對照組，差異有高度統計學意義（P < 0.01）。見表3。

2.4 兩組炎性細胞因子水平比較

觀察組IL-4、IL-6、IL-10顯著高于對照組，IL-12顯著低于對照組，差異有高度統計學意義（P < 0.01）。見表4。

3 討論

反復呼吸道感染是一種以反復發作為主要特征的常見疾病，目前關于其確切發病機制尚不清楚，臨床認為機體免疫力低下、缺乏維生素、遺傳等多種因素綜合作用可導致反復呼吸道感染發生，年齡越小，該病發生率相對也越高[4-5]。反復呼吸道感染可致使患兒食欲不振，難以保證攝取足量營養，進而使體重下降，生長發育受阻，為防止患兒健康狀態受到嚴重影響，臨床應對患兒采取措施以控制。基于此，臨床對病原菌進行詳細了解可提高用藥安全性，達到較好治療效果[6]。但是，不同區域、不同年齡的病原菌分布狀況存在差異性，故對本地區3～6歲反復呼吸道感染患兒的病原菌分布以及免疫功能進行檢測具有重要意義，為臨床用藥提供指導。

薛繼紅[7]研究顯示，因患兒自身免疫系統功能發育不成熟，銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌等多種致病菌均可誘發反復呼吸道感染，而不同致病菌所采用抗感染治療有所差異。對此，治療前進行病原學檢測可為合理使用抗菌藥物提供可靠依據，進而避免抗菌藥物濫用，提高臨床治療效果，還可減輕患兒家庭的經濟負擔[8-9]。本研究結果顯示，135例患兒共檢出94株病原菌，其中革蘭陽性菌占27.66%，革蘭陰性菌占72.34%，革蘭陰性菌是反復呼吸道感染主要的感染病原菌，革蘭陽性菌以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎鏈球菌為主，革蘭陰性菌以流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌為主，該結果與汪玲娟等[10]研究結果相一致，表明感染逐漸增多與臨床大量使用廣譜抗生素有關，呼吸道感染次數增多，細菌耐藥性也會隨著增加，因此，兒童作為易受感染群體，應采取有效治療措施，預防細菌耐藥性發生，并降低所致不良反應。

在進行病原菌檢驗分析過程中，可能會出現新的病原菌感染，易使臨床治療方案未及時調整，治療效果不理想。相關臨床研究顯示，免疫功能降低是導致反復呼吸道感染發作的重要原因之一，可根據免疫學結果實施免疫治療措施，便于對治療方案進行調整以控制病情發展[11]。體液免疫主要是由天然抗體、干擾素等共同作用完成，其中IgA是在新生兒出生6個月左右后血中出現，12歲時達高峰，IgM主要存在血管中，可以通過激活補體殺死病毒等細胞內微生物，具有重要免疫防御作用，抗體產生時間較早，但維持時間較短，IgG的抗體分子量較小，可通過胎盤輸給胎兒，產生時間較晚，于學齡時才能達至成人水平。補體作為存在血清以及組織液中經活化后的蛋白酶，起輔助、補充特異性抗體作用，并介導免疫溶菌、溶血，其中C3是血清中含量最高的補體成分，多由肝臟與巨噬細胞合成，C4是一種多功能β1-球蛋白，C3、C4激活后使微生物與巨噬細胞相黏附，進而殺傷與吞噬微生物[12]。因此，對兩組體液免疫指標進行檢測，結果顯示兩組IgA、C4比較差異無統計學意義（P > 0.05），觀察組IgM、IgG、C3顯著低于對照組，與金偉等[13]的研究結果一致，充分說明反復呼吸道感染患兒體液免疫異常，其免疫功能較健康兒童低，而反復感染使患兒免疫力進一步降低，使疾病反復發作。

T淋巴細胞亞群具有調節免疫系統功能作用，可抵抗病毒，但免疫失衡，可引發疾病，并而體液免疫發生異常主要是因T細胞和細胞因子調節功能發生異常導致。CD3+作為成熟的T淋巴細胞，若出現降低趨勢，則表明細胞免疫功能減弱，機體易受感染，是反映人體細胞免疫功能的主要指標之一。CD4+是調控機體免疫反應的重要樞紐細胞，水平降低不利于對微生物進行清除，CD8+是免疫反應中直接殺傷性細胞，CD8+水平升高時可導致嚴重免疫缺陷，所以CD4+/CD8+作為反映免疫功能紊亂的敏感指標，其水平降低表明患者處于免疫抑制狀態，進而引發反復呼吸道感染[14-17]。本研結果顯示，兩組CD4+比較差異無統計學意義（P > 0.05），觀察組CD3+、CD4+/CD8+顯著低于對照組，CD8+顯著高于對照組，差異有高度統計學意義（P < 0.05），本結果與王萍等[18]的研究一致，說明因呼吸道反復感染降低機體抵御病原菌能力，所有結果均提示反復呼吸道感染患兒的細胞免疫功能發生紊亂。

本研究還對炎性細胞因子水平進行檢測，結果顯示，觀察組IL-4、IL-6、IL-10顯著高于對照組，IL-12顯著低于對照組，本項研究結果與陳小燕、王雯君等[19-20]的報道基本一致。IL-4、IL-6、IL-10以及IL-12為小分子多肽類物質，與疾病發展狀況密切相關，參與機體免疫反應以及炎癥等病理過程，當患兒感染病原菌后，激活相關免疫細胞，導致IL-4、IL-6、IL-10水平明顯增加，IL-12有所降低，從而使患兒免疫力低下，對此應及時服用免疫增強劑，提高免疫功能，快速緩解臨床癥狀[21-22]。

綜上所述，3～6歲反復呼吸道感染患兒的免疫功能低下，易使呼吸道反復發生感染，并且革蘭陰性菌是主要的感染病原菌，臨床可根據病原菌檢測結果以及免疫功能檢測結果，選擇適當的抗菌藥物或免疫增強劑，并動態檢測以及時調整用藥方案，及時控制感染，提高治療效果。但筆者所納入樣本量較少并僅為本地區研究，存在一定局限性，故本研究結論需謹慎接受，后期應在擴大樣本量基礎上進一步研究以提高準確性。

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（收稿日期：2018-05-01 本文編輯：任 念）