桔皮苷色譜條件改進探討

孫麗麗 于濤

摘要：本文探索了高效液相色譜法檢測桔皮苷含量的色譜條件，通過對桔皮苷溶液紫外光譜的掃描結果，設定不同波長進行比對，并篩選出適合的波長;通過測定桔皮浸膏和桔紅顆粒中桔皮苷含量，驗證色譜條件的改進效果，為開展進一步分析提供理論依據。

關鍵詞：紫外光譜;桔皮苷;實驗研究

中圖分類號：S816.2 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼： ?A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2019.24.035

桔皮苷，即維生素P黃酮類化合物之一，主要存在于柑橘屬果實中，尤其是柑、橘、甜橙和檸檬等的果皮中含量較多。分離提取的桔皮苷精制品為白色粉末，微小針狀晶體。桔皮苷能防治高血壓、糖尿病、痔瘡、壞血病等，同時具有抗菌、消炎、止痛等作用，其在醫學、食品、化妝和運動營養等領域具有廣泛的應用前景。

1材料與方法

1.1 樣品準備

桔皮苷標準品，橘紅顆粒，橘皮浸膏提取物。

1.2 主要試劑及儀器

流動相：甲醇、醋酸、水，色譜柱C18，島津紫外檢測器，普析TU-1901型紫外分光光度計。

1.3 樣品處理

1.3.1 標準品溶液的制備 稱取105℃干燥至恒重的桔皮苷標準品1.0000mg，置于100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，移取1.50ml，置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻得標準品溶液。

1.3.2 樣品溶液的制備 取橘紅顆粒（橘皮浸膏提取物），研成粉末，稱取樣品3.0000g，加甲醇15ml，超聲處理15min，抽濾，反復提取5次，合并濾液，用少量甲醇分次洗滌容器，洗液濾入同一容量瓶中，加甲醇至50.00ml作為供試品溶液;移取出橘紅顆粒（橘皮浸膏提取物）其他樣品各5.00ml，各置于10ml容量瓶中，用80%甲醇稀釋至刻度。

1.4 色譜條件

采用色譜柱C18（5μm， 150mm）;流速1mL/min;柱溫40℃;采用島津LC-15C色譜工作站;進樣量20μL。

1.5 實驗方法

用紫外分光光度計測量桔皮苷的最大吸收波長：稱取已干燥的桔皮苷標準品1.0mg，用甲醇溶解到100.00ml，移取5.00ml，置于50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，在波長200～300nm范圍內進行掃描。

2 實驗結果

通過掃描紫外光譜可得出桔皮苷在波長283nm處有最大吸收峰。

2.1 流動相不同配比下，檢測桔皮苷標準品

在波長為283nm，流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下進行檢測，保留時間11.167min，峰面積：7938673.3。

在波長283nm，流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下進行檢測，保留時間7.533min，峰面積：7760178.6。

在波長為283nm，流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下進行檢測，保留時間5.883min，峰面積：8144820.3。

在波長為283nm，流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=50∶2∶50下進行檢測，保留時間3.150min，峰面積：7412637.5。

通過流動相不同配比下檢測桔皮苷標準品，可得在流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下，保留時間最合理，吸收峰強度最大，而當流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=50∶2∶50時，3分鐘之內的色譜峰多為溶劑峰，故無參考價值。

2.2 流動相不同配比下，檢測橘紅顆粒

在波長為283nm，流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下進行檢測，保留時間11.200min，峰面積：3001994.5。

在波長283nm，流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下進行檢測，保留時間7.217min，峰面積：3351890.7。

在波長為283nm，流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下進行檢測，保留時間6.117min，峰面積：2912005.2。

通過流動相不同配比下檢測橘紅顆粒，可得在流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下，保留時間最合理，吸收峰強度最大，色譜條件改進效果較好。

2.3 流動相不同配比下，檢測橘皮浸膏提取物

在波長為283nm，流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下進行檢測，保留時間12.883min，峰面積：1848281.8。

在波長283nm，流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下進行檢測，保留時間7.650min，峰面積：13514011.2。

在波長為283nm，流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下進行檢測，保留時間5.967min，峰面積：12657397.5。

通過流動相不同配比下檢測橘皮浸膏提取物，可得在流動相配比為甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下，保留時間最合理，吸收峰強度最大，色譜條件改進效果較好。

3 結論

本實驗通過檢測桔皮苷標準品篩選得到最適波長和最適流動相配比，并通過檢測橘紅顆粒和橘皮浸膏中桔皮苷的含量，進一步驗證了色譜條件改進效果，測定結果穩定，有良好的重復性，為開展后續的分析提供理論依據。

參考文獻

[1]林一星.HPLC法測定止咳橘紅顆粒中柚皮苷的含量[J].中國熱帶醫學，2005，21：645-687.

[2]蔡梅超.HPLC測定橘紅顆粒中柚皮苷的含量[J].化工時刊，2012，31：635-637.

[3]歐仕益.桔皮苷的藥理作用[J].中藥材，2002，21：521-545.

作者簡介：孫麗麗，碩士，助教，研究方向：生物科學。