不同采收期紫蘇梗中迷迭香酸的含量測(cè)定

王勝升　劉佳隴　李虹

摘要為測(cè)定不同時(shí)期采收的紫蘇梗中迷迭香酸的含量，確定最佳采收期，采用HPLC法測(cè)定迷迭香酸的含量（色譜柱為Hypersil-C18（250mmx4.6mm，5μm）;流動(dòng)相為甲醇-0.1%甲酸水溶液（38：62）;流速為1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為330nm;柱溫為25C）。結(jié)果表明，河南夏邑移栽紫蘇（雙面紫葉和單面紫葉）紫蘇梗中迷迭香酸含量從7月底開(kāi)始上升并于8月9日達(dá)到最高，隨后降低，在9月13-28日期間有一個(gè)較高含量穩(wěn)定期;河南虞城直播紫蘇（雙面紫葉和單面紫葉）紫蘇梗中迷迭香酸含量從8月9日開(kāi)始緩慢上升，并與夏邑移栽紫蘇一同在9月13-28日有較高的穩(wěn)定期。因此，河南夏邑移栽紫蘇最佳采收期為8月9日前后;河南虞城地區(qū)紫蘇梗的最佳采收期為9月中下旬，這個(gè)時(shí)間也是河南夏邑移栽紫蘇的適宜采收期。

關(guān)鍵詞 紫蘇梗;中藥材;采收期分析;迷迭香酸;高效液相色譜

中圖分類號(hào) TS255.1

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 1007-5739（2019）07-0196-02

紫蘇（Perilla.frutescens（L.）Britt），唇形科紫蘇屬一年生直立草本植物，莖高0.3～2.0m，綠色或紫色，鈍四棱形，具四槽，密被長(zhǎng)柔毛;葉闊卵形或圓形，長(zhǎng)7～13cm，寬4.5～10.0cm，先端短尖或突尖，基部圓形或闊楔形，邊緣在基部以上有粗鋸齒，膜質(zhì)或草質(zhì)，兩面綠色或紫色，或僅下面紫色，上面被疏柔毛，下面被貼生柔毛;唇形花冠白色至紫紅色，花盤(pán)前方呈指狀膨大;小堅(jiān)果近球形，灰褐色，直徑約1.5mm，具網(wǎng)紋?；ㄆ?-11月，果期8-12腫。

紫蘇屬植物1種4變種，4個(gè)變種分別為白蘇（Perilla?frutescens?var.frutescens）、紫蘇（Perilla?frutescens?var.?arguta）、回回蘇（Perilla?frutescens?var.?crispa）和野生紫蘇（Perilla?frutescens?var.?purpurascens）2。

紫蘇梗（Caulis?perillae），又稱蘇梗，為唇形科植物紫蘇（Perilla.?frutescens（L.）Britt.）的干燥莖3。7-8月采割，鮮品除去根切成2cm厚斜片，曬千。斜片呈長(zhǎng)方形，木部黃白色，射線細(xì)密，呈放射狀，髓部白色，疏松或脫落。氣微香，味淡。

紫蘇含有多種化學(xué)成分，主要包含紫蘇醛、檸檬烯、β一丁香烯、烷烴類、酯類及多環(huán)雜烯類等揮發(fā)油類化合物15-，芹黃素和木犀草素等黃酮類及其苷類化合物8。此外，紫蘇中還含有齊墩果酸、烏索酸和熊果酸，阿魏酸、咖啡酸及其酯類衍生物、迷迭香酸、迷迭香酸甲酯、丁香酚、脂肪酸以及甾醇類等成分。

紫蘇梗為我國(guó)傳統(tǒng)的中藥，性辛、溫，歸肺、脾經(jīng);可理氣寬中，止痛，安胎;用于治療胸膈痞悶、胃脘疼痛、噯氣嘔吐胎動(dòng)不安）;可用于方劑，治療小兒咳嗽（風(fēng)寒犯肺證）"肝胃不和之胃痞證2、慢性淺表性胃炎3]。紫蘇梗中含有迷迭香酸、揮發(fā)油、紫蘇醛、左旋檸檬烯等成分14-1，具有擴(kuò)張皮膚血管、刺激汗腺分泌而解熱、抗過(guò)敏、降血糖等作用16191。

筆者在長(zhǎng)期的生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)，紫蘇梗的采收時(shí)間對(duì)其有效成分迷迭香酸的含量影響很大。為確定紫蘇梗的適宜采收期，本文以迷迭香酸含量為指標(biāo)，依據(jù)2015版《中國(guó)藥典》，采用高效液相色譜法測(cè)定不同時(shí)期采收的紫蘇梗中迷迭香酸的含量，為確定其最佳采收期提供參考，用以指導(dǎo)生產(chǎn)中最佳的紫蘇梗采收期。

1材料與方法

1.1儀器與藥品

普析L600-2高效液相色譜儀，普析L600-UV紫外檢測(cè)器，LCWIN2.0色譜工作站;SHIMADZU?AUW220D型（Max=220g/82g，Min=1mg）和雙杰JJ500型（max=500g，d=0.01g）電子天平;天津奧特賽恩斯AS5150型超聲波清洗儀;迷迭香酸對(duì)照品采購(gòu)于北京益爾康樂(lè)生物科技有限公司（批號(hào)：111871-201706，供含量測(cè)定用）;甲醇為色譜純，甲酸為分析純，丙酮為色譜純，水為重蒸水。

1.2測(cè)定方法

1.2.1樣品采集與處理。試驗(yàn)檢測(cè)用紫蘇梗采自河南省商丘市夏邑縣移栽紫蘇和虞城縣直播紫蘇（雙面紫和單面紫）。

在紫蘇生長(zhǎng)期內(nèi)，分別從夏邑縣和虞城縣2個(gè)紫蘇種植基地采樣，從7月19日開(kāi)始，每隔10d左右采1次樣（分別為7月19日、7月29日、8月9日、8月18日、8月28日、9月10日、9月17日、9月28日、10月09日、10月17日），共10次，每次分別隨機(jī)采挖單面紫雙面紫2個(gè)類型各3株，總共38份樣（虞城采樣時(shí)間持續(xù)到10月9日）。所采樣品均采用陰干、紫蘇梗全株混合打粉處理。

1.2.2對(duì)照品溶液制備。精密稱取迷迭香酸對(duì)照品10mg，置25mL容量瓶中，加60%丙酮至刻度，搖勻，精密量取5mL，置50mL量瓶中，加60%丙酮至刻度，搖勻，配制成濃度為40μg/mL的對(duì)照品溶液，避光冷藏。

1.2.3供試品溶液制備。參照2015版《中國(guó)藥典》間的提取方法進(jìn)行。每份樣品，取樣品粉末（過(guò)3號(hào)篩）約0.5g，精密稱定，分別置于具塞錐形瓶中（準(zhǔn)確編號(hào)），精密加入60%丙酮25mL，密塞，稱定重量，超聲處理（250W，40kHz）30min，再稱定重量，用60%丙酮補(bǔ)足減失的重量，搖勻，0.2μm微孔濾膜過(guò)濾，續(xù)取濾液，置于進(jìn)樣瓶中即可。

1.2.4色譜條件。參照2015版《中國(guó)藥典》第四部（通則0512）高效液相色譜法201，并經(jīng)試驗(yàn)確定色譜條件。色譜柱為Hypersil-C18（250mmx4.6mm，5μm）;流動(dòng)相為甲醇-0.1%甲酸水溶液（38：62）;流速為1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為330nm;柱溫為25C。理論塔板數(shù)以迷迭香酸計(jì)算不低于3000。1.2.5樣品含量測(cè)定。按“1.2.3”方法制備供試品溶液，分別進(jìn)樣10μL;精密吸取40μg/mL對(duì)照品溶液10μL進(jìn)樣3次。計(jì)算公式如下：

含量（%）=_AxxCrx25x100%

ArxMxx10°x（1-N）

其中，Ax為供試品的峰面積;Ar為對(duì)照品的峰面積;Cr為對(duì)照品溶液的濃度（μg/mL）;Mx為供試品取樣量（g）;N為樣品含水量（%）計(jì)算得樣品含量。

2結(jié)果與分析

根據(jù)已有的方法學(xué)結(jié)果20，本試驗(yàn)的線性關(guān)系、精密度、重復(fù)性穩(wěn)定性、回收率等均符合試驗(yàn)的要求。從表1可以看出，紫蘇在整個(gè)生長(zhǎng)期內(nèi)，紫蘇梗中迷迭香酸含量變化較大，大體趨勢(shì)為先增后減。夏邑移栽紫蘇（雙面紫葉和單面紫葉）紫蘇梗中迷迭香酸含量從7月底開(kāi)始上升并于8月9日達(dá)到最高，達(dá)到0.8%左右，隨后降低，在9月13-28日期間有一個(gè)較高含量的穩(wěn)定期，穩(wěn)定期迷迭香酸含量為0.2%～0.24%;虞城直播紫蘇（雙面紫葉和單面紫葉）紫蘇梗中迷迭香酸含量從8月9日開(kāi)始緩慢上升，與夏邑移栽紫蘇一同在9月13-28日有較高的穩(wěn)定期，穩(wěn)定期迷迭香酸含量為0.14%～0.23%，均高于藥典標(biāo)準(zhǔn)。

3結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，夏邑移栽紫蘇在8月9日左右迷迭香酸含量最高，遠(yuǎn)高于藥典標(biāo)準(zhǔn)數(shù)倍，且黃亮輝等叫研究結(jié)論表明，此時(shí)也為紫蘇葉的最佳采收期。因此，8月9日前后是夏邑地區(qū)移栽紫蘇的最佳采收期。

河南夏邑和虞城地區(qū)9月10-28日采收紫蘇梗迷迭香酸含量穩(wěn)定，高于藥典標(biāo)準(zhǔn)，且此時(shí)產(chǎn)量較高，為適宜采收期。

單面紫葉和雙面紫葉紫蘇梗中迷迭香酸的含量差別不大，且兩者均為藥典收錄正品紫蘇?；粗参?，因而在生產(chǎn)中，用作紫蘇梗采收的紫蘇種植可以不考慮單面紫葉與雙面紫葉的品種差別。

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