BECKMAN PK7300全自動血型檢測系統可疑及錯誤結果的原因分析

陳潔

[摘要] 目的 探討BECKMAN PK7300 全自動血型檢測分析系統可疑及錯誤結果的原因。方法 回顧長沙血液中心2018年6—9月的31 816例經BECKMAN PK7300檢測的全血樣本的結果進行統計，分析其一次性判斷成功率及失敗率和可疑結果的原因分析。結果 對于RHD血型一次性判讀正確率99.93%;ABO 血型一次性判讀成功率為99.04% ;失敗率為0.95%。可疑結果原因分析以標本脂血為主要原因，其次還有凝血、有雜質和加樣失敗、有氣泡等其他因素影響。結論 BCEKMAN PK700全自動血型儀具有全自動、高通量等優點，檢測前的樣本質量對檢測的結果影響尤為重要，做好檢測前、檢測中、檢測后的質量控制是對實驗質量保證的關鍵因素。

[關鍵詞] 全自動血型儀;一次性判讀成功率;質量控制;血液安全

[中圖分類號] R446.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2020）02（b）-0172-03

[Abstract] Objective To investigate the causes of suspicious and erroneous results of the BECKMAN PK7300 automatic blood group detection and analysis system. Methods The results of 31，816 whole blood samples tested by BECKMAN PK7300 from June to September 2018 in Changsha Blood Center were reviewed for statistical analysis of the one-time judgment of success rate， failure rate， and cause analysis of suspicious results. Results The correct rate of one-time interpretation of RHD blood group was 99.93%; the success rate of one-time interpretation of ABO blood group was 99.04%; the failure rate was 0.95%. The main cause of the suspicious result analysis is the lipemia of the specimen， followed by other factors such as coagulation， impurities and sample failure， and air bubbles. Conclusion BCEKMAN PK700 automatic blood group meter has the advantages of full-automatic， high-throughput， etc. The quality of the sample before the test has a particularly important impact on the test results. Quality control before， during， and after the test is a key factor in ensuring the quality of the experiment.

[Key words] Automatic blood type meter; One-time interpretation success rate; Quality control; Blood safety

為保證臨床用血安全，血型的準確鑒定是其首要前提。目前血型的臨床檢測方法主要有紙片法、試管法，微量微板法和全自動血型儀檢測法，其中以試管法仍舊作為血型檢測的金標準，然而在血站的血液檢查工作中，由于標本數量大，因而無法作為常規檢測方法，微量微板法對于大批量的樣本檢測時同樣存在費時費力的缺點，且其結果需要人工判讀，無法保存，結果回溯性差。BECKMAN PK7300全自動血型分析儀集自動加樣、孵育、判讀、數據保存及全過程監控為一體，具有全自動、高通量等優點外，其在不規則抗體和亞型篩選、測定 ABO血型抗體效價等方面也體現出較為卓越的性能[1]。但在其使用過程中會遇到無法判讀或者錯誤判讀血型結果的情況，這對于血液安全有著重大影響，現將該中心于2018年6—9月采集的31 816標本進行回溯性分析，報道如下。

1? 材料與方法

1.1? 材料來源

長沙血液中心無償獻血者的全血樣本共計31 816例，均為EDTA-K2抗凝標本。

1.2? 儀器與試劑

BECKMAN PK7300全自動血型檢測系統;白洋600 A型離心機;單克隆抗-A/B血清（長春博德）;抗-D血清（上海血液生物）;標準紅細胞懸液3%～5%（上海血液生物）;0.9%生理鹽水。

1.3? 方法

采用全自動血型儀進行操作。

1.3.1 試劑配制? ABO標準紅細胞用生理鹽水稀釋為濃度為 1.6%～2.7%的細胞懸液;標準抗血清用生理鹽水做1：40稀釋。

1.3.2 結果判讀? 根據梯度板小孔中心的血細胞邊緣的光通量的變化率以及與周邊部分的光通量和中心部分的光通量的比例關系等滿足設定參數的范圍則判斷陰性和陽性結果。

1.3.3 操作步驟? 根據BECKMAN PK7300全自動血型儀操作手冊進行實驗，當儀器法鑒定無法判讀樣本時加做試管法以輔助鑒定。試管法按全國臨床檢驗操作規程進行ABO正/反定型、RHD血型測定。兩種方法都無法檢測則送長沙血液中心輸血研究室做進一步鑒定。

1.4? 實驗室參數設置

SPC表示位于小孔中心的血細胞邊緣的光通量的變化率。該設備賦予SPC更高的優先權，是判斷凝集和非凝集狀態的主要參數。P/C表示小孔周邊部分和中心部分的光通量的比例關系。LIA表示非凝集狀態圖像中聚集在小孔中心的細胞區域的面積[2]。見表1。

表1? BECKMAN PK7300 主要參數設置

1.5? 統計方法

應用SPSS 21.0統計學軟件進行數據分析，計數資料以頻數和百分比（%）表示。

2? 結果

2.1? 31 816例的樣本判讀率與成功率分析統計

該次統計31 816例的樣本中，對于RHD血型一次性判讀正確率為99.93%;ABO血型一次性判讀成功31 512 例，成功率為99.04%;錯誤判讀76例;可疑標本228 例，失敗率為0.95%。

2.2? 228例ABO血型結果可疑標本分析統計

通過回溯性觀察實驗保存的圖片可統計到以上出現可疑結果的原因。其中加樣失敗表現為結果空白或者結果為溶血從而影響正定型的結果判讀。正反不符僅為該實驗室結果顯示的正反定型不一致，最終結果有賴于追溯至Shinow 9.0系統中報告生成為準。見表2。

2.3? 20例RHD血型結果可疑標本分析統計

通過回溯性觀察實驗保存的圖片可統計到以上出現可疑結果的原因。其中加樣失敗表現為結果空白或者結果為溶血從而影響RHD血型的結果判讀。見表3。

3? 討論

該中心由2018年4月正式啟動BCEKMAN PK700全自動血型儀，較以往采用微板法檢測，在試劑用量、人員操作上大幅度減少了成本付出，在檢測通量、結果準確性上都有了很大的提高，而且整個過程人為干預減少，結果可保存追溯，對于血站檢驗科的工作效率有了顯著的提高。

該次討論中，不管是RHD血型還是ABO血型的判讀，該中心的BECKMAN PK7300全自動血型儀的結果正確率均在99%以上，其失敗率均符合儀器設定的可容許1%～2%的失敗率，其結果可靠。值得注意的是在該次228例可疑結果原因分析中，樣本因素占了66.22%，其中尤其以脂血標本對反定型結果影響最大。樣本存在凝塊，反映了標本前處理時抗凝劑顛倒混勻不夠，離心不夠充分。加樣失敗的原因主要反映在溶血和檢測量不夠的情況。而以上的因素提示對于全自動血型儀的檢測中樣本因素起了關鍵的作用，包括了質和量的影響。有氣泡和有雜質的影響主要歸結于儀器的維護和保養，儀器管道的沖洗是維護儀器日常所必需，實驗開始前就應該注意觀察管道內是否有氣泡，而實驗結束后梯形板的清潔對于下一次實驗有很大的影響[3]。目前該實驗室采用的是超聲波振蕩清洗儀，只需要人為將梯形板置于超聲波振蕩清洗儀中清洗40 min后，置于干燥箱中風干待用，其清潔力度仍有待改善。在RHD血型檢測中加樣失敗是其影響結果的主要因素，標本凝塊，雜質也對實驗有很大的影響。在156例RHD陰性結果中，送至輸血研究室經過確認為陰性的有151例，其中變異型4例，RHD陽性1例。BCEKMAN PK700全自動血型儀在RHD陰性鑒定上的準確度為96.79%，由于RHD血型的復雜性和檢測的局限性，變異型的檢出仍舊有賴于血清學實驗和基因鑒定[4]。該次討論中檢出的16例正反不符的樣本，送至長沙血液中心輸血研究室鑒定后，其中6例為亞型，4例為不規則抗體陽性，6例為血型抗體減弱。全自動血型分析儀用于不規則抗體篩查的靈敏度較之前微板法有了很大的提高，從而保障血液更安全[5-7]。然而全自動血型儀對于正反不符的原因并不能有效區分，存在其自身的局限性。而且全自動血型儀的結果圖片還是需要人工核對，所以在使用血型儀過程中仍需工作人員嚴格按照SOP操作，認真核對結果，提高責任心，從而能避免因血型錯誤而造成的輸血事故。

綜上所述，BCEKMAN PK700全自動血型儀的投入使用，對于血站檢驗科的工作效率有了極大地提高和改善的同時，在檢測前、檢測中、檢測后的質量控制仍是檢測質量上的有力保證。

[參考文獻]

[1]? 王梓.全自動血型分析儀在血站血型檢測中的應用[J].中國醫療器械信息，2016，22（10）：61-64.

[2]? 楊忠思，周華友，馮秋霞，等.非配套pk7300型全自動血型檢測系統方法的建立與評價[J].中國輸血雜志，2017（11）：1228-1231.

[3]? 許婷婷，張紅，余琴，等.PK7300全自動血型儀在血站應用的探討[J].臨床血液學雜志，2018，31（2）：145-147.

[4]? Sandler SG，Chen LN，Flegel WA，et al.Serological weak D phenotypes： a review and guidance for interpreting the RhD blood type using the RHD genotype[J].Br J Haematol.2017，179（1）：10-19.

[5]? 李琳琳，李美霖，車進，等.全自動血型分析儀與微板法應用于獻血者不規則抗體篩查的比較分析[J].檢驗醫學與臨床，2016，13（5）：593-594.

[6]? 王平，楊克堅，羅月明.獻血者ABO血型反定型O細胞凝集原因分析[J].熱帶醫學雜志，2009，9（5）：559-560.

[7]? 隋麗麗，郭金金，李美霖，等.全自動血型分析儀與微板法在ABO血型篩查中的比較分析[J].國際檢驗醫學雜志，2017， 38（21）：2964-2965.

（收稿日期：2019-11-19）