駱永泉 鄧曉霞 黃詩惠



摘 要:本文主要探討HP-PRRS減毒活疫苗(TJM-F92株)、高效CSF活疫苗(耐熱保護劑、細胞苗)、FMDO型滅活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)免疫優化方案。通過采用現代分子免疫學技術對豬FMD、CSF和HP-PRRS免疫程序進行研究,為豬FMD、CSF和HP-PRRS預防控制定出一套有效的免疫程序并進行推廣,為某市防控豬FMD、CSF和HP-PRRS提出理論依據和技術支持。
關鍵詞:某市生豬;疫病免疫程序;推廣
一、試驗與結論
(一)材料與方法
1.疫苗??谔阋逴型滅活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗(TJM-F92株)疫苗來源于政府采購疫苗,廠家為山西隆克爾生物制藥有限公司、豬瘟高效CSF活疫苗(耐熱保護劑、細胞苗)。
2.試驗動物。全部選自文庭養豬場,確保同一試驗組的仔豬為同一日齡,健康未免疫。每個試驗組5頭仔豬,對照組為10頭仔豬,共35頭仔豬。
3.試驗區域某豬場,周邊無其他豬場。試驗仔豬按分組相互隔離。試驗場地封閉管理,無閑雜人等進出,由專人負責投喂相同飼料,采用相同消毒方式進行定期消毒。
4.檢測試劑??谔阋逴型液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒,試劑采購于中國農業科學院蘭州獸醫研究所。
5.試驗分組。(1)試驗1組:于20日齡時采血,于21日免疫豬瘟苗,于28日齡時免疫藍耳苗,于42日齡時免疫口蹄疫苗并采血,于56日齡時免疫豬瘟苗并采血,于70日齡時免疫口蹄疫苗,于92日齡時采血。(2)試驗2組:于14日齡時采血,于28日齡時免疫藍耳苗和豬瘟苗,于42日齡時免疫口蹄疫苗并采血,于56日齡時免疫豬瘟苗并采血,于70日齡時免疫口蹄疫苗,于92日齡時采血。(3)試驗3組:于14日齡時采血,于28日齡時免疫藍耳苗和豬瘟苗,于42日齡時免疫口蹄疫苗并采血,于56日齡時免疫藍耳苗和豬瘟苗并采血,于70日齡時免疫口蹄疫苗,于92日齡時采血。(4)試驗4組:于14日齡時采血,于28日齡時免疫藍耳苗、豬瘟苗、口蹄疫苗,于42日齡時免疫口蹄疫苗并采血,于56日齡時免疫藍耳苗和豬瘟苗并采血,于70日齡時免疫口蹄疫苗,于92日齡時采血。(5)試驗5組:于28日齡時采血,次日免疫藍耳苗、豬瘟苗、口蹄疫苗,于56日齡時采血,于70日齡時免疫藍耳苗、豬瘟苗、口蹄疫苗并采血,于92日齡時采血。(6)對照組:不免疫口蹄疫、豬瘟、藍耳疫苗。
6.檢測方法。依據GB/T18935-2003口蹄疫診斷技術中的液相阻斷—酶聯免疫吸附試驗(LpB-ELISA)。具體操作步驟按說明書進行。
依據GB/T18090-2008豬繁殖與呼吸綜合診斷方法中的液相阻斷—酶聯免疫吸附試驗(LpB-ELISA)。具體操作步驟按說明書進行。
7.儀器。酶標儀型號為帝肯SUNRISE。
8.數據統計與分析。口蹄疫抗體以10為底的對數進行分析比較
(二)結果與分析
1.免疫程序。
2.不同免疫程序的口蹄疫抗體比較。
從圖1可以看出,試驗1、2、3組分別在42日齡注射口蹄疫滅活疫苗后,試驗1組抗體水平持續升高,而試驗2、3組抗體水平在短時間內有所下降。試驗1、2、3組在70日齡時進行二免后抗體水平都有所升高。試驗4、5組在28日齡時同時分點注射口蹄疫滅活疫苗、藍耳活疫苗、豬瘟活疫苗后,抗體水平有所下降,在70日齡進行二免后抗體水平緩慢升高。5個試驗組在二免以后抗體水平基本能保持在較高水平上。
3.不同免疫程序的豬瘟抗體比較。
從圖2可以看出,試驗1組在21日齡一免后一個月才產生少量抗體,在56日齡二免后一個月才得到100%抗體陽性率。試驗2組在28日齡一免后一個月達到100%抗體陽性率,在56日齡二免后一個月抗體陽性率為0。試驗3組僅在42日齡時獲得了80%的抗體陽性率,之后抗體陽性率均為0。試驗4組在二免后的抗體陽性率不及一免后一個月時的高。試驗5組在28日齡時同時分點注射口蹄疫滅活疫苗、藍耳活疫苗、豬瘟活疫苗后,抗體陽性率有所下降,在一個月后有所上升,在70日齡二免后保持100%抗體陽性率。
4.不同免疫程序的豬繁殖與呼吸綜合征抗體比較。
從圖3可以看出,試驗1、2、3、4組在首次采血時均有母源抗體。試驗1組在28日齡免疫藍耳苗后,抗體陽性率逐漸升高。試驗2、3、4組在28日齡同時分點注射藍耳苗和豬瘟苗兩周后,抗體陽性率就達到了100%(之后兩組有無二免藍耳都對抗體陽性率無影響)。試驗4組在28日齡時,同時分點注射口蹄疫、藍耳和豬瘟三種疫苗后直到56日齡時,才產生了抗體。而試驗5組采取同種方式注射三種疫苗后,在42日齡時就有了80%抗體陽性率,56日齡達到了100%抗體陽性率。
(三)討論
對比幾種免疫程序,可以看出,試驗1組采用的單點單次注射疫苗,三種疫苗抗體產生良好,口蹄疫抗體水平持續走高,豬瘟、藍耳抗體陽性率較高。試驗2組免疫兩次豬瘟后最終豬瘟抗體反而為0,藍耳只免疫一次,抗體水平良好,口蹄疫抗體經歷了降低到升高的過程。試驗3組與2組類似,免疫兩次豬瘟后最終豬瘟抗體反而為0,藍耳免疫了兩次,抗體水平良好,口蹄疫抗體經歷了降低到升高的過程。試驗4組同時首免三種疫苗,豬瘟在42日齡時有較高的抗體陽性率,單獨補免豬瘟后,豬瘟抗體有所上高。口蹄疫與2、3組類似,都在緩慢降低后又升高。藍耳只免疫了一次,在56日齡時才得到了抗體陽性率。試驗5組是兩次三種疫苗同時分點注射,口蹄疫水平相比其他組稍微高一些,也有短期的下降。豬瘟和藍耳在56日齡后抗體陽性率保持在100%。
二、推廣與效果
(一)免疫推廣
在全市范圍內推廣使用試驗3組、4組和5組的免疫程序,搜集2014年-2016年間的檢測數據,并對其效果進行比較。由表2可以看出,在實際推廣中,口蹄疫單獨免疫和口蹄疫與藍耳、豬瘟一起免疫沒顯著差異。而口蹄疫、豬瘟和藍耳同時免疫,對藍耳效果無影響。幾種方法中,口蹄疫抗體效果無影響,藍耳效果無影響。
(二)流行病學調查結果
從2016年和2013年的生豬疫病流行病學調查情況看,賀州市生豬疫病的發病率、病死率以及生豬的死亡率都有極大地降低,2016年與2013年比賀州市生豬發病率下降了5.13個百分點,生豬死亡率下降了6.96個百分點,生豬死亡率年平均下降2.32個百分點。
(三)推廣應用前景
從2016年和2013年的生豬疫病流行病學調查情況看,賀州市生豬疫病的發病率、病死率以及生豬的死亡率都有極大地降低,2016年與2013年比賀州市生豬發病率下降了5.13個百分點,生豬死亡率下降了6.96個百分點,生豬死亡率年平均下降2.32個百分點。豬口蹄疫、豬瘟、豬高致病性藍耳病等重大動物疫病的強制免疫技術的推廣,保障了賀州市生豬健康穩定的發展,確保了生豬養殖的經濟效益的提高。通過該項目的實施,將全面提高賀州市豬FMD、CSF和HP-PRRS防控等重大疫病預防、控制水平。