關(guān)于糧油中真菌毒素檢測(cè)技術(shù)分析及其應(yīng)用探討

黃銘仕

摘 要：糧食食品的安全問(wèn)題一直是人們關(guān)注的重點(diǎn)問(wèn)題，在糧油的收購(gòu)、存儲(chǔ)管理過(guò)程中，需要對(duì)糧油的真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)，才能保證糧油的安全，通過(guò)對(duì)糧油真菌毒素檢測(cè)技術(shù)主要內(nèi)涵進(jìn)行分析，探究了多種糧油真菌毒素的檢測(cè)技術(shù)以及新型檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：糧油;真菌毒素;檢測(cè)技術(shù)

Abstract：Food safety has always been the focus of peoples attention. In the process of grain and oil purchase and storage management， it is necessary to detect the mycotoxins in cereals and oils in order to ensure the safety of cereals and oils. By analyzing the main connotation of mycotoxins detection technology of cereals and oils， this paper explores a variety of detection technologies of cereals and oils mycotoxins and the application of new detection technologies.

Key words：Cereals and oils; Mycotoxins; Detection technology

中圖分類號(hào)：TS207.5

糧油食品的真菌毒素的檢測(cè)關(guān)系到國(guó)民的健康與安全問(wèn)題，需要對(duì)糧食中的各種真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)。一般情況下，糧食中常見(jiàn)的真菌素有黃曲霉毒素（AFT）、玉米赤霉烯酮（ZEN）等，如果糧油中含有這些真菌素，會(huì)對(duì)人體造成巨大的傷害，例如黃曲霉毒素毒性十分厲害，如果花生、玉米、谷物等農(nóng)產(chǎn)品中的黃曲霉毒素（AFT）過(guò)高，會(huì)對(duì)人畜的健康造成影響，是嚴(yán)重威脅農(nóng)產(chǎn)品消費(fèi)安全的關(guān)鍵因素之一。糧油中的真菌毒性具有強(qiáng)致癌、致畸、致突變性，如果食用量過(guò)大，對(duì)人體的健康造成重大的危害，對(duì)糧油中的真菌毒性進(jìn)行檢測(cè)，以降低糧油中這些真菌毒素對(duì)人體造成的危害[1-4]。

1 糧油中真菌毒素檢測(cè)技術(shù)概述

1.1 糧油中真菌毒素檢測(cè)技術(shù)分類

糧油中真菌毒素檢測(cè)技術(shù)主要對(duì)糧油或者一些其他農(nóng)作物中的真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)，判斷其在糧油中的含量。隨著新型檢測(cè)技術(shù)在糧油檢測(cè)中的應(yīng)用，對(duì)糧油中真菌素的檢測(cè)技術(shù)也產(chǎn)生不同的檢測(cè)技術(shù)，一般情況下，糧油檢測(cè)技術(shù)可以分為常規(guī)真菌毒素檢測(cè)技術(shù)與新型真菌毒素檢測(cè)技術(shù)兩種類型。常規(guī)的真菌檢測(cè)技術(shù)是采用經(jīng)典的分析技術(shù)，也是應(yīng)用時(shí)間較長(zhǎng)的較為經(jīng)典的檢測(cè)手法，檢測(cè)手段穩(wěn)定、可靠，這種檢測(cè)方法主要包括薄層色譜法、色譜法、免疫分析法等，主要針對(duì)糧油中的黃曲霉毒素（AFT）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、赭曲霉毒素（OTA）、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）等有毒真菌素進(jìn)行檢測(cè)，但在檢測(cè)的過(guò)程中，需要時(shí)間較長(zhǎng)，過(guò)程比較復(fù)雜;而新型真菌毒素檢測(cè)技術(shù)是在經(jīng)典檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的新型檢測(cè)技術(shù)方法，利用現(xiàn)代化學(xué)檢測(cè)技術(shù)對(duì)糧油中的真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)，轉(zhuǎn)變了傳統(tǒng)的糧油檢測(cè)技術(shù)，常用的方法主要包括膠體金免疫層析測(cè)定分析技術(shù)、免疫生物傳感器檢測(cè)分解技術(shù)、光譜篩選技術(shù)、分子運(yùn)動(dòng)控制印跡技術(shù)等新型的檢測(cè)技術(shù)，新型真菌毒素技術(shù)具有快速、檢測(cè)范圍廣泛等優(yōu)勢(shì)。

1.2 糧油中真菌毒素檢測(cè)技術(shù)選擇

糧油中真菌毒素的化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，如真菌毒素對(duì)熱、紫外線、酸等物質(zhì)有較強(qiáng)的抵抗力，但在堿性環(huán)境中，就容易分解，發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。針對(duì)真菌毒素的這種特性，可以采用簡(jiǎn)潔、準(zhǔn)確的方法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，還能夠節(jié)約檢測(cè)的成本。在具體的檢測(cè)過(guò)程中，不同的真菌毒素檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)特點(diǎn)不盡相同，可以采用多種檢測(cè)方法對(duì)綜合性的真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)不同的真菌毒素檢測(cè)效果也具有不同的優(yōu)勢(shì)，它們?cè)诰唧w的糧油毒素檢測(cè)的過(guò)程中，分別具有檢測(cè)準(zhǔn)確率高、檢測(cè)效果好、檢測(cè)手段穩(wěn)定、檢測(cè)便捷可靠以及經(jīng)濟(jì)實(shí)惠等不同的特點(diǎn)。真菌毒素與農(nóng)獸藥不同，無(wú)法有效地對(duì)藥源進(jìn)行控制與管理，為了保證在糧油檢測(cè)中真菌毒素檢測(cè)的準(zhǔn)確和高效，需要針對(duì)不同的糧油品質(zhì)，采用不同的檢測(cè)方法，并盡可能地節(jié)約檢測(cè)的成本，檢驗(yàn)部門的工作人員，就需要合理的應(yīng)用高效的技術(shù)，根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行糧油中真菌毒素的檢測(cè)選擇合適的技術(shù)，采用快速、準(zhǔn)確、綠色模式為主的真菌毒素檢測(cè)技術(shù)為主要方式，以提高檢測(cè)的效率。

2 常見(jiàn)糧油中的真菌檢測(cè)技術(shù)及應(yīng)用

2.1 常規(guī)真菌毒素檢測(cè)技術(shù)分析

常規(guī)真菌毒素的檢測(cè)方法準(zhǔn)確可靠、檢測(cè)靈敏度高，使用的檢測(cè)規(guī)模一般要求不高，但這種方法的前期處理比較復(fù)雜，需要采用成套的提取凈化濃縮設(shè)備，對(duì)糧油中的真菌毒素進(jìn)行提取，一般情況下不適用于糧油收購(gòu)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。

2.1.1 薄層色譜法檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用

薄層色譜法是一種十分經(jīng)典的真菌毒素檢測(cè)技術(shù)，是在20世紀(jì)70年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)，主要依據(jù)真菌毒性在酸性環(huán)境中的穩(wěn)定性，利用真菌毒素在紫外線照射下的熒光特性，結(jié)合真菌毒素的物理與化學(xué)性質(zhì)，選擇合適的有機(jī)溶劑對(duì)糧油樣品中毒素進(jìn)行溶解與提取，然后利用液液萃取、免疫親和、固相萃取、凝膠色譜等技術(shù)進(jìn)行凈化，提取糧油的真菌毒素，然后對(duì)糧油中的真菌毒素的分布情況進(jìn)行分析，從而確定糧油中的真菌毒素含量與分布情況。在實(shí)際應(yīng)用的過(guò)程中，薄層色譜法首先需要糧油中的真菌毒素的檢測(cè)樣本進(jìn)行提取、濃縮，進(jìn)行薄層分離操作，然后根據(jù)各種真菌毒素的熒光特性進(jìn)行比對(duì)分析，達(dá)到對(duì)糧油中的真菌素進(jìn)行定量與定性分析，這種分析方法操作過(guò)程比較復(fù)雜，分析比對(duì)過(guò)程時(shí)間比較長(zhǎng)，而且，在具體的測(cè)試過(guò)程中，由于薄層色譜法使用中具有一定的真菌霉素暴露風(fēng)險(xiǎn)，容易對(duì)周圍的環(huán)境造成污染，對(duì)檢測(cè)人員造成感染，在具體的檢測(cè)過(guò)程中，需要操作人員注意保護(hù)自身安全。這種方法將色譜的分離功能與質(zhì)譜的分析功能結(jié)合起來(lái)，可以有效地對(duì)糧油中的復(fù)雜真菌毒素進(jìn)行綜合性的檢測(cè)與分析，這種方法對(duì)真菌毒素或其衍生物所具有的熒光特性要求不高，適用于絕大多數(shù)真菌毒素的分析，方法靈敏度高、準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性好，在省級(jí)以上的科研所或者質(zhì)檢單位中應(yīng)用十分廣泛。目前，薄層色譜法檢測(cè)在大范圍的糧油真菌檢測(cè)中逐漸被其他的新型檢測(cè)方法所代替，但將薄層色譜法與色譜法、質(zhì)譜法進(jìn)行聯(lián)合使用，可以快速的對(duì)糧油中的某種真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)，準(zhǔn)確度高，效果比較好，但采用聯(lián)合檢測(cè)的方法同樣對(duì)檢驗(yàn)的設(shè)備與儀器有較高的要求，在一定程度上，檢測(cè)的成本也比較高，在具體應(yīng)用中，往往也會(huì)受到一定的限制。

2.1.2 經(jīng)典儀器分析方法

（1）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析方法。它是利用真菌毒素的色譜與質(zhì)譜分布，對(duì)毒素進(jìn)行檢測(cè)的方法，通過(guò)對(duì)糧油中的真菌毒素進(jìn)行萃取、免疫親和、固相萃取、凝膠色譜進(jìn)行分析，然后對(duì)糧油中的真菌毒素進(jìn)行比對(duì)分析，快速的實(shí)現(xiàn)對(duì)糧油中的真菌毒素進(jìn)行準(zhǔn)確定性與定量分析，從而準(zhǔn)確的分析出糧油中的真菌毒性的含量。采用這種分析方法與其他的分析方法結(jié)合在一起，靈敏度高、準(zhǔn)確性、便捷高效和重現(xiàn)性較好，但采用這種方法，儀器昂貴，檢測(cè)成本高，而且對(duì)檢測(cè)的工作人員提出了很高的要求，一般適用于大型的科研單位。

（2）氣相色譜法。氣相色譜法也是利用真菌毒素色譜分布的特征，主要應(yīng)用于沸點(diǎn)低、容易被氣化的物質(zhì)，通過(guò)相應(yīng)的處理與分離，采用氣相色譜法能對(duì)單端孢霉烯族類化合物中的真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)，如嘔吐毒素，通過(guò)衍生試劑對(duì)其衍生化處理，然后采用氣化的方法處理，并運(yùn)氣相色譜附電子捕獲檢測(cè)器進(jìn)行分析，并對(duì)其進(jìn)行色相比對(duì)分析，得到糧油中的真菌毒素含量。采用氣相色譜法分析糧油中的真菌毒素十分快速，但是在處理過(guò)程中需要進(jìn)行經(jīng)衍生化處理，操作過(guò)程比較復(fù)雜，已經(jīng)很少使用。

（3）熒光光度法。這種方法主要運(yùn)用糧油中的真菌毒素或其衍生物具有熒光特性，分析糧油真菌毒素的含量，通過(guò)將真菌毒素進(jìn)行提取、凈化、濃縮后，直接通過(guò)熒光分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，快速的得到熒光光度含量。采用熒光光度法可以快速的對(duì)糧油中的真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)的結(jié)果直接得出，在一些基層實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用，但是采用這種方法必須要用真菌毒素免疫親和柱進(jìn)行樣品的凈化，而且檢測(cè)的方法也比較單一，而且運(yùn)用這種方法來(lái)檢測(cè)黃曲霉毒素，一次只能檢測(cè)出一種黃曲霉毒素總量或單一分量，檢測(cè)效率比較低。

2.2 新型真菌毒素檢測(cè)技術(shù)

2.2.1 新型免疫分析技術(shù)

免疫分析檢測(cè)方法主要是利用糧油中的真菌毒素是小分子物質(zhì)、半抗原體的特征，沒(méi)有免疫功能，它們只有與大分子結(jié)合在一起才具有活性。采用免疫分析檢測(cè)方法避免了使用儀器測(cè)量帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)，在糧油真菌毒素檢測(cè)中具有十分重要的作用，應(yīng)用也比較廣泛。目前，通過(guò)以基礎(chǔ)對(duì)免疫分析檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行研究和優(yōu)化，新型免疫技術(shù)已經(jīng)出現(xiàn)了多種分析方法，從而能夠更便捷、快速地對(duì)糧油真菌病毒進(jìn)行檢測(cè)。常用的免疫檢測(cè)分析方法有膠體金免疫層析測(cè)定、免疫生物傳感器、時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)等，雖然這些新型檢測(cè)方法還是采用了真菌病毒的半抗原特性，在運(yùn)用新技術(shù)與新方法，使得檢測(cè)技術(shù)更加有效。新型免疫分析技術(shù)的基礎(chǔ)原理，在檢測(cè)方法上還是利用真菌毒素的半抗原特性對(duì)毒素進(jìn)行檢測(cè)，但在檢測(cè)方法上進(jìn)行了更新，將各種檢測(cè)方法結(jié)合在一起。比如，膠體金免疫層析測(cè)定方法，就是對(duì)原有的技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)，將免疫金標(biāo)記技術(shù)與抗原抗體反應(yīng)結(jié)合在一起進(jìn)行檢測(cè)，也突破單一檢測(cè)方法的限制。膠體金免疫層析測(cè)定方法是將膠體金標(biāo)記試劑與待檢測(cè)物質(zhì)進(jìn)行充分混合，讓二者之間產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)，通過(guò)標(biāo)記將反應(yīng)的特異性特征綜合在一起，將檢測(cè)的結(jié)果與檢測(cè)帶進(jìn)行對(duì)比分析，利用肉眼對(duì)檢測(cè)的結(jié)果進(jìn)行觀察與測(cè)定，快速對(duì)糧油中的真菌病毒含量進(jìn)行判定，采用膠體金免疫層析測(cè)定具有準(zhǔn)確、快速、便捷、穩(wěn)定等特點(diǎn)，而且檢查也比較方面，適用于廣泛的糧油真菌病毒檢測(cè)。放射免疫分析技術(shù)是一種新型的糧油真菌病毒檢測(cè)方式，主要是借助放射性同位素對(duì)檢測(cè)的樣品進(jìn)行標(biāo)記，然后與糧油樣品進(jìn)行混合，然后混合液體中添加定量的特異性抗原體，在液體中形成競(jìng)爭(zhēng)性抑制，進(jìn)而能夠快速的對(duì)糧油真菌病毒含量進(jìn)行判斷，但采用這種檢測(cè)方法容易在檢測(cè)過(guò)程中造成污染，影響后期的檢測(cè)效果與質(zhì)量，而且檢測(cè)的成本也比較高，使得該技術(shù)在具體的應(yīng)用中受到了一定的限制。

2.2.2 其他新型真菌病毒檢測(cè)技術(shù)

隨著現(xiàn)代生物技術(shù)與科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，一些新型糧食真菌毒素檢測(cè)技術(shù)也得到了廣泛的應(yīng)用。例如，生物芯片技術(shù)、膜載體酶標(biāo)記快速檢測(cè)技術(shù)等技術(shù)，都是采用新型檢測(cè)技術(shù)，運(yùn)用免疫學(xué)的原理，利用真菌毒素與測(cè)試試劑混合時(shí)產(chǎn)生的化學(xué)反應(yīng)，對(duì)糧油中的真菌毒素含量進(jìn)行檢測(cè)，主要是通過(guò)對(duì)反應(yīng)物不同的反應(yīng)表現(xiàn)、熒光測(cè)定、光譜測(cè)定等方法對(duì)糧油中的真菌毒素進(jìn)行測(cè)量分析，進(jìn)而能快速對(duì)糧油中的真菌毒素含量進(jìn)行測(cè)試。隨著檢測(cè)環(huán)境的變化，在對(duì)糧油真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)，可以結(jié)合不同檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，可以采用多種方法對(duì)真菌毒素進(jìn)行綜合性檢測(cè)，不僅能夠提高糧油真菌檢測(cè)的效率，還能降低檢測(cè)的成本。

3 結(jié)語(yǔ)

在糧油真菌毒素的檢測(cè)過(guò)程中，為了提高檢測(cè)的效果與檢測(cè)的準(zhǔn)確性，在具體的檢測(cè)過(guò)程中，可以將儀器檢測(cè)法、免疫分析法等多種技術(shù)結(jié)合在一起，實(shí)現(xiàn)對(duì)糧油檢測(cè)目標(biāo)物的準(zhǔn)確定量分析與定性分析，結(jié)合具體的工作要求，發(fā)展方便、快速、低毒、準(zhǔn)確及低成本的快速檢測(cè)技術(shù)，從而能夠?yàn)榛鶎蛹Z油使用與收購(gòu)單位提供高效的檢測(cè)技術(shù)，進(jìn)而促進(jìn)我國(guó)的糧油產(chǎn)業(yè)的進(jìn)步和發(fā)展。

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