何紹港, 張啟月, 馬明陽, 張左嬌, 何玉華*, 張克勤
(1.吉林農業科技學院動物科技學院,吉林左家 132109;2.吉林省白城市通榆縣包拉溫都保護局,吉林通榆 137200)
烏腺金絲桃屬于山茶目、藤黃科的中藥材,其在我國內蒙古、黑龍江、吉林、河北,以及周邊國家均有分布。烏腺金絲桃含有大量的金絲桃素等11種生物活性成分(趙劍,2012),對各種出血有較好的療效,還能治療類風濕等引起的各種疼痛,另外,還具有降低類風濕性關節炎大鼠血清中NO及VEGF表達,促進人肺癌A549細胞凋亡,抗抑郁等功效(王呈祥,2017)。
無抗飼料和生物飼料是養殖業發展的方向,飼料的安全關系到食品的安全,開發中草藥飼料添加劑,將中醫和中草藥融入到畜牧產業中是提高畜產品品質的有效途徑。烏腺金絲桃是吉林左家自然保護區的代表性中草藥,開發左家地區區域特色飼料添加劑將會有廣闊的發展空間。本試驗將烏腺金絲桃的水提液供小鼠飲用,研究其對小鼠的采食、增重、內臟器官發育的影響,探討烏腺金絲桃在小鼠上應用的效果,為烏腺金絲桃在飼料添加劑產品上的開發奠定基礎,為烏腺金絲桃的藥用功能提供更加精準的數據支持。
1.1 試驗材料 烏腺金絲桃全株,由吉林農業科技學院中藥學院提供。
1.2 試驗動物及飼養管理 選擇60只生長發育良好、體重為27~31 g的清潔級昆明小鼠,公母各半,購買于山東昊泰實驗動物繁育有限公司,飼養小鼠的地點為左家校區動物科技學院實驗動物飼養室,飼養室的溫度為20℃左右,濕度為30%~45%,24 h 采食和飲水(楊明建,2017)。
1.3 試驗儀器 電磁爐 (C21-WH2105,美的集團)、電子分析天平(JY3002,上海贊維衡器有限公司)、懸掛式小鼠籠(HL-XG,合力科創)、小鼠籠架(HL-XG,合力科創)、小鼠用耳標、耳號鉗(ST101,美國CLARKBIO)、手術剪(9.5 cm直頭,上海紅尊醫療器械有限公司)、手術刀等實驗室常用器械。
1.4 試驗設計 將60只小鼠隨機的分成2組,即正常組和烏腺金絲桃組,每組30只,公母分別為15只,正常組飲用自來水,烏腺金絲桃組飲用烏腺金絲桃水提液。每次將250 g烏腺金絲桃用電磁爐燒水煮沸3 h,然后定容到1 L,喂給烏腺金絲桃組小鼠飲用。飼養時間33 d,前5 d為預飼期,后28 d為正式期,小鼠日糧組成和營養水平見表1。

表1 小鼠日糧組成和營養水平
1.5 測定指標及方法
1.5.1 生長性能 以試驗開始的第1天早上8:00小鼠的體重作為初始體重,以后每周稱量1次,試驗結束當天早上8:00對小鼠進行最后1次體重的稱量。每天早晨8:00飼喂前稱量飼喂的飼料量和前一天剩余的飼料量,根據采食量和試驗天數計算平均日采食量(姚康,2005)。
平均日增重/(g/d)=(試驗末體重-試驗初體重)/試驗天數;
平均日采食量/(g/d)=試驗期采食量/試驗天數;
料重比=平均日采食量/平均日增重。
1.5.2 器官指數 試驗結束的最后一天早上8:00用2把鑷子分別夾住小鼠的尾根和頭部,然后用力拉伸,使小鼠的頸椎脫臼而死,然后馬上用手術剪剪開小鼠的腹部,并摘取小鼠的心臟、肝臟、腎臟、脾臟之后,剔除其上面的締組織及脂肪組織后稱量重量,分別計算各個器官的指數 (周夢宇,2018;張乃珣,2017;張乃珣,2016) 。
器官指數/(mg/g)=器官重/體重。
1.6 數據分析 試驗所得結果用 “平均值±標準誤”表示,數據的分析用 Excel和SPSS 19.0軟件進行,用P<0.05表示差異顯著。
2.1 烏腺金絲桃對小鼠生長性能的影響 從表2可知,小鼠飲用烏腺金絲桃水提液后,小鼠的末重略有升高,平均日增重呈降低的趨勢,平均日采食量也稍有降低,但烏腺金絲桃組和正常組相比無顯著差異 (P>0.05);烏腺金絲桃組的料重比有降低的趨勢,但與正常組相比未達到差異顯著水平(P>0.05)。

表2 烏腺金絲桃對小鼠生長性能的影響
2.2 烏腺金絲桃對小鼠器官指數的影響 從表3可知,小鼠飲用烏腺金絲桃水提液后,烏腺金絲桃組心臟指數呈上升趨勢,與正常組相比未達到差異顯著水平(P>0.05);肝臟指數較正常組降低8.86%,差異顯著(P<0.05);脾臟指數稍有降低,與正常組相比無顯著差異 (P>0.05);腎臟指數呈上升的趨勢,較正常組增加26.54%,差異顯著(P<0.05)。

表3 烏腺金絲桃對小鼠器官指數的影響mg/g
3.1 烏腺金絲桃對小鼠生長性能的影響 本試驗中小鼠飲用烏腺金絲桃水提液后,末重、平均日增重、平均日采食量烏腺金絲桃組和正常組相比無顯著差異(P>0.05);烏腺金絲桃組料重比有降低的趨勢,但與正常組相比無顯著差異 (P>0.05)。料重比值越小,生產水平越高;料重比值越大,生產水平越差??赡苁菫跸俳鸾z桃中所含的烏腺金絲桃素、黃酮類物質能夠對某種有害生物產生一定的抵抗作用和抗應激作用,促進了小鼠的生長(張翠月,2011)。
3.2 烏腺金絲桃對小鼠器官指數的影響 烏腺金絲桃性平、味苦,歸心經,對心臟有著良好的作用。用氯化鈣、氯仿制作心律失常的小鼠模型,然后用烏腺金絲桃提取物進行治療,發現其對心律失常具有較好的保護作用,對于造模小鼠的心肌缺血癥狀的試驗中,所得到的結果與民間療法的效果一致;除此之外還進行了對心肌缺血之后對缺氧抵抗情況的研究,結果表明其能夠延長耐受時間,使血清中反映心臟功能的乳酸脫氫酶、肌酸激酶的含量降低,降低了對心臟的損害,提升心肌組織中的超氧化物歧化酶的活性,使脂質過氧化物丙二醛的含量下降(李冀,2009;滕林,2008)。本試驗中烏腺金絲桃水提液使小鼠的心臟指數增加,但差異不顯著(P>0.05),心臟指數升高可能是飲用烏腺金絲桃提取物使心臟增生或肥大。
肝臟具有解毒的功能,動物體產生的有毒物質、代謝產物、飼料中的有毒成分等需要通過肝臟來分解。趙桂英(2015)用烏腺金絲桃粉給小鼠灌胃,劑量最高為45000 mg/kg,肝臟指數未發生顯著變化。本試驗得到了與之相反的結論,小鼠飲用烏腺金絲桃水提液后肝臟指數降低,與正常組相比差異顯著(P<0.05),這可能是由于肝臟發生纖維性病變等因素影響了其生長發育,也可能是由于本試驗所用烏腺金絲桃水提液的有效劑量較大,且飲水時間較長,本試驗中脾臟指數也降低,但差異不顯著,脾指數下降會導致免疫力下降,脾指數下降可能由于脾臟萎縮或增長抑制等造成的,說明長期大劑量的服用烏腺金絲桃對肝臟、脾臟均會有一定損傷,但是對肝臟的損傷大于對脾臟的損傷。
關于烏腺金絲桃對腎臟發育的影響鮮見相關報道,本試驗中,烏腺金絲桃水提液使小鼠的腎臟指數增加,與正常組相比差異顯著(P<0.05),可能存在某種成分影響了腎臟的生長發育(欒家杰,2012)。本試驗把烏腺金絲桃加在小鼠的飲用水中,如果按照不同的水平添加到小鼠的日糧中是否會對腎臟產生影響有待進一步的研究。
通過本研究得出烏腺金絲桃有益腎、強心的作用,但長期飼喂能夠降低肝臟指數,但其作用的機理還需進一步的研究。