前列地爾注射液有關物質檢查方法研究

秦向輝 常海民 甘莉 王彥 閆超

摘 要 目的：建立高效液相色譜方法測定前列地爾注射液中的有關物質。方法：以辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱（4.0 mm×250 mm，4 mm）、0.025 mol/L磷酸二氫鈉溶液（pH 2.5）為流動相A、乙腈為流動相B，梯度洗脫，流速1 mL/min，檢測波長200 nm，柱溫35 ℃。結果：前列地爾在0.2～1.6 mg/mL的濃度范圍內線性關系良好，檢測限為0.06 mg/mL，定量限為0.2 mg/mL，回收率為84.19%～103.30%，RSD為8.4%（n=9）。結論：前列地爾主成分色譜峰可與有關雜質完全分離，方法專屬性強，重復性好，可用于前列地爾注射劑有關物質的檢查。

關鍵詞 前列地爾 有關物質 注射劑 高效液相色譜

中圖分類號：R972.4； R917 文獻標志碼：A 文章編號：1006-1533（2021）19-0074-05

Study on the determination method for the related substances in alprostadil injections

QIN Xianghui1， CHANG Haimin2， GAN Li3， WANG Yan1， YAN Chao1[ 1. School of Pharmacy， Shanghai Jiao Tong University， Shanghai 200240， China； 2. F.B.C. （Shanghai） Pharmaceutical Technology Co.， LTD.， Shanghai 201210， China； 3. School of Chemical & Environmental Engineering， Shanghai Institute of Technology， Shanghai 201418， China]

ABSTRACT Objective： To establish an HPLC method for the determination of related substances in alprostadil injections. Methods： HPLC was run on a Merck Superspher 60 RP-Select B column （4.0 mm×250 mm， 4 μm） at the flow rate of 1 mL/min， the detection wave length of 200 nm and column temperature 35 ℃ by gradient elution using 0.025 mol/L sodium dihydrogen phosphate solution （pH 2.5） and acetonitrile as mobile phase A and B. Results： The alprostadil showed good linearity over the range of 0.2-1.6 mg/mL with detection limit 0.06 mg/mL and quantitation limit 0.2 mg/mL， recovery 84.19%-103.30% and RSD （n=9） 8.4%. Conclusion： The chromatographic peaks of main components in alprostadil can be completely separated from the related impurities. The established method is highly specific and reproducible and can be used for the inspection of related substances in alprostadil injection.

KEy wORDS alprostadil； related substances； injections； HPLC

前列地爾是廣泛存在于體內的生物活性物質[1]，前列地爾注射液是1988年在日本上市的前列地爾脂肪乳制劑[2]，臨床上主要用于治療慢性動脈閉塞癥、血栓閉塞性脈管炎、閉塞性動脈硬化癥等引起的四肢潰瘍及微小血管循環障礙引起的四肢靜息疼痛，有效改善心腦血管微循環障礙和器官移植后抗栓治療，用以抑制血栓形成，防止移植后的器官和血管內的血栓形成和血運障礙[3]。

中國藥典、美國藥典、歐洲藥典、日本藥典和國家標準（國家食品藥品監督管理局國家藥品標準WS1 -（X-041）-2002Z-2008）均未關注前列地爾注射液中可能由合成過程引入及貯存過程降解產生的各種雜質[4-8]。因此，有必要建立一套專屬性強，重復性好的有關物質檢查法，有效控制前列地爾注射液的質量。本研究參考《歐洲藥典》（EP10.1）中的前列地爾原料標準[6]，建立前列地爾注射液有關物質的檢查方法，并采用強制破壞試驗，驗證主成分與已知雜質及相鄰的未知雜質之間達到基線分離，同時對已知雜質進行定量分析（校正因子雜質D、E、F、G、H和單個雜質的校正因子分別為1.0、0.7、0.8、0.7、0.7和1.0，來源于EP10.1），最終，采用加校正因子的主成分自身對照法，對前列地爾注射液進行有關物質檢查。

1 材料和方法

1.1 試藥和試劑

前列地爾對照品（LGC GmbH公司，批號77025，含量100.2%）、雜質G對照品（EP，批號3，含量99.6%）、雜質H對照品（EP，批號3，含量按100%計）、前列地爾注射液（批號20190703，規格1 mL∶5 mg）和空白輔料溶液（批號19060601）均來自輔必成（上海）醫藥科技公司。