韋忠廳,覃培栩,高 楊
1.廣西科技大學第二附屬醫院檢驗科,廣西柳州 545001;2.柳州市婦幼保健院檢驗科,廣西柳州 545001;3.柳州市婦幼保健院輸血科,廣西柳州 545001
流感嗜血桿菌是引起兒童細菌性感染的常見病原菌,其檢出率在革蘭陰性菌中位于第3位,并且呈逐年上升趨勢[1]。流感嗜血桿菌主要寄居于人體的鼻咽部,當機體抵抗力下降時,其便可引起多種器官或組織的感染。目前,關于柳州地區兒童呼吸道感染流感嗜血桿菌的季節分布、感染兒童性別分布特點及菌株耐藥性的研究較少,為了給臨床診療及流行病學研究提供數據支撐,本研究對此進行了相關分析,現將結果報道如下。
1.1一般資料 選取2018年7月至2021年6月在柳州市婦幼保健院住院治療的年齡≤14歲的呼吸道感染患兒5 241例為研究對象,所有患兒均符合呼吸道感染的診斷標準[2],其中男1 999例,女3 242例;0~1歲1 441例,>1~3歲1 607例,>3~6歲1 118例,>6~9歲656例,>9~12歲376例,>12~14歲43例;春季就診1 237例,夏季就診1 284例,秋季就診942例,冬季就診1 778例。
1.2方法
1.2.1標本釆集 釆用一次性吸痰器從鼻腔進入,在咽部抽吸出痰液置于痰液收集器中,并于2 h內送檢。痰液標本涂片鏡檢以鱗狀上皮細胞<10個/低倍視野,白細胞>25個/低倍視野,或兩者比值<2/5視為合格,剔除不合格標本。
1.2.2流感嗜血桿菌鑒定及藥敏試驗 將痰液標本接種于血平板和巧克力平板,于35 ℃、5.0% CO2培養箱中培養18~24 h,如菌株在血平板上不生長或生長不良,而在巧克力平板上生長出灰白、濕潤、透明或半透明、中等大小的菌落,且染色鏡檢為革蘭陰性短小桿菌,則考慮為嗜血桿菌,進一步做因子篩查試驗(Ⅹ、Ⅴ、Ⅴ+Ⅹ因子),只在Ⅴ+Ⅹ因子紙片周圍生長者鑒定為流感嗜血桿菌,如結果為可疑則用VITEK2-Compact全自動細菌鑒定及藥敏分析系統、配套鑒定卡(NH卡)進一步鑒定。對檢出的流感嗜血桿菌進行藥敏試驗。質控菌株為流感嗜血桿菌ATCC 49247。
1.2.3β-內酰胺酶檢測 采用頭孢硝噻吩紙片法,將待檢菌落涂在濕潤紙片上,在規定時間內紙片變紅為陽性,不變色為陰性。
1.3統計學處理 釆用WHONET5.6軟件和SPSS20.0軟件進行數據分析。計數資料以例數或百分數表示,組間比較釆用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。
2.1病原菌分布情況 從5 241份標本中檢出流感嗜血桿菌1 179株,檢岀率為22.50%,位于所檢出病原菌的第2位;肺炎鏈球菌檢出率高于流感嗜血桿菌,為24.94%,見表1。

表1 檢出率位于前5位的病原菌
2.2不同性別、年齡及季節流感嗜血桿菌檢出情況 男性患兒中檢出流感嗜血桿菌的有477例,女性患兒中檢出流感嗜血桿菌的有702例,不同性別患兒流感嗜血桿菌檢出率比較,差異無統計學意義(P>0.05)。不同年齡患兒流感嗜血桿菌檢出率差異有統計學意義(P<0.05),其中>12~14歲年齡組檢出率低于其余各組,差異有統計學意義(P<0.05)。春季與夏季、秋季與冬季流感嗜血桿菌檢出率比較,差異無統計學意義(P>0.05),而春季、夏季流感嗜血桿菌檢出率高于秋季與冬季,差異有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 不同性別、年齡及季節流感嗜血桿菌檢出情況
2.3β-內酰胺酶陽性率 在檢出的1 179株流感嗜血桿菌中,β-內酰胺酶陽性630株,陽性率為53.44%。
2.4流感嗜血桿菌藥敏試驗結果 流感嗜血桿菌對頭孢噻肟、利福平、氧氟沙星、氯霉素、四環素的敏感率>90.0%;對氨芐西林、阿莫西林/克拉維酸、頭孢呋辛、頭孢克洛、復方磺胺甲噁唑的敏感率<50.0%,見表3。

表3 流感嗜血桿菌藥敏試驗結果(%)

續表3 流感嗜血桿菌藥敏試驗結果(%)
流感嗜血桿菌是引起兒童呼吸道感染的重要病原菌,本研究5 241份標本中,檢出流感嗜血桿菌1 179株,檢岀率為22.50%,位于所檢出病原菌的第2位。>12~14歲年齡組流感嗜血桿菌檢出率低于其余各組,差異有統計學意義(P<0.05),說明該年齡段兒童感染流感嗜血桿菌的風險較低,而0~12歲兒童是感染流感嗜血桿菌的高風險人群。但相關研究報道,5歲以下兒童的流感嗜血桿菌檢出率最高[3-4],與本研究結果略有差異,考慮與納入研究的人群及地區差異有關。年齡較小的兒童更易感染流感嗜血桿菌可能與該部分兒童機體免疫系統發育尚未成熟有關。
進一步分析不同季節流感嗜血桿菌的檢出率,結果顯示,春季、夏季流感嗜血桿菌檢出率高于秋季與冬季,差異有統計學意義(P<0.05),說明春季、夏季是流感嗜血桿菌感染的高發季節,這和賴國祥等[5]報道的冬季流感嗜血桿菌檢出率最高的結果不符,但與田俊華等[6]報道的春季流感嗜血桿菌的檢出率最高一致,不同研究間結果存在差異可能與各地的氣候、地理環境不同有關。本研究中,春季、夏季檢出率高可能與該季節柳州地區的空氣濕度較大、溫度較高,有利于流感嗜血桿菌的生長與傳播有關,也提示臨床應在春季、夏季重視兒童流感嗜血桿菌感染的防治,加強宣傳教育[7]。
本研究中,檢出的1 179株流感嗜血桿菌中β-內酰胺酶陽性率為53.44%,陽性率較高,提示臨床在治療兒童流感嗜血桿菌感染時應使用帶有酶抑制劑的抗菌藥物,但阿莫西林/克拉維酸除外(耐藥率較高)。同時藥敏試驗結果顯示,本研究檢出的流感嗜血桿菌對二代頭孢菌素頭孢呋辛和頭孢克洛的耐藥率>70%,臨床經驗性抗感染治療時應慎重選擇。此外,本研究中流感嗜血桿菌對氧氟沙星、氯霉素、四環素的敏感性高,與呂志勇[8]的研究結果類似,推測出現該結果可能與兒童具有該類藥物的使用禁忌證,臨床較少應用有關。
綜上所述,柳州地區呼吸道感染患兒中,0~12歲患兒流感嗜血桿菌的檢出率較高,春季和夏季是流感嗜血桿菌檢出率較高的季節;所檢出的流感嗜血桿菌中,產β-內酰胺酶菌株檢出率較高。在經驗性抗感染治療的基礎上積極完善藥敏試驗,合理選擇抗菌藥物是治療流感嗜血桿菌感染的關鍵。