乙肝患者HBV-DNA定量檢測與血清標志物的關系研究

金 輝 李洪杰 李肖寒

(1.天津華大醫學檢驗所 天津 300308；2.天津市海河醫院檢驗科 天津 300350)

乙型肝炎病毒(HBV)感染作為乙肝疾病的基礎病理，HBV-DNA載量與乙肝發生、發展的關系一直是臨床關注的熱點。目前，國內外諸多前沿文獻報道已經證實，HBV-DNA載量與乙肝患者肝功能損害程度及肝纖維化程度均呈正相關，臨床上通過乙肝患者HBV-DNA的定量檢測，可作為判斷患者肝功能及肝纖維化病理特點的重要依據[1]。而近年來，隨著傳染病學對乙肝疾病病理機制研究進程的不斷推進，諸多前沿文獻報道證實，氧化應激與炎癥反應在乙肝患者肝損傷中起著關鍵的作用[2]，而患者HBV-DNA載量與氧化應激、炎癥反應之間的關系亦成為臨床研究的創新點。本研究主要探討乙肝患者HBV-DNA載量與血清氧化應激標志物、炎癥反應標志物之間的關系，以期為乙肝疾病診療體系的完善提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2020年1月-2021年12月我院收治的乙肝患者120例為研究對象。病例納入標準：(1)符合乙肝診斷規范及相關標準；(2)所收集的病例資料符合本研究需要。排除標準：(1)肝炎病毒重疊感染者；(2)合并肝癌者；(3)合并其他部位感染性疾病者。其中，男70例，女50例；年齡23～72歲，平均年齡(58.24±4.25)歲；病程3～22年，平均病程(8.35±1.02)年。

1.2 方法

1.2.1HBV-DNA定量檢測

采集本組120例患者晨起、空腹靜脈血，采集量6mL，離心分離后取血清予以HBV-DNA定量檢測，檢測儀器采用熒光定量分析儀，檢測方法采用FQ-PCR。根據檢測結果，將120例患者分為低量組(HBV-DNA在0～104U/mL范圍)16例，中量組(104U/mL106U/mL)26例。

1.2.2血清氧化應激標志物檢測

參照1.2.1項下的方法，采集患者血液標本，離心分離后取血清予以氧化應激標志物檢測，包括超氧化物歧化酶(SOD，檢測方法采用化學比色法)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px，檢測方法采用化學比色法)、丙二醛(MDA，檢測方法采用TBA比色法)。

1.2.3血清炎癥反應標志物檢測

參照1.2.1項下的方法，采集患者血液標本，離心分離后取血清予以炎癥反應標志物檢測，包括腫瘤壞死因子-α(TNF-α，檢測方法采用ELISA)、白細胞介素-10(IL-10，檢測方法采用ELISA)、白細胞介素-2(IL-2，檢測方法采用ELISA)。

1.3 觀察指標

1.3.1HBV-DNA定量與Child-Pugh 評分的關系

根據檢測結果，對比分析HBV-DNA低量組、中量組、高量組患者Child-Pugh 評分，其中Child-Pugh 評分越高，提示肝功能越差。

1.3.2HBV-DNA定量與血清氧化應激標志物的關系

根據檢測結果，對比分析HBV-DNA低量組、中量組、高量組患者血清SOD、GSH-Px、MDA指標值。

1.3.3HBV-DNA定量與血清炎癥反應標志物的關系

根據檢測結果，對比分析HBV-DNA低量組、中量組、高量組患者血清TNF-α、IL-10、IL-2指標值。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 乙肝患者HBV-DNA定量與Child-Pugh評分的關系

在Child-Pugh 評分上，HBV-DNA低量組<中量組<高量組(P<0.05)，即隨HBV-DNA載量的升高，Child-Pugh 評分隨之升高，見表1。

表1 乙肝患者HBV-DNA定量與與Child-Pugh 評分的關系

2.2 HBV-DNA定量與血清氧化應激標志物的關系

在血清SOD、GSH-Px指標值上，HBV-DNA低量組>中量組>高量組(P<0.05)；在血清MDA上，HBV-DNA低量組<中量組<高量組(P<0.05)。Spearman相關性分析，乙肝患者HBV-DNA定量與血清SOD、GSH-Px呈負相關(r=-0.524、-0.665，P=0.017、0.013)，HBV-DNA定量與血清MDA呈正相關(r=0.656，P=0.009)，見表2。

表2 乙肝患者HBV-DNA定量與血清氧化應激標志物的關系

2.3 HBV-DNA定量與血清炎癥反應標志物的關系

在血清TNF-α、IL-10指標值上，HBV-DNA低量組<中量組<高量組(P<0.05)；在血清IL-2上，HBV-DNA低量組>中量組>高量組(P<0.05)。Spearman相關性分析，乙肝患者HBV-DNA定量與血清TNF-α、IL-10呈正相關(r=0.786、0.713，P=0.007、0.08)，HBV-DNA定量與血清IL-2呈負相關(r=-0.562，P=0.004)，見表3。

表3 乙肝患者HBV-DNA定量與血清炎癥反應標志物的關系

3 討論

HBV-DNA定量檢測作為乙肝檢驗醫學項目的重要組成部分，近年來從最初的免疫學檢測發展到今天的核酸檢測，其靈敏度和精確度均得到明顯提高。2021年，《中國慢乙肝防治指南》強調了HBV-DNA定量檢查在實現乙肝治愈目標中的價值，其不僅是監測HBV病毒感染復制水平的客觀指標，更是乙肝抗病毒治療適應證判斷及療效評估的可靠標準[3]。近年來，隨著臨床醫學對HBV-DNA定量檢測與乙肝病理特征之間關系研究的不斷深入，國內外諸多前沿文獻從肝功能、肝硬化、肝纖維化等方面探討了 HBV-DNA定量在乙肝疾病發生、發展機制中的參與作用，HBV-DNA定量與乙肝患者肝損傷程度呈正相關性已得到臨床一致認可[4]。本研究中，在Child-Pugh 評分上，HBV-DNA低量組<中量組<高量組(P<0.05)，即隨HBV-DNA載量的升高，Child-Pugh 評分隨之升高，肝損傷程度隨之加重，與文獻報道一致。HBV病毒感染所造成的肝損傷機制一直是臨床研究的重點。本研究主要從分析乙肝患者HBV-DNA定量與血清氧化應激標志物、炎癥反應標志物的關系，探討HBV病毒經氧化應激途徑、炎癥反應途徑參與肝損傷的機制。研究結果顯示：

SOD為抗氧化因子，GSH-Px為過氧化物分解酶，MDA為氧化應激重要的產物，Spearman相關性分析，乙肝患者HBV-DNA定量與血清SOD、GSH-Px呈負相關，HBV-DNA定量與血清MDA呈正相關，即隨HBV-DNA定量的升高，機體氧化應激反應程度隨之加重。據相關研究報道強調，機體氧化應激反應會誘發肝脂質過氧化，并誘導肝細胞損傷和凋亡，進而加重肝損傷。而HBV的S或者前S蛋白可通過內質網、線粒體途徑引發二者發生功能障礙，并導致氧化應激刺激。因此，HBV是誘發氧化應激反應并造成肝損傷的重要介質，且隨乙肝患者HBV-DNA載量的升高，其氧化應激刺激越劇烈，肝損傷越嚴重[5-6]。因此，臨床上通過對乙肝患者HBV-DNA定量的檢測，可為機體氧化應激反應程度的判斷提供參考，并指導臨床針對性的干預措施以抗氧化應激，減輕肝損傷程度。

TNF-α、IL-10均為重要的炎癥反應介質，IL-2為炎癥反應抑制因子，本研究中Spearman相關性分析顯示，乙肝患者HBV-DNA定量與血清TNF-α、IL-10呈正相關，與血清IL-2呈負相關，即隨HBV-DNA定量的升高，機體炎癥反應程度隨之加重。臨床上，機體炎癥反應的發生導致中性粒細胞、巨噬細胞等在肝臟組織逐步侵潤和激活，容易引發過度炎癥級聯反應，造成肝細胞的損傷及死亡，導致患者肝功能下降[7]。而從病理、生理來講，HBV侵入肝臟后大量復制，激活機體免疫反應，是導致大量炎癥介質釋放，誘發炎癥反應的重要因子[8]。因此，乙肝患者隨機體HBV-DNA載量的升高，炎癥反應逐趨劇烈，肝損傷程度逐漸加重。因此，臨床上通過對乙肝患者HBV-DNA定量的檢測，可為機體炎癥反應程度的判斷提供參考，并通過抗炎干預以預防肝功能進行性損傷。

綜上所述，隨乙肝患者HBV-DNA定量的升高，機體氧化應激反應及炎癥反應程度加重，造成肝功能損傷。臨床上通過對乙肝患者HBV-DNA定量的檢測，可用以判斷機體氧化應激反應程度和炎癥反應程度，進而采取針對性的抗氧化應激及抗炎干預，以減輕患者肝損傷程度，改善預后。