基于指紋圖譜和網絡藥理學預測丹楂通脈丸藥效物質基礎

〔摘要〕 目的 建立丹楂通脈丸的指紋圖譜，利用化學計量學分析色譜峰貢獻率，結合網絡藥理學方法預測其藥效物質基礎。方法 采用Agilent C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），檢測波長280 nm，流動相0.1%磷酸水-乙腈，流速1.0 mL·min-1，梯度洗脫，建立丹楂通脈丸甲醇提取物指紋圖譜。利用網絡藥理學篩選相關成分的靶點和通路，構建“成分-靶點-通路”網絡，對丹楂通脈丸潛在的藥效物質與關鍵靶點進行分子對接驗證。通過體外實驗驗證潛在的藥效物質的抗炎活性。結果 10批樣品指紋圖譜中有15個共有峰，2個特征峰被指認，分別為丹酚酸B和丹酚酸A。網絡藥理學分析表明，丹酚酸B和丹酚酸A是丹楂通脈丸發揮活性作用的有效成分，預測其可作為丹楂通脈丸的主要藥效物質。體外細胞實驗證明，與模型組比較，丹酚酸B高、中、低劑量組NO釋放量均明顯降低（Plt;0.01），丹酚酸A高劑量組NO釋放量顯著下降（Plt;0.01），具有一定的抗炎活性。結論 通過指紋圖譜和網絡藥理學預測丹楂通脈丸藥效物質，為丹楂通脈丸質量的全面控制和評價提供了科學依據。

〔關鍵詞〕 丹楂通脈丸;高效液相色譜;指紋圖譜;網絡藥理學;分子對接;藥效物質

〔中圖分類號〕R284.1" " " " "〔文獻標志碼〕A" " " " " 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2024.08.004

Predicting the pharmacodynamic material basis of Danzha Tongmai Pill based on fingerprint and network pharmacology

LIU Hui1，2，3， ZHANG Heng1， TAO Yeqin2，3， NIE Ge1，2，3， OUYANG Wen1，2，3*

1. Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China; 2. Liuyang Hospital of Chinese Medicine， Liuyang， Hunan 410300， China; 3. The Second Hospital of Integrative Medicine of Hunan University of Chinese Medicine， Liuyang， Hunan 410300， China

〔Abstract〕 Objective To establish the fingerprint of Danzha Tongmai Pill （DZTMP）， and to analyze the contribution rate of chromatographic peaks using chemometrics， and predict its pharmacodynamic material basis combined with network pharmacology methods. Methods Using a Agilent C18 chromatographic column （250 mm×4.6 mm， 5 μm） with a detection wavelength of 280 nm， a mobile phase of 0.1% phosphoric acid water-acetonitrile， a flow rate of 1.0 mL·min-1， and gradient elution， the fingerprint of the methanol extract of DZTMP was established. Using network pharmacology to screen relevant component targets and pathways， a \"component-target-pathway\" network was constructed， and molecular docking verification was performed on the potential pharmacodynamic materials and key targets of DZTMP. The anti-inflammatory activity of potential pharmacodynamic materials was verified through in vitro experiments. Results Among the fingerprint spectra of 10 batches of samples， there were 15 common peaks， with two characteristic peaks identified as salvianolic acid B and salvianolic acid A. Network pharmacology analysis indicated that salvianolic acid B and salvianolic acid A were the active components responsible for the efficacy of DZTMP， and they were predicted to be the main pharmacodynamic material basis of the medicine. In vitro cell experiments demonstrated that， compared with the model group， the NO release in the high-， medium-， and low-dose salvianolic acid B groups was significantly reduced （Plt;0.01）， and the NO release in the high-dose salvianolic acid A group was also significantly decreased （Plt;0.01）， indicating certain anti-inflammatory activity. Conclusion Predicting the pharmacodynamic material basis of DZTMP through fingerprint spectra and network pharmacology provides a scientific basis for the comprehensive control and evaluation of the quality of DZTMP.

〔Keywords〕 Danzha Tongmai Pill; HPLC; fingerprint; network pharmacology; molecular docking; pharmacodynamic materials

丹楂通脈丸為瀏陽市中醫醫院的院內制劑，由酒丹參、山楂、三七、西洋參四味中藥組成，具有活血祛瘀、化痰通絡的功效，用于治療痰瘀阻滯所致的心腦血管疾病。方用丹參“生新血，去惡血”，長于活血祛瘀，主含丹參酮、水溶性丹參素、丹酚酸和揮發油等有效成分;山楂“消積化痰，行氣散瘀”，現代醫學證實其降脂作用較強，可化痰降濁、行氣散瘀，主含黃酮類、有機酸類、多糖類等有效成分。二藥共用行活血化瘀、化痰降濁之功，合為君藥。三七助君藥活血化瘀通脈，為臣藥。西洋參補元氣，生津血，使君臣逐痰瘀而不傷正，益氣血以助血行，為佐使。縱觀全方，攻補兼施，標本兼治，選藥性味平和，不溫不燥，切中痰瘀致病之要害，使痰瘀得化，氣血宣達，血脈通暢，共奏活血散瘀，化痰通絡之功效。本品在瀏陽市中醫醫院使用10余年，因具有良好的臨床療效，年使用量達數萬瓶，銷售金額達百萬元以上，大批患者受益，但其作用機制尚未闡明，且暫時缺乏統一的質量控制標準，不利于該制劑的全面推廣應用。

中藥指紋圖譜通過對化學成分的整體把控，更加直觀地了解中藥材及制劑的成分信息，從而全面、準確地評價藥物的內在質量。網絡藥理學綜合了多項學科的技術和內容，從生物網絡和系統層次的整體角度，通過研究藥物、靶點、疾病的相互關系，闡釋藥物作用機制和疾病發生發展規律，為藥物的主要藥效物質提供理論支持[1]。本研究嘗試對丹楂通脈丸指紋圖譜和網絡藥理學進行研究，初步確定其藥效物質基礎，為控制丹楂通脈丸的質量提供科學依據，推動該制劑服務于更多的患者。

1 材料

SHIMADZU高效液相色譜儀（島津科技有限公司）;ME204E型萬分之一天平（梅特勒托利多儀器有限公司）;SB-5200DTD型超聲清洗儀（寧波新芝生物科技股份有限公司）。

丹楂通脈丸樣品10批（批號：S1-210323、S2-210325、S3-210511、S4-210714、S5-211204、S6-220?405、S7-220409、S8-220613、S9-220618、S10-220822），由瀏陽市中醫醫院提供。對照品丹酚酸A（含量為測定用，批號96574-01-5）與對照品丹酚酸B（含量為測定用，批號121521-90-2），購于成都植標化純生物技術有限公司。色譜甲醇與乙腈均購于安徽天地高純溶劑有限公司，磷酸（分析純，天津市恒興化學試劑制造有限公司），超純水。

細胞株RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞株（武漢普諾賽科技有限公司，貨號：CL-0190）;RAW264.7細胞專用培養基（武漢普諾賽公司，貨號：CM-0190）;脂多糖（美國Sigma公司，貨號：L8274）;CCK-8試劑盒（武漢伊萊瑞特生物公司，貨號：E-CK-A362）;Griess試劑盒（上海源葉生物科技有限公司，批號：D11IR234770）;地塞米松（上海麥克林公司，批號：C12912459）;96孔細胞培養板、6孔細胞培養板、T25培養瓶（浙江賽寧生物科技有限公司，貨號：1014300、1010300、1030010）;NO檢測試劑盒（上海碧云天生物技術有限公司，批號：110922230515）;75%醫用酒精（山東安捷高科消毒科技有限公司，批號：20230503）。

2 方法

2.1" 指紋圖譜的建立

2.1.1" 色譜條件" Agilent C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）;檢測波長280 nm;柱溫30 ℃;流速為1.0 mL/min;進樣量20 μL;流動相為0.1% 磷酸水（A）-乙腈（B），丹楂通脈丸梯度洗脫程序：0～10 min，10%～ 20% B;10～20 min，20%～25% B;20～40 min，25%～30% B;40～60 min，30%～55% B;60～80 min，55%～75% B;80～90 min，10% B。

2.1.2" 對照品溶液的制備" 精密稱取丹酚酸A、丹酚酸B適量，加甲醇溶解，制成質量濃度為0.05、0.32 mg/mL的混合對照品溶液，備用。

2.1.3" 供試品溶液的制備" 精密稱定丹楂通脈丸1.00 g置于帶塞錐形瓶中，加入甲醇10 mL，密封，40 kHz超聲提取90 min，提取液濃縮蒸干，加甲醇至5 mL容量瓶中定容，搖勻后過0.45 μm微孔濾膜，即得。

2.2" 網絡藥理學分析

2.2.1" 丹楂通脈丸有效成分篩選" 利用傳統TCMSP數據庫和ETCM數據庫檢索丹楂通脈丸的主要活性成分，設置藥代動力學參數的篩選條件為藥物相似性（drug-likeness，DL）≥0.18、口服利用度（oral bioavailability，OB）≥30%，滿足條件的化學成分納入為丹楂通脈丸的有效成分。

2.2.2" 丹楂通脈丸潛在靶點預測、動脈粥樣硬化靶點篩選" 通過TCMSP數據庫查詢丹楂通脈丸主要活性成分所對應的靶點[2-5]，在Uniprot數據庫查詢靶點對應的基因名，設置物種為“Homo sapiens（人類）”，建立數據集，統一將靶點名稱對應Uniprot數據集轉換為基因名。接著檢索GeneCards在線數據庫，設置關鍵詞為“atherosclerosis”，得到抗動脈粥樣硬化（atherosclerosis， AS）相關靶點的數據集。運用TBtools軟件的“Graphics Venn”功能，提取藥物和疾病相交靶點，即丹楂通脈丸治療動脈粥樣硬化的潛在作用靶點。

2.2.3" 丹楂通脈丸蛋白質-蛋白質相互作用（protein-protein interaction， PPI）網絡的構建" 使用STRING在線數據庫，將丹楂通脈丸治療動脈粥樣硬化的潛在作用靶點導入后取得PPI網絡[5-6]，設置物種為“人類”，置信度為0.400，運行Cytoscape 3.9.0中CytoNCA插件中的Degree值算法，將得分在前30個潛在核心靶點導入STRING數據庫，設置物種為“人類”，置信度為0.900，得到丹楂通脈丸潛在核心靶點蛋白的PPI網絡。

2.2.4" “藥材-成分-靶點”網絡構建與分析" 將“藥材-成分”和“成分-靶點”信息導入Cytoscape3.9.0[5]，繪制出“藥材-成分-靶點”網絡圖。在網絡圖中用節點表示藥材、成分、靶點，兩個節點間用邊表示相互作用。

2.2.5" “核心靶點-活性成分”網絡構建" 將篩選得到的核心靶點與相應的活性成分匹配[5]，運用Cytoscape3.9.0繪制“核心靶點-活性成分”網絡圖。

2.2.6" 丹楂通脈丸GO功能和KEGG通路富集分析

將丹楂通脈丸核心靶點信息導入DAVID Bioinformatics Resources 6.8在線分析平臺進行GO功能和KEGG通路富集分析[5]，分別列出P值從小到大前10位富集結果。

2.2.7" 丹楂通脈丸活性成分和核心靶點分子對接驗證" 使用PDB數據庫下載得到核心靶點蛋白的三維結構。使用PubChem在線數據庫下載獲得活性成分的三維結構圖[7]。接著通過Open Babel-2.4.1軟件得到PDB格式的活性成分的三維結構圖[5]。將準備的靶點蛋白與活性成分，在Autodock 4.2.6軟件中進行前處理后，在Autodocking中與小分子進行對接，使用Auto工具計算成分與靶蛋白的對接結合能，再通過Pymol程序將對接結果可視化。

2.3" 丹酚酸A、丹酚酸B體外抗炎活性研究

采用LPS誘導的小鼠巨噬細胞炎癥模型評價丹楂通脈丸中丹酚酸A及丹酚酸B的體外抗炎活性。將RAW 264.7細胞以8×104個/孔進行96孔板的鋪板，每孔200 μL，置37 ℃、5% CO2培養箱中培養24 h。

將原培養液棄去，設置空白組、模型組（含LPS 1 μg/mL）、丹酚酸B高、中、低劑量組（80、50、20 μmol/L）、丹酚酸A高、中、低劑量組（10、5、1 μmol/L）及地塞米松組（5 μg/mL）。

各組相應藥物或培養基孵育24 h后，取各組上清液100 μL，加入Griess試劑100 μL，在波長550 nm處的酶標儀上測定各孔的吸光度值（OD值），根據標準曲線測定NO釋放量（μmol/L）。

2.4" 數據處理

實驗數據均用“x±s”表示，采用SPSS 21.0統計軟件對數據進行顯著性差異分析，組間比較采用單因素方差分析，Plt;0.05表示差異具有統計學意義。

3 結果

3.1" 方法學考察

3.1.1" 參照峰的選擇" 在丹楂通脈丸HPLC指紋圖譜中，丹酚酸B為君藥丹參的主要活性成分之一，且其色譜峰穩定、保留時間及峰面積適中、分離度較好，因此選擇參照峰為丹酚酸B。

3.1.2" 精密度實驗" 取同一供試品（S5），根據“2.1.1”項中色譜條件，連續進樣6次，采用丹酚酸B的保留時間和峰面積作為對照，結果顯示各共有峰的相對保留時間RSDlt;1.24%，相對峰面積RSDlt;3.00%，說明儀器精密度良好。

3.1.3" 重復性實驗" 取同一批次丹楂通脈丸（S5）6份，按照“2.1.3”項中方法制備供試品溶液，采用“2.1.1”項中色譜條件進樣分析，以丹酚酸B的保留時間和峰面積作為對照，結果各共有峰的相對保留時間RSDlt;1.24%，相對峰面積RSDlt;2.73%，說明該方法重復性良好。

3.1.4" 穩定性實驗" 取同一供試品（S5），根據“2.1.1”項中色譜條件，分別在0、4、8、12、24、48 h進樣，記錄峰面積，以丹酚酸B的保留時間和峰面積作為對照，結果各共有峰的相對保留時間RSDlt;1.51%，相對峰面積RSDlt;2.93%，說明樣品溶液在48 h內穩定。

3.2" 指紋圖譜的建立及相似度評價

取10批次丹楂通脈丸樣品，按照“2.1.3”項中方法制備供試品溶液，采用“2.1.1”項中色譜條件進樣分析，得到相應色譜圖。使用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統軟件（2012年版）[8-10]，以S5-211204樣品圖譜為參照圖譜，運用平均數法，設時間窗寬度為0.5 min，得到10批丹楂通脈丸的疊加指紋圖譜，見圖1。

3.2.1" 丹楂通脈丸相似度分析" 將10批丹楂通脈丸（S1～S10）的指紋圖譜，同時導入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統軟件2012版》[11-13]，依次計算樣品與對照圖譜相比的相似度，結果分別為0.997、0.889、0.999、0.296、0.995、0.743、0.997、0.988、0.861、0.997。其中，S4與對照圖譜的相似度較低，對比S4的高效液相色譜圖發現，S4號樣品中丹酚酸B的色譜峰峰面積偏低，而其他共有峰的峰面積偏高，是導致該樣品相似度降低的主要原因。除S4號樣品外，其他樣品相似度均在0.7以上，說明丹楂通脈丸的指紋圖譜相似度良好。S4號樣品相似度較低，其可能原因與生產該批次所采用的原藥材有關。

3.2.2" 共有峰的指認及相關分析" 使用指紋圖譜軟件分析丹楂通脈丸10批樣品的疊加指紋圖譜，通過對比各批樣品中色譜峰與參照峰的相對保留時間，在10批樣品中共確定15個共有峰[14]，詳見圖2。與混合對照品圖譜對比，共指認了2個共有峰，分別是丹酚酸B和丹酚酸A，詳見圖3。

3.3" 丹楂通脈丸網絡藥理學分析

3.3.1" 有效成分及靶點篩選" 丹楂通脈丸經篩選共有91個潛在成分，其中丹參65個、山楂8個、三七8個、西洋參11個。其中，三七、西洋參共有成分2個，分別命名為A、B;三七、山楂共有成分1個，命名為C。丹楂通脈丸潛在活性成分篩選結果詳見表1。

通過Cytoscape 3.9.0將以上成分及對應的靶點繪制“成分-靶點”網絡，丹楂通脈丸“成分-靶點”網絡圖如圖4所示，其中，丹參對應122個靶點，山楂對應172個靶點，三七對應167個靶點，西洋參對應55個靶點，將各藥材重復靶點去除后匯總，最終丹楂通脈丸共含232個靶點。

3.3.2" 丹楂通脈丸抗動脈粥樣硬化作用靶點預測" 通過GeneCards數據庫檢索得到4 073個AS相關靶點，其中186個為與丹楂通脈丸有交集的潛在作用靶點。詳見圖5。

3.3.3" 丹楂通脈丸抗動脈粥樣硬化潛在作用靶點PPI網絡的構建" 將上述186個交集靶點全部導入STRING在線數據庫，得到靶點間的相互作用關系，在置信度為0.4的中等條件下，網絡中含有節點186個，相互作用關系3 881條。將STRING數據庫PPI網絡導出后，通過Cytoscape 3.9.0軟件中的CytoNCA插件，進行degree值算法分析。丹楂通脈丸的核心靶點為degree值排名前30的靶點，依次為絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（serine/threonine-protein kinase， AKT1， degree=133）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor， TNF， degree=121）、白細胞介素-6（interleukin-6， IL-6， degree=117）、抑癌基因p53（tumor suppressor gene p53， TP53， degree=115）、胰島素（insulin， INS， degree=114）、血管內皮生長因子A（vascular endohtelial growth factor-A， VEGF-A， degree=112）等。將上述30個靶點全部導入STRING數據庫，設置物種為“Homo sapiens”，置信度為0.900，得到丹楂通脈丸核心靶點的PPI網絡，詳見圖6。

3.3.4" 丹楂通脈丸“核心靶點-活性成分”網絡構建

將丹揸通脈丸核心靶點匹配對應的活性成分，得到“核心靶點-活性成分”網絡圖，詳見圖7。

3.3.5" GO及KEGG通路富集分析" 通過DAVID在線分析平臺，進行GO功能富集分析，得到與生物學過程（biological process，BP）有關的GO條目328條，分子功能（molecular function， MF）通路富集相關GO條目47條，細胞組分（cellular component， CC）通路富集相關GO條目23條，篩選出GO-BP、GO-MF、GO-CC結果中Plt;0.05且排名前10的條目，繪制柱形圖，詳見圖8。

其中，GO-BP富集結果表明，丹楂通脈丸抗動脈粥樣硬化的機制可能與DNA模塊轉錄正調控、RNA聚合酶Ⅱ啟動子轉錄的正調控、強化基因表達、信號傳導以及對細胞凋亡的調控等生物學過程密切相關。GO-MF富集結果表明，丹楂通脈丸抗AS的機制可能與蛋白質結合、相同的蛋白質結合、轉錄因子、活性酶結合、序列特異性DNA結合以及RNA聚合酶Ⅱ核心啟動子近端區域序列特異性DNA結合等分子功能相關[17-18]。GO-CC富集結果表明，丹楂通脈丸抗AS的機制可能與細胞核、細胞質、細胞溶質、核質以及細胞外隙等細胞組分相關。

共得到146條KEGG富集條目，篩選條件Plt;0.05，取排名前10的條目，得到KEGG通路富集結果，見圖9。該通路結果表明丹楂通脈丸抗AS可能與癌癥通路、病毒感染、糖尿病并發癥中的AGE-RAGE信號通路以及TNF信號通路等緊密相關。

3.3.6" 丹楂通脈丸分子對接驗證結果" 利用AutoDock軟件，將丹楂通脈丸的活性成分丹參酮ⅡA、丹酚酸B等，分別與核心靶點蛋白AKT1、TNF等，進行分子半柔性對接驗證，結果采用圖片的形式進行可視化展示。其分子對接結果見表2，其中AKT1蛋白、TNF蛋白、TP53蛋白與丹酚酸B對接結合能均小于-30 kJ·mol-1，結合能分別為-31.67、-33.51、-31.51 kJ·mol-1。通過Pymol程序將對接結果可視化輸出，結果見圖10。丹楂通脈丸核心靶點蛋白與活性成分的對接結合能均為負數，表明進行分子對接的受體與配體間自發緊密結合，丹楂通脈丸篩選所得的活性成分與核心靶點具有較強的對接親和力，結果表明丹楂通脈丸抗動脈粥樣硬化作用可能是通過調節以上核心靶點產生，符合網絡藥理學機制預測。

3.4" 丹酚酸A、丹酚酸B體外抗炎活性研究結果

與空白組相比，模型組NO釋放量顯著升高（Plt;0.01），說明LPS誘導的小鼠巨噬細胞炎癥造模成功;與模型組相比，丹酚酸B高、中、低劑量組NO釋放量均劑量依賴性降低（Plt;0.01）。與模型組相比，丹酚酸A高、中、低劑量組NO釋放量均劑量依賴性降低，但只有高劑量組差異有統計學意義（Plt;0.01）。詳見表3。

4 討論

丹楂通脈丸是我院研制的治療AS的獨具特色專科、專病中藥復方制劑，在我院應用多年，臨床療效顯著，毒副作用少。本研究采用指紋圖譜和網絡藥理學技術相結合方法，對丹楂通脈丸藥效物質基礎進行預測分析。近年來，隨著各類中藥與化學成分數據庫的發展，網絡藥理學對于數據篩選的要求更加科學化、規范化[19-22]。為確保數據的可靠性，本研究對文中的數據進行了多次溯源確認與重復考察，并結合數據庫與相關文獻，以提高網絡藥理學部分數據的規范性。

中藥成分復雜，單一成分難以評價中藥整體質量，而指紋圖譜具有整體性特點，是目前中藥制劑質量一致性評價的有效手段[23-24]。本研究建立了10批丹楂通脈丸指紋圖譜，共確認15個共有峰，對丹酚酸B、丹酚酸A的色譜峰進行指認，同時對其方法學進行考察，其精密度、穩定性和重復性（RSDlt;3.0%）符合要求，表明此方法準確可靠。綜上所述，丹酚酸B、丹酚酸A可作為丹楂通脈丸潛在的質量標志物，為建立和完善丹楂通脈丸質量控制體系提供了參考依據。

采用網絡藥理學方法對丹楂通脈丸進行藥效成分篩選與靶點預測，本研究篩選丹楂通脈丸潛在有效成分91個，“成分-靶點”有232個，與抗AS的相關潛在靶點186個，構建PPI網絡中有節點186個，相互作用關系3 881條。本研究發現，靶點蛋白AKT1、TNF、IL-6、TP53、INS、VEGF-A等排名前30位的degree值高于72，說明上述靶標蛋白作為關鍵靶點參與調控抗AS信號通路[25]。AKT1參與調節內皮型一氧化氮合成酶及一氧化氮生成，具有調節細胞增殖和生長、調控炎性反應等作用，可有效治療和預防AS疾病。TNF、 IL-6為促炎細胞因子，可加速血管平滑肌細胞增殖;TP53 調節巨噬細胞的脂質代謝;上述蛋白影響AS發展進程，如能有效抑制它們的表達，對AS的防治有積極意義。INS直接影響血糖的控制，研究表明糖尿病患者的主要死亡原因是以AS為病理基礎的大、中動脈病變。VEGF-A通過與血管內皮細胞上的酪氨酸蛋白激酶受體結合，具有促進內皮細胞分化、血管新生等作用，該作用在VEGF家族中是最強的，可在治療心血管疾病中起到關鍵作用[26]。對丹楂通脈丸進行GO和KEGG富集分析，選取BP、MF、CC及KEGG各富集通路前10個條目進行富集可視化繪制，相對明確了丹楂通脈丸抗AS的機制是依靠多成分、多靶點、多途徑共同實現的。通過對丹楂通脈丸篩選所得的活性成分與核心靶點進行分子對接，具有較強的對接親和力，說明丹楂通脈丸可能是通過調節AKT1、TNF、IL-6、TP53、INS等靶點蛋白來發揮抗AS的作用，與網絡藥理學機制預測結果一致。

現代研究表明，AS斑塊的構成與炎癥反應密不可分，炎癥反應在動脈內壁引起損傷和炎癥介質的釋放，導致血管內皮細胞受損、白細胞浸潤、血小板聚集等炎癥效果，最終形成動脈粥樣斑塊[27]。控制炎癥反應的發生發展可以減少斑塊形成、穩定斑塊、降低血栓形成風險，改善血管功能，從而起到治療動脈粥樣硬化的效果[28-29]。相關文獻表明，丹參酮ⅡA具有抑制炎癥反應的作用，可以減少炎癥介質的釋放和炎癥反應的程度，有助于緩解炎癥相關疾病如關節炎、動脈粥樣硬化等[30]。體外實驗結果顯示，丹楂通脈丸中丹酚酸A與丹酚酸B具有良好的抗炎活性，與網絡藥理學預測相一致，說明丹楂通脈丸可能通過抑制炎癥反應的發生發展從而產生抗動脈粥樣硬化作用。

綜上分析，丹酚酸B和丹酚酸A是丹楂通脈丸發揮活性作用的有效成分，本研究為進一步完善了該制劑的質量控制體系奠定了科學的依據。通過本次研究，分析丹楂通脈丸治療AS的活性成分、作用核心靶點及分子對接機制，對丹楂通脈丸治療AS機制做出了整體性預測，為其臨床治療及進一步的科學研究提供參考和依據。

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〔收稿日期〕2023-11-30

〔基金項目〕湖南省普通高等學校教學改革研究項目（HNJG-2021-0577）; 湖南中醫藥大學中藥學一流建設學科項目（校行科字〔2018〕3 號）;湖南省中醫藥管理局基金項目（B2024135）;湖南中醫藥大學校級科研基金項目（2022XYLH071）。

〔通信作者〕*歐陽文，男，副教授，碩士研究生導師，E-mail：oyw810225@126.com。