頂空-氣相色譜法測定植物油中溶劑殘留的不確定度評估

摘 要：頂空-氣相色譜法是測定食用植物油中溶劑殘留量的標(biāo)準(zhǔn)方法，評估其測量不確定度，建立數(shù)學(xué)模型，客觀分析不確定度的來源，為分析溶劑殘留量檢測結(jié)果的可靠性提供參考。結(jié)果表明，植物油中溶劑殘留量的檢測結(jié)果為47.4mg·kg-1，測量不確定度為±3.6 mg·kg-1（k=2），分析不確定度來源發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)曲線的變動性對檢測結(jié)果有較大影響。因此，在檢測過程中應(yīng)選擇精度較高的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，使用經(jīng)檢定合格有效的計量器具配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，對檢測過程中涉及的儀器器具按時檢定和期間核查，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

關(guān)鍵詞：溶劑殘留量，不確定度，頂空-氣相色譜

DOI編碼：10.3969/j.issn.1002-5944.2024.22.034

0 引 言

植物油作為補充人體熱量的必要來源，是百姓生活中必備的一種烹飪食物。由于食用植物油含有維生素、多種礦物質(zhì)以及脂肪酸等，其消費需求量增長強勁[1]。食用植物油的生產(chǎn)工藝主要有物理壓榨法和溶劑浸出法。物理壓榨法是利用物理方法從原料中直接榨油，但壓榨后的原料會繼續(xù)使用抽提溶劑提取油脂，溶劑油和壓榨油混合后再去除溶劑。溶劑浸出法是利用化學(xué)上的相似相容原理，用易揮發(fā)的有機溶劑作為浸提溶劑，從油料作物中直接提取植物油脂，是目前最為高效的加工工藝。無論是物理壓榨法還是溶劑浸出法，萃取劑都可能在成品油中殘留[2-3]。六號溶劑是以上兩種植物油生產(chǎn)工藝中主要使用的萃取劑，主要成分是正己烷為主的C6～C8烴類混合物質(zhì)[4-6]。長期食用溶劑殘留量過高的植物油會導(dǎo)致神經(jīng)中毒，麻醉呼吸中樞以及破壞人體的皮膚屏障功能[7-8]。急性中毒時，人體有惡心、頭痛、暈眩、輕度麻醉等狀況[9]。溶劑殘留量是食用油強制性質(zhì)量檢測標(biāo)準(zhǔn)之一，GB 2716—2018《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物油》[10]規(guī)定由浸出工藝生產(chǎn)的植物油（包括調(diào)和油）溶劑殘留量≤20mg·kg-1，壓榨油溶劑殘留量不得檢出。國家食品安全風(fēng)險評估中心綜合考慮了植物油的實際食用情況和加工工藝等數(shù)據(jù)后進行了更加嚴(yán)格的規(guī)定[11]。通過評定溶劑殘留量檢測結(jié)果的測量不確定度，分析出造成可疑結(jié)果的環(huán)節(jié)，規(guī)范操作，提高檢測結(jié)果的可信度，為臨界值判定提供依據(jù)[12]。

本文依據(jù)JJF 1059.1—2012《測量不確定度評定與表示》[13]、JF 1135—2005《化學(xué)分析測量不確定度評定》[14]、CNAS-GL006—2019《化學(xué)分析中不確定度的評估指南》[15]和GB 5009.262—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中溶劑殘留量的測定》[16]，分析頂空-氣相色譜法測量食用植物油中溶劑殘留量的不確定度來源，進行科學(xué)合理評估，為實驗室提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性提供可靠的支持，減小測量不確定度主要來源對測量結(jié)果的影響。

1 實驗方法

1.1 儀器

氣相色譜儀（ 配有氫火焰離子化檢測器）Clarus500，美國PerkinElmer公司；頂空自動進樣器TurboMatrix HS 40，配標(biāo)準(zhǔn)20 mL頂空瓶，美國PerkinElmer公司；電子天平AL104-IC，瑞士梅特勒。

1.2 試劑

六號溶劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：國家糧食局科學(xué)研究院；正庚烷：優(yōu)級純，山東西亞化學(xué)股份有限公司；N，N-二甲基乙酰胺：優(yōu)級純，天津天泰精化化學(xué)品有限公司。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

精確移取1 mL正庚烷于10 mL容量瓶中，迅速加入 N，N-二甲基乙酰胺定容至刻度，得到正庚烷內(nèi)標(biāo)溶液。

精確稱取5.0 g（精確到0.01 g）基體植物油到20 mL頂空進樣瓶中6份，使用微量注射器迅速向每份基體植物油中加入5μL正庚烷內(nèi)標(biāo)溶液（內(nèi)標(biāo)含量68 mg·kg-1），微搖混勻后，微量注射器迅速加入0、5、10、25、50、100 μL標(biāo)準(zhǔn)值為10 mg·mL-1的六號溶劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，密封后，保持頂空進樣瓶直立，用漩渦混合器使其充分混合，得到濃度分別為0、10、20、50、100、200 mg·kg-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。以標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與內(nèi)標(biāo)物濃度比為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)總峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積比為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3.2 樣品處理

準(zhǔn)確稱取植物油樣品5 g（精確至0.01 g）于20mL頂空進樣瓶中，微量注射器迅速向樣品中加入5μL正庚烷內(nèi)標(biāo)溶液（內(nèi)標(biāo)含量68 mg·kg-1），密封后，保持頂空進樣瓶直立，用漩渦混合器使其充分混合。

2 數(shù)學(xué)模型

依據(jù)實驗原理建立數(shù)學(xué)模型：

C =68X （ 1）

式中：C為樣品中溶劑殘留的含量，mg·kg-1；X為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液六號溶劑的濃度與內(nèi)標(biāo)物濃度比；68為樣品中內(nèi)標(biāo)物的含量，mg·kg-1。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線變動性引入的不確定度分量

以標(biāo)準(zhǔn)溶液與內(nèi)標(biāo)物濃度比為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液總峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積比為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線進行線性擬合得到校準(zhǔn)曲線方程如下：

Y=0.101X-0.002（12）

標(biāo)準(zhǔn)曲線的測量數(shù)據(jù)見表1。

使用殘差法計算標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率的不確定度分量，由標(biāo)準(zhǔn)曲線變動性導(dǎo)致的樣品不確定度分量可用標(biāo)準(zhǔn)曲線上樣品校準(zhǔn)強度處濃度測量的標(biāo)準(zhǔn)偏差S 表示，根據(jù)計算公式：

式中：u （S ）為標(biāo)準(zhǔn)曲線變動性導(dǎo)致的樣品不確定度；S 為標(biāo)準(zhǔn)曲線上樣品校準(zhǔn)強度處濃度測量的標(biāo)準(zhǔn)偏差；SA為校準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)差；X0為由標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求得的樣品溶液中六號溶劑與內(nèi)標(biāo)物濃度比的平均值；p為標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定次數(shù)；b為校準(zhǔn)曲線的斜率；a為校準(zhǔn)曲線的截距； 為各標(biāo)準(zhǔn)溶液中標(biāo)準(zhǔn)溶液與內(nèi)標(biāo)物濃度比的平均值；n為標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定總次數(shù)；Xi為標(biāo)準(zhǔn)溶液中六號溶劑的濃度與內(nèi)標(biāo)物濃度比；Yi為標(biāo)準(zhǔn)溶液中六號溶劑的峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積比。

將數(shù)值代入公式計算得到標(biāo)準(zhǔn)曲線變動性導(dǎo)致的樣品不確定度u （S ）為0.0500，則由標(biāo)準(zhǔn)曲線變動性引入的樣品相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量為：

式中：ure l（S）為標(biāo)準(zhǔn)曲線變動性引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度。

3.5 測量結(jié)果重復(fù)性引入的不確定度分量

對植物油樣品進行10次平行測量，以測量結(jié)果平均值作為最終測量結(jié)果，根據(jù)測量結(jié)果重復(fù)公式：

式中：rep為測量結(jié)果重復(fù)性； 為樣品溶液中溶劑殘留量的平均值，mg·kg-1；Cn為樣品溶液中溶劑殘留量，mg·kg-1；X0為樣品溶液中溶劑殘留量與內(nèi)標(biāo)物濃度比的平均值；Xn為樣品溶液中溶劑殘留量與內(nèi)標(biāo)物濃度比；ny為樣品的測量次數(shù)。

測量結(jié)果及測量結(jié)果重復(fù)性見表2。

由測量結(jié)果重復(fù)性引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為

urel（rep）=rep=0.00294（17）

式中：u rel（rep ）為測量結(jié)果重復(fù)性引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度。

4 合成相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度

將各分量引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度列于表3。

將測量結(jié)果的各不確定度分量進行合成：

式中：u （w ） 為溶劑殘留量的標(biāo)準(zhǔn)不確定度，mg·kg-1。

5 包含因子及擴展不確定度的計算

在95%置信區(qū)間下，取包含因子k =2，則植物油中溶劑殘留量測量結(jié)果的擴展不確定度為：

U=k×u（w）=3·6（20）

式中：U為溶劑殘留量的擴展不確定度，mg·kg-1。

6 結(jié) 論

應(yīng)用GB 5009.262—2016頂空-氣相色譜法測定植物油中溶劑殘留量，參考JJF 1059.1—2012、CNAS-GL006—2019的不確定度評定方法，植物油中溶劑殘留量的檢測結(jié)果為47.4 mg·kg-1，測量不確定度為±3.6 mg·kg-1，包含因子k =2，結(jié)果表達(dá)為（47.4±3.6） mg·kg-1。通過對不確定度來源的分析和量化，發(fā)現(xiàn)對檢測結(jié)果有較大影響的因素主要有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)曲線的變動性兩方面。因此，在實驗室測量分析中應(yīng)選擇國家認(rèn)可、合格有效的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，并合理使用存放標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，做好期間核查。在標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制中，使用經(jīng)檢定合格有效、精度較高的計量器具，規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。同時，按時對檢測人員進行培訓(xùn)，提高檢測人員的業(yè)務(wù)能力和熟練水平，對檢測涉及的儀器器具定期檢定和期間核查，以保證測量設(shè)備的穩(wěn)定性，配合其他質(zhì)控方法，避免可能對檢測結(jié)果有較大影響的因素，來減小測量不確定度的引入，從而提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

參考文獻

[1]張雯麗“. 十三五”以來中國油料及食用植物油供需形勢分析與展望[J].農(nóng)業(yè)展望，2018（11）：4-8.

[2]秦德萍，毛慶，韓燕.頂空-氣相色譜法測定食用植物油中溶劑殘留量[J].食品與藥品，2017，19（5）：347-350.

[3]金俊，張友峰，陳金平.幾種常見食用植物油溶劑殘留量檢測和殘留溶劑組分分析[J].糧食和油脂，2016，29（12）：75-78.

[4]賀連香.食用植物油中溶劑殘留檢測的意義及方法優(yōu)化[J].食品安全導(dǎo)刊，2015（9）：72-73.

[5]王樂華.食用植物油浸出溶劑評價及溶劑殘留檢測方法研究[D].蘇州：蘇州大學(xué)，2013.

[6]孫黎黎，邵守峰.食用植物油中殘留溶劑測定方法的改進[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2005，15（3）：360-360.

[7]趙金利，宋安華，陳惠琴，等.頂空氣相色譜法測定香型食用油中六號溶劑的殘留量[J ].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2017，8（4）：1274-1279.

[8]徐陸妹.食用植物油中殘留溶劑測定的方法研究[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2009，19（4）：775-776.

[9]林飛，羅飛亞.正己烷的毒理學(xué)研究現(xiàn)狀及風(fēng)險評估[J].中國藥事，2013，27（5）：525-529.

[10]國家市場監(jiān)督管理總局，國家衛(wèi)生健康委員會.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物油：GB 2716—2018[S].2018.

[11]孫丙鎖.壓榨四級菜籽油溶劑殘留量檢測值超標(biāo)原因分析[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2019（16）： 195-196.

[12]SAARI E， PERAMAKI P， JALONEN J. Evaluating the"impact of GC operating settings on GC-FID performance"for total petroleum hydrocarbon（TPH） determination[J].Microchemical Journal， 2009， 9（4）： 73-78.

[13]國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局計量司.測量不確定度評定與表示指南：JJF 1059.1—2012[S].北京：中國計量出版社，2012.

[14]國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局.化學(xué)分析測量不確定度評定JJF1135—2005[S].北京：中國計量出版社，2005.

[15]中國合格評定國家認(rèn)可委員會.化學(xué)分析中不確定度的評估指南：CNAS-GL006—2019[S].北京：中國計量出版社，2019.

[16]中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會，國家食品藥品監(jiān)督管理總局.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中溶劑殘留量的測定：GB 5009.262—2016[S].2016.

作者簡介

李昱霖，碩士研究生，高級工程師，研究方向為檢驗檢測。

（責(zé)任編輯：劉憲銀）