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一株鴨疫里默氏桿菌病診斷治療

2025-07-25 00:00:00周沛袁翠平何彩美謝永平賀會利
中國動物保健 2025年5期
關鍵詞:氏桿菌菌落平板

鴨疫里默氏桿菌病是由鴨疫里默氏桿菌(Riemerellaanatipestifer,RA)引起的一種水禽急性接觸性敗血傳染病,主要感染鴨、鵝和火雞等禽類。鴨疫里默氏桿菌病主要危害1\~8周齡的幼禽,成年禽類通常不易感。該病可通過飲水、飼料以及帶菌成年禽類等多種途徑傳播,具有極高的發病率,死亡率可達 5%~75% ,且患病幼禽常表現為發育不良[1。隨著水禽養殖業的快速發展,該病的防控日益受到重視。然而,由于鴨疫里默氏桿菌病的血清型眾多,且各型之間缺乏交叉免疫保護,疫苗防控效果有限,因此藥物治療仍是關鍵手段。本研究以廣西靈山某鵝場為研究對象,通過細菌分離培養和藥敏試驗等方法,分析了該場鴨疫里默氏桿菌病的耐藥特性,為其臨床合理用藥提供了科學依據。

1方法

1.1病料

2025年廣西靈山某種鵝養殖場發生了大規模雛鵝死亡的情況。雛鵝在10日齡左右出現死亡,技術員進行小鵝瘟疫苗緊急接種,同時使用氟苯尼考、多西環素進行治療,治療后情況未出現好轉,截至35日齡時死亡率達到 68.2% 出現坡腳、包心包肝等癥狀。養殖戶送檢生病雛鴨,無菌采集病鴨肝臟、脾臟、腎臟、腦等組織器官,置于4℃條件下低溫保存。

1.2檢測試劑

巧克力平板培養基購于環凱生物科技有限公司,胰蛋白酶大豆瓊脂培養基(TSA)、胰蛋白酶大豆肉湯(TSB)、麥康凱培養基(MAC)、LB營養肉湯培養基購自青島海博生物科技有限公司;100bpDNAMarker和2 × Rapid TaqPlusMasterMix購于諾唯贊生物科技有限公司;藥敏試紙片購自杭州微生物試劑有限公司。

1.3檢測引物序列信息

參考NCBI中鴨疫里默氏桿菌(RA)、鵝星狀病毒(GAstV)和鵝細小病毒(GPV)等保守基因,合成引物,引物序列如表1所示。

1.4細菌分離鑒定

使用接種環無菌采集肝臟內部以及腦部細菌接種于巧克力平板和MAC平板上,置于 5% CO2 、 37°C 條件下的溫箱培養24h后,觀察菌落形態,挑選純化后的單菌落進行革蘭氏染色,觀察細菌形態。

1.5病料PCR檢測

將收集的組織病料充分研磨,取上清,將組織上清和

表1引物序列信息表
* 基金項目:基本科研業務費專項(桂科專項25-5)

培養的細菌菌液一起進行DNA提取,按照Taq酶說明書要求進行PCR擴增,擴增后的產物進行 2% 瓊脂糖電泳。

1.6細菌藥物敏感性測定

參照《獸醫微生物學實驗指導》圓紙片擴散法以及抗微生物藥物敏感性試驗執行標準(CLSI)進行細菌藥物敏感性測定,檢測對獸醫常用17種抗生素的敏感性。

2結果分析

2.1細菌分離培養

病料分離細菌在巧克力平板上生長良好,在MAC平板上不生長,細菌菌落為白色、呈現濕潤圓形菌落,大小在1mm左右。革蘭氏染色發現,細菌為革蘭氏陰性細菌,兩級濃染短桿菌,初步判斷為鴨疫里默氏桿菌。

圖1分離細菌形態學觀察

2.2PCR檢測結果

PCR檢測發現,對組織研磨上清以及細菌菌液均出現527bp條帶,判定為鴨疫里默氏桿菌感染陽性,鴨星狀病毒和鴨細小病毒陰性。

圖2病料檢測PCR結果圖

2.3藥敏試驗結果

藥敏試驗發現,RA對阿莫西林、氨芐西林、頭孢吡肟、慶大霉素、卡那霉素、阿奇霉素、鏈霉素、新霉素、四環素、復方新諾明和甲氧芐氨嘧啶11種藥物不敏感,對大觀霉素、氟苯尼考、諾氟沙星和磺胺甲噁唑4種藥物中度敏感,對氯霉素和頭孢他啶2種藥物敏感。但因氯霉素為獸藥禁用藥物,因此選用頭孢他啶作為治療首選藥物。

結語

水禽養殖業在廣西家禽養殖中占有十分重要的位置,鵝養殖又在水禽養殖業占有很大比重,廣西鵝養殖主要集中在玉林、北海等地,飼養的主要品種有合浦鵝、獅頭鵝等[2]。在臨床診斷中,因為大腸埃希菌和鴨疫里默氏桿菌感染鵝都可能會導致有纖維素性滲出,出現“包心包肝”癥狀,為了區別兩種病原,采用MAC平板進行鑒別,大腸埃希菌在MAC平板上生長出粉紅色菌落,而鴨疫里默氏桿菌在MAC平板上不生長,在細菌培養階段就可以快速對兩種病原進行區分,可以加快診斷以及治療速度,減少細菌診斷誤判情況的出現。

鴨疫里默氏桿菌病及其繼發感染的防控需要采取綜合管理措施3。首先,應選用與當地流行菌株血清型相匹配的疫苗進行免疫接種;其次,通過飼喂營養均衡的優質日糧,并添加微生態制劑和必需微量元素,全面提升禽群抵抗力;同時,要嚴格做好養殖環境的衛生管理,包括日常定期消毒和疫情發生時的強化消毒;此外,針對當前抗生素濫用導致的耐藥性問題,建議在臨床用藥前先進行藥敏試驗,根據結果選擇敏感藥物進行精準治療。這種系統化的防控策略能有效控制疫病的發生和傳播。

參考文獻:

[1]呂澤昊,韓姍姍,秦立廷,等.3株鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定和耐藥性分析[J].中國獸醫雜志,2023,59(06):87-92.

[2]周英寧,郝潔,韋英益,等.廣西地區鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定與藥敏試驗分析[J].當代畜牧,2018,(33):35-39.

[3]黃海蓮,潘明輝,李烈東,等.一例鴨疫里默氏桿菌病的診斷報告[J].廣西畜牧獸醫,2019,35(04):161-162.收稿日期:2025-03-28

作者簡介:周沛(1976一),女,漢族,助理獸醫師。研

究方向:動物疫病防控。*通訊作者:賀會利(1987一),女,漢族,碩士,高級獸

醫師。研究方向:動物疫病防控與病原分子生物學。

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