一株鴨疫里默氏桿菌病診斷治療

鴨疫里默氏桿菌病是由鴨疫里默氏桿菌（Riemerellaanatipestifer，RA）引起的一種水禽急性接觸性敗血傳染病，主要感染鴨、鵝和火雞等禽類(lèi)。鴨疫里默氏桿菌病主要危害1＼～8周齡的幼禽，成年禽類(lèi)通常不易感。該病可通過(guò)飲水、飼料以及帶菌成年禽類(lèi)等多種途徑傳播，具有極高的發(fā)病率，死亡率可達(dá) 5%～75% ，且患病幼禽常表現(xiàn)為發(fā)育不良[1。隨著水禽養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，該病的防控日益受到重視。然而，由于鴨疫里默氏桿菌病的血清型眾多，且各型之間缺乏交叉免疫保護(hù)，疫苗防控效果有限，因此藥物治療仍是關(guān)鍵手段。本研究以廣西靈山某鵝場(chǎng)為研究對(duì)象，通過(guò)細(xì)菌分離培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)等方法，分析了該場(chǎng)鴨疫里默氏桿菌病的耐藥特性，為其臨床合理用藥提供了科學(xué)依據(jù)。

1方法

1.1病料

2025年廣西靈山某種鵝養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生了大規(guī)模雛鵝死亡的情況。雛鵝在10日齡左右出現(xiàn)死亡，技術(shù)員進(jìn)行小鵝瘟疫苗緊急接種，同時(shí)使用氟苯尼考、多西環(huán)素進(jìn)行治療，治療后情況未出現(xiàn)好轉(zhuǎn)，截至35日齡時(shí)死亡率達(dá)到 68.2% 出現(xiàn)坡腳、包心包肝等癥狀。養(yǎng)殖戶送檢生病雛鴨，無(wú)菌采集病鴨肝臟、脾臟、腎臟、腦等組織器官，置于4℃條件下低溫保存。

1.2檢測(cè)試劑

巧克力平板培養(yǎng)基購(gòu)于環(huán)凱生物科技有限公司，胰蛋白酶大豆瓊脂培養(yǎng)基（TSA）、胰蛋白酶大豆肉湯（TSB）、麥康凱培養(yǎng)基（MAC）、LB營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基購(gòu)自青島海博生物科技有限公司；100bpDNAMarker和2 × Rapid TaqPlusMasterMix購(gòu)于諾唯贊生物科技有限公司；藥敏試紙片購(gòu)自杭州微生物試劑有限公司。

1.3檢測(cè)引物序列信息

參考NCBI中鴨疫里默氏桿菌（RA）、鵝星狀病毒（GAstV）和鵝細(xì)小病毒（GPV）等保守基因，合成引物，引物序列如表1所示。

1.4細(xì)菌分離鑒定

使用接種環(huán)無(wú)菌采集肝臟內(nèi)部以及腦部細(xì)菌接種于巧克力平板和MAC平板上，置于 5% CO₂ 、 37^°C 條件下的溫箱培養(yǎng)24h后，觀察菌落形態(tài)，挑選純化后的單菌落進(jìn)行革蘭氏染色，觀察細(xì)菌形態(tài)。

1.5病料PCR檢測(cè)

將收集的組織病料充分研磨，取上清，將組織上清和

培養(yǎng)的細(xì)菌菌液一起進(jìn)行DNA提取，按照Taq酶說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增后的產(chǎn)物進(jìn)行 2% 瓊脂糖電泳。

1.6細(xì)菌藥物敏感性測(cè)定

參照《獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》圓紙片擴(kuò)散法以及抗微生物藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)（CLSI）進(jìn)行細(xì)菌藥物敏感性測(cè)定，檢測(cè)對(duì)獸醫(yī)常用17種抗生素的敏感性。

2結(jié)果分析

2.1細(xì)菌分離培養(yǎng)

病料分離細(xì)菌在巧克力平板上生長(zhǎng)良好，在MAC平板上不生長(zhǎng)，細(xì)菌菌落為白色、呈現(xiàn)濕潤(rùn)圓形菌落，大小在1mm左右。革蘭氏染色發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌為革蘭氏陰性細(xì)菌，兩級(jí)濃染短桿菌，初步判斷為鴨疫里默氏桿菌。

2.2PCR檢測(cè)結(jié)果

PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，對(duì)組織研磨上清以及細(xì)菌菌液均出現(xiàn)527bp條帶，判定為鴨疫里默氏桿菌感染陽(yáng)性，鴨星狀病毒和鴨細(xì)小病毒陰性。

2.3藥敏試驗(yàn)結(jié)果

藥敏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，RA對(duì)阿莫西林、氨芐西林、頭孢吡肟、慶大霉素、卡那霉素、阿奇霉素、鏈霉素、新霉素、四環(huán)素、復(fù)方新諾明和甲氧芐氨嘧啶11種藥物不敏感，對(duì)大觀霉素、氟苯尼考、諾氟沙星和磺胺甲噁唑4種藥物中度敏感，對(duì)氯霉素和頭孢他啶2種藥物敏感。但因氯霉素為獸藥禁用藥物，因此選用頭孢他啶作為治療首選藥物。

結(jié)語(yǔ)

水禽養(yǎng)殖業(yè)在廣西家禽養(yǎng)殖中占有十分重要的位置，鵝養(yǎng)殖又在水禽養(yǎng)殖業(yè)占有很大比重，廣西鵝養(yǎng)殖主要集中在玉林、北海等地，飼養(yǎng)的主要品種有合浦鵝、獅頭鵝等[2]。在臨床診斷中，因?yàn)榇竽c埃希菌和鴨疫里默氏桿菌感染鵝都可能會(huì)導(dǎo)致有纖維素性滲出，出現(xiàn)“包心包肝”癥狀，為了區(qū)別兩種病原，采用MAC平板進(jìn)行鑒別，大腸埃希菌在MAC平板上生長(zhǎng)出粉紅色菌落，而鴨疫里默氏桿菌在MAC平板上不生長(zhǎng)，在細(xì)菌培養(yǎng)階段就可以快速對(duì)兩種病原進(jìn)行區(qū)分，可以加快診斷以及治療速度，減少細(xì)菌診斷誤判情況的出現(xiàn)。

鴨疫里默氏桿菌病及其繼發(fā)感染的防控需要采取綜合管理措施3。首先，應(yīng)選用與當(dāng)?shù)亓餍芯暄逍拖嗥ヅ涞囊呙邕M(jìn)行免疫接種；其次，通過(guò)飼喂?fàn)I養(yǎng)均衡的優(yōu)質(zhì)日糧，并添加微生態(tài)制劑和必需微量元素，全面提升禽群抵抗力；同時(shí)，要嚴(yán)格做好養(yǎng)殖環(huán)境的衛(wèi)生管理，包括日常定期消毒和疫情發(fā)生時(shí)的強(qiáng)化消毒；此外，針對(duì)當(dāng)前抗生素濫用導(dǎo)致的耐藥性問(wèn)題，建議在臨床用藥前先進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，根據(jù)結(jié)果選擇敏感藥物進(jìn)行精準(zhǔn)治療。這種系統(tǒng)化的防控策略能有效控制疫病的發(fā)生和傳播。

參考文獻(xiàn)：

[1]呂澤昊，韓姍姍，秦立廷，等.3株鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定和耐藥性分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2023，59（06）：87-92.

[2]周英寧，郝潔，韋英益，等.廣西地區(qū)鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定與藥敏試驗(yàn)分析[J].當(dāng)代畜牧，2018，（33）：35-39.

[3]黃海蓮，潘明輝，李烈東，等.一例鴨疫里默氏桿菌病的診斷報(bào)告[J].廣西畜牧獸醫(yī)，2019，35（04）：161-162.收稿日期：2025-03-28

作者簡(jiǎn)介：周沛（1976一），女，漢族，助理獸醫(yī)師。研

究方向：動(dòng)物疫病防控。*通訊作者：賀會(huì)利（1987一），女，漢族，碩士，高級(jí)獸

醫(yī)師。研究方向：動(dòng)物疫病防控與病原分子生物學(xué)。