胃蛋白酶原亞群測定與萎縮性胃炎相關性研究及效價比分析

杜囚鵬 曹建彪 郭漢斌 李浩然

資料顯示，世界范圍內胃癌居惡性腫瘤發病率第四位，死亡率居第二位［1-2］。在日本，胃癌患者的5年生存率為40％～60％，居世界之首；其他國家約20％。中國每年死于胃癌的約有22.7萬人，占所有惡性腫瘤死亡的23％。而患者的早期診斷率還不到20％，早期胃癌（early gastric cancer EGC），患者的手術率低于5％～10％［3-4］。EGC如預后良好，5年生存率可達90％以上，而進展期胃癌的5年存活率約為40％［5-6］。因此，胃癌的早期診斷、早期治療對于提高胃癌的療效、降低死亡率具有十分重要的意義。通過檢測血清中胃蛋白酶原（pepsinogen，PG）水平變化篩查萎縮性胃炎和胃癌，在日本、芬蘭等國家已開始應用，使萎縮性胃炎及胃癌的診斷率顯著提高，從而很好地改善了患者的預后，但在我國尚屬起步階段。

一 材料

（一）研究對象

收集2010年3月2010年12月于北京軍區總醫院體檢者及住院患者共113例，依據胃鏡及病理結果分組如下：正常組（健康體檢者）胃鏡下觀察胃黏膜大致正常且無明顯肝、腎疾病者；胃潰瘍組（經胃鏡證實）；萎縮性胃炎組（經胃鏡取病理證實）；胃癌組（經胃鏡取活檢或者手術病理證實）。以上研究對象均為漢族居民，在納入本研究前1周內無特殊用藥史（包括質子泵抑制劑和H2受體拮抗劑）且C13呼吸試驗呈陰性。表1為納入本研究的各組研究對象的性別與年齡構成。

（二）主要試劑

胃蛋白酶原Ⅰ放射免疫檢測試劑盒（北京永瀚星港生物技術有限公司）。胃蛋白酶原Ⅱ放射免疫檢測試劑盒（北京永瀚星港生物技術有限公司）。

表1 各組中研究對象的性別與年齡構成

（三）主要儀器設備

使用OLYMPUS5421全自動分析儀（日本奧林巴斯公司）進行檢測。

二、方法

（一）標本采集

取受檢者清晨空腹靜脈血3ml，離心（2000G，10～15分鐘），分離血清后迅速凍存于-20℃箱備用行同批檢測。

（二）血清PGI、PGll含量測定：

采用放射免疫法測定PGⅠ和PGⅡ：

（1）將全部血清標本及PGI、PGll試劑盒平衡至室溫（19～27℃），按照試劑盒要求配制洗滌液，稀釋血清標本。

（2）向各管中加入20μL標準樣或者樣本血清，再加入80μL測定液，以及碘125標記單抗100μL。

（3）每個試管中加入包被珠1粒，室溫（25℃）震蕩3小時。

（4）吸取反應液，用蒸餾水將珠子洗三遍。

（5）將珠子倒入另一干凈的試管中，在伽瑪計數器上測珠子的放射計數（CPM）。

（6）以標準品的CPM對濃度做標準曲線，根據標準曲線讀出未知樣品的PGⅠ或者PGⅡ。

（三）胃黏膜的病理學檢查

萎縮性胃炎組均以胃鏡活檢病理診斷；胃癌組均以胃鏡活檢或者手術后病理診斷為準。

（四）數據處理

用SPSS16.0統計軟件進行分析。計量資料以均數正負標準差表示；樣本資料性別構成比及年齡運用卡方檢驗；計量資料經正態性、方差齊檢驗，方差齊的正態分布資料運用方差分析，P＜0.05（雙側）有統計學意義。

三、結果

（一）不同胃黏膜病變患者血清PGⅠ含量的變化情況

與正常組相比，胃潰瘍患者血清PGⅠ升高（P=0.029），萎縮性胃炎和胃癌患者血清PGⅠ降低（P＜0.05和P＜0.05）；與胃潰瘍組相比，萎縮性胃炎和胃癌患者血清PGⅠ明顯低于胃潰瘍患者（P＜0.001）；與萎縮性胃炎組相比，胃癌患者血清PGⅠ值雖略低于萎縮性胃炎組，但差異無統計學意義（P=0.117）。各血清PGⅠ的比較值見表2。

表2 各組血清PGⅠ值的比較

（二）不同胃黏膜病變患者血清PGⅡ含量的變化情況

與正常組相比，胃潰瘍患者血清PGⅡ升高（P=0.017），萎縮性胃炎和胃癌患者血清PGⅡ與正常組無統計學差異（P=0.07和P=0.39）；與胃潰瘍組相比，萎縮性胃炎和胃癌患者血清PGⅡ低于胃潰瘍組（P=0.036和P=0.001）；與萎縮性胃炎組相比，胃癌患者血清PGⅡ值雖略低于萎縮性胃炎組，但差異無統計學意義（P=0.097）。各血清PGⅡ的比較值見表3.

表3 各組血清PGⅡ值的比較

（三）不同胃黏膜病變患者血清中PGⅠ/PGⅡ比值的變化情況

與正常組相比，胃潰瘍患者血清PGⅠ/PGⅡ比值降低（P=0.035），萎縮性胃炎、胃癌患者血清PGⅠ/PGⅡ比值降低（P＜0.05，P＜0.05）；與胃潰瘍組相比，萎縮性胃炎和胃癌患者血清PGⅠ/PGⅡ比值均低于胃潰瘍組（P=0.046，P=0.001）；與萎縮性胃炎組相比，胃癌組患者血清PGⅠ/PGⅡ比值雖略低于萎縮性胃炎組，但差異無統計學意義（P=0.097）。各血清PGⅠ/PGⅡ值的比較詳見表4。

表4 各組血清PGⅠ/PGⅡ值的比較

（四）血清PGⅠ檢測萎縮性胃炎的陽性界定值判定

不同血清PGⅠ界定值對萎縮性胃炎的檢出情況及其靈敏度和特異度見表5和圖1。受試者工作特征曲線（ROC曲線）顯示曲線下面積為0.756，所以該曲線對萎縮性胃炎具有較好的診斷價值；當PGⅠ≤80ng/mL時，檢測萎縮性胃炎的靈敏度和特異度分別為66.7％和85.7％，相對較好。

（五）血清PGⅠ/PGⅡ比值檢測萎縮性胃炎的陽性界定值判定

不同血清PGⅠ/PGⅡ比值的界定值對萎縮性胃炎的檢出情況及其靈敏度和特異度見表6和圖2。受試者工作特征曲線（ROC曲線）顯示曲線下面積為0.783，所以該曲線對萎縮性胃炎具有較好診斷價值；PGⅠ/PGⅡ≤（5～6）時檢測萎縮性胃炎的靈敏度和特異度相對較好，PGⅠ/PGⅡ≤5時特異度和靈敏度分別為88.6％和53.3％，PGⅠ/PGⅡ≤6時分別為82.9％和60％。

表5 不同血清水平PGⅠ（ng/mL）值對萎縮性胃炎的檢出率（％）

圖1 根據不同血清PGⅠ（ng/mL）值檢出萎縮性胃炎的特異度和靈敏度的ROC曲線

圖2 根據不同PGⅠ/PGⅡ的界定值檢出萎縮性胃炎的特異度和靈敏度的ROC曲線

表6 不同血清水平PGⅠ/PGⅡ的界定值對萎縮性胃炎的檢出率（％）

（六）血清PGⅠ和PGⅠ/PGⅡ聯合檢測萎縮性胃炎的陽性界定值判定

與單獨檢測血清PGⅠ和PGⅠ/PGⅡ相比，兩項聯合檢測可以提高檢測的特異性（見表7）。PGⅠ≤80ng/mL且PGⅠ/Ⅱ≤6時，檢出萎縮性胃炎的特異度和靈敏度分別為94.3％和53.3％。

表7 血清PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ單獨及聯合檢測萎縮性胃炎的靈敏度和特異度比較

（七）胃蛋白酶原檢測與胃鏡和（或）取病理檢查的效價比

此項檢查PGⅠ≤80ng/mL且PGⅠ/Ⅱ≤6時，檢出萎縮性胃炎的特異度和靈敏度較高，分別為94.3％和53.3％。由于其費用低，適用于初篩及胃鏡檢查禁忌者，大大節約了國家醫療資源。表8為胃蛋白酶原檢測與胃鏡、胃鏡并取病理的檢測費用比較。

表8 PG檢測與胃鏡、胃鏡并取病理的項目費用

四、討論

PGⅠ和PGⅡ的細胞來源和組織分布各不相同，PGⅠ主要由胃底腺的主細胞和頸黏液細胞分泌，PGⅡ則由全胃腺（包括胃賁門腺、胃底腺、胃竇幽門腺）和近端十二指腸的Brunner腺產生。大部分PG分泌入胃腔，約1％透過胃黏膜毛細血管進入血液中，故可以從血清中檢測到，因為胃部幾乎是PG唯一來源，所以檢測血清中PG水平可準確地反映胃黏膜組織學狀況［7-9］。目前國內有關PGⅠ，PGⅠ/PGⅡ比值與萎縮性胃炎及胃癌的關系尚無理想的研究，其判斷界值差異也較大［10-14］，本研究采用了敏感性較高的放射免疫法，排除了性別、種族及年齡等因素對檢測結果的影響，用來測定不同組別血清中胃蛋白酶原的水平。研究結果顯示：

（1）與正常組相比，消化性潰瘍由于壁細胞數量增加，胃酸分泌增多，高酸刺激胃部腺體導致PGⅠ、PGⅡ大量分泌，而且PGⅡ增高明顯（P=0.029，P=0.017），所以導致PGⅠ、PGⅡ進入血循環的量增加［15，16］、PGⅠ/PGⅡ比值降低（P=0.035）。本研究與既往研究結果相符。萎縮性胃炎組及胃癌組血清PGⅠ水平均呈下降趨勢，這可能與胃黏膜發生萎縮或癌變及胃腺萎縮使分泌蛋白酶原能力減弱有關。而血清PGⅡ水平變化不明顯，可能是因為分泌PGⅡ的胃黏膜細胞分布較廣以及幽門腺化生使PGⅡ產生增多。萎縮性胃炎和胃癌組由于PGⅠ明顯下降（P＜0.05）、PGⅡ變化不大（P=0.39），導致PGⅠ/PGⅡ比值下降（P＜0.05），與國外文獻報道結果一致［10-13］。

（2）與潰瘍組相比，萎縮性胃炎和胃癌患者血清PGⅠ明顯低于胃潰瘍患者（P＜0.001，P＜0.001），血清PGⅡ低于胃潰瘍組（P=0.036，P=0.001），血清PGⅠ/PGⅡ比值也低于胃潰瘍組（P=0.046，P=0.001）。潰瘍患者高酸刺激導致PGⅠ和PGⅡ分泌增加，進入血液循環量增加，而萎縮性胃炎及胃癌患者因胃腺萎縮、致癌因子使產生胃蛋白酶原的基因突變等導致PGⅠ和PGⅡ分泌減少。

（3）與萎縮性胃炎組相比，胃癌患者血清PGⅠ、PGⅡ及PGⅠ/PGⅡ比值雖略低于胃癌組，但差異無統計學意義（P=0.117，P=0.097，P=0.097）。此結論與既往文獻報道不符，本研究雖采用了敏感性比較高的放射免疫方法，但仍未能做出萎縮性胃炎及胃癌之間的統計學差異。其原因可能與胃癌組患者中早期胃癌所占比例較大相關（66.7％）。

（4）由上得出結論，PGⅠ和PGⅠ/PGⅡ比值降低是胃癌及萎縮性胃炎發生的警戒信號之一。檢測血清PGⅠ和PGⅠ/PGⅡ比值簡單、易行，且經濟，易被人們接受，可以作為高危人群篩查和輔助診斷的項目。待發現問題后再進一步行胃鏡及病理檢查，從而達到萎縮性胃炎及胃癌早期診斷的目的。

（5）在本研究中萎縮性胃炎患者血清中PGⅠ和PGⅠ/PGⅡ比值均稍高于胃癌組，無統計學差異（P=0.117，P=0.097），所以制定萎縮性胃炎PGⅠ和PGⅠ/PGⅡ的陽性界定值，由此可以達到對萎縮性胃炎及胃癌早期診斷的目的。以血清PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ分別做ROC曲線，該曲線的運用也對萎縮性胃炎具有較好的診斷價值。本研究又進一步做了單獨檢測血清PGⅠ和PGⅠ/PGⅡ，及兩項聯合檢測之間靈敏度和特異度的比較，發現聯合應用可以提高檢測的特異度（見表7）。PGⅠ≤80ng/mL且PGⅠ/PGⅡ≤6時，檢出萎縮性胃炎的特異度和靈敏度分別為94.3％和53.3％。因與萎縮性胃炎組相比，胃癌患者血清PGⅠ、PGⅡ及PGⅠ/PGⅡ比值雖略低于萎縮性胃炎組，但差異無統計學意義。所以按此界定值可同時達到對萎縮性胃炎及胃癌的篩查和輔助診斷。

（6）目前PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ與萎縮性胃炎及胃癌的相關性尚無理想的研究。雖然血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ比值在不同疾病狀態下的變化趨勢國內外研究結果較一致，但作為判斷的界定值差異還比較大。鑒于我國是胃癌高發區，如果能進一步開展大規模、多中心、高質量的前瞻性研究，明確PG在我國癌前病變及胃癌篩查中的價值，并制定出標準參考數據，將對我國胃癌的防治工作產生重要影響。

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