MIP-1α和INF-γ在結核性腦膜炎患者腦脊液中的表達

王淑華

MIP-1α和INF-γ在結核性腦膜炎患者腦脊液中的表達

王淑華

目的 探討巨噬細胞炎性蛋白-1α (MIP-1α)和γ-干擾素 (INF-γ)在結核性腦膜炎患者腦脊液中的表達及臨床意義。方法 ELISA法測定早期和中晚期結核性腦膜炎患者(早期、中晚期結核性腦膜炎組)腦脊液各60例、惡性腦瘤患者(惡性腦瘤組)腦脊液75例及30例健康人(對照組)腦脊液中MIP-1α和INF-γ的濃度, 評價MIP-1α和INF-γ聯合檢測在結核性腦膜炎中的臨床價值。結果 MIP-1α、INF-γ在早期結核性腦膜炎患者腦脊液中水平為(10.63±2.47)pmol/L、(7.85±2.08)μg/L,在中晚期腦膜炎患者腦脊液中的水平為(18.19±4.62)pmol/L、(12.86±3.02)μg/L, 在腦瘤患者腦脊液中的水平為(3.01±1.17)pmol/L、(2.73±0.96)μg/L, 在健康人腦脊液中的水平為(1.09±0.67)pmol/L、(0.82±0.77) μg/L, 早期和中晚期結核性腦膜炎組與惡性腦瘤組及對照組比較, 差異有統計學意義(P＜0.001)；早期結核性腦膜炎組和中晚期結核性腦膜炎組比較, 差異有統計學意義(P＜0.001)。MIP-1α和INF-γ在結核性腦膜炎患者腦脊液中的表達水平與結核性腦膜炎正呈相關。結論 MIP-1α和INF-γ在結核性腦膜炎腦脊液中表達的水平明顯高于腦瘤患者及健康人腦脊液中的表達水平。

結核性腦膜炎；腦脊液；巨噬細胞炎性蛋白-1α；γ-干擾素

目前結核性腦膜炎診斷的實驗室可靠指標為：①腦脊液涂片抗酸染色找抗酸桿菌：陽性率很低, 難以早期發現。②腦脊液培養：培養條件要求較高, 培養周期長, 且大多數醫院實驗室難以開展。③腦膜腦組織活檢：有一定的危險性,難于滿足臨床要求。本文通過聯合檢測MIP-1α、INF-γ在腦脊液中的表達水平, 旨在為結核性腦膜炎早期診斷探討一個簡單、快速、可靠的方法。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 120例結核性腦膜炎患者, 均為2010年3月～2014年3月在本院傳染科住院患者。其中, 男61例, 年齡14～75歲, 女59例, 年齡16～78歲, 平均年齡46.7歲。此120例患者均有結核中毒癥狀, 玻片離心沉淀法收集腦脊液細胞, 并進行抗酸染色, 找到抗酸桿菌, 結核菌素試驗(PPD)強陽性, 血液和腦脊液結核抗體測定陽性, 頭顱CT改變, 再結合臨床癥狀, 確診為結核性腦膜炎(早期結核腦膜炎組60例, 中晚期結核性腦膜炎組60例)。120例患者經規則抗癆治療后, 腦部病變吸收。75例惡性腦瘤患者(惡性腦瘤組),均為2010年3月～2014年3月在本院神經外科住院患者,均經頭顱CT、組織病理學或細胞學證實。無其他疾病。30例健康人(對照組)均為2010年3月～2014年3月來本院體檢中心做健康體檢者, 無結核患者的密切接觸史, 頭顱CT陰性, PPD陰性, 無結核性疾病及其他疾病。四組一般資料比較,差異無統計學意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 主要試劑 IFN-γ試劑盒(深圳晶美生物科技有限公司);MIP-1α試劑盒(美國ADL生物科技有限公司)。

1.3 主要設備 酶聯免疫檢測儀(美國Instruments.Inc), 型號：EL×800。

1.4 實驗方法 所有入選患者在無菌條件下做腰穿抽取腦脊液3 mml, 離心取上清液2 mml凍存于-80℃冰箱中統一待用于ELISA法測趨化因子MIP-1α、INF-γ, 剩余的沉渣用于涂片抗酸染色找抗酸桿菌。按照試劑盒說明進行操作。

1.5 統計學方法 用SPSS13.0統計軟件包處理數據。計量資料以均數± 標準差表示, 采用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗。以 P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

早期和中晚期結核性腦膜炎組與惡性腦瘤組及對照組比較, 差異有統計學意義(P＜0.001)；早期結核性腦膜炎組和中晚期結核性腦膜炎組比較, 差異有統計學意義(P＜0.001)。見表1。

表1 四組腦脊液中MIP-1α和INF-γ水平比較

表1 四組腦脊液中MIP-1α和INF-γ水平比較

注：與對照組和惡性腦瘤組比較,aP＜0.001；與早期結核性腦膜炎組比較,bP＜0.001

組別例數MIP-1α(pmol/L)INF-γ(μg/L)對照組30 1.09±0.67 0.82±0.77早期結核性腦膜炎組60 10.63±2.47a7.85±2.08a中晚期結核性腦膜炎組60 18.19±4.62ab11.86±3.02ab惡性腦瘤組75 3.01±1.17 2.73±0.96 P＜0.001＜0.001

3 討論

目前, 結核性腦膜炎實驗室診斷的指標都不太理想, 所以尋找簡單快速、可靠、經濟的輔助診斷指標有一定的臨床價值。本文通過檢測MIP-1α、INF-γ在四組(早期、中晚期結核性腦膜炎組、惡性腦瘤組、對照組)腦脊液中的水平, 對檢測數據進行統計學處理, 結果：結核性腦膜炎組明顯高于惡性腦瘤組及對照組, 差異有統計學意義(P＜0.001),早期與中晚期結核性腦膜炎組相比較, 差異有統計學意義(P＜0.001)。本文證實聯合檢測腦脊液中MIP-1α和INF-γ水平, 再結合臨床, 對結核性腦膜炎的早期診斷有較高價值,結核(TB)對趨化因子的表達有直接的誘導作用, TB細胞壁的組成成分可能在誘導中起關鍵性作用。在感染后數小時即可檢測到MIP-1α的表達［1］, 在TB的誘導下, 顱內巨噬細胞產生的MIP-1α比血單核細胞產生的明顯多［2］, 而且感染的TB的毒力越強, 人類巨噬細胞產生趨化因子MIP-1α的能力就越強［3］。TB及其分解產物能夠引發病變局部的炎癥反應和全身反應。在結核性腦膜炎中以局部的細胞免疫為主。在病變部位有大量免疫細胞的聚集。動物實驗發現, TB及其產物等能夠活化局部的淋巴細胞, 被活化的淋巴細胞主要是(CD4T細胞)會產生大量的INF-γ［4］。INF-γ是一種重要的免疫調節因子, 它還能夠激活巨噬細胞, 促進細胞因子的釋放, 增強巨噬細胞的吞噬作用。本實驗中結核性腦膜炎腦脊液中MIP-1α和INF-γ呈正相關, 也說明了二者之間存在一定的關系。

Atanackovic等通過研究良、惡性腦瘤滲出的T淋巴細胞發現：在惡性腦瘤中效應型T細胞和極化1型T細胞聚集不充分, 同時還發現自然殺傷細胞和具有潛在細胞毒性的細胞聚集不充分。這可能是導致惡性腦瘤中MIP-1α、INF-γ等細胞因子不能大量產生的重要原因。本研究顯示結核性腦膜炎腦脊液中MIP-1α和INF-γ的水平明顯高于惡性腦瘤患者及對照組腦脊液中的水平。

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Expressions of MIP-1α and INF-γ in cerebrospinal fluid of tuberculous meningitis patients

WANG Shuhua.Department of Detection, Shandong Heze Municipal Hospital, Heze 274031, China

Objective To explore the expressions and clinical significance of macrophage inflammatory protein-1α (MIP-1α) and γ-interferon (INF-γ) in cerebrospinal fluid of tuberculous meningitis patients.Methods The concentration of MIP-1α and INF-γ were detected by ELISA method in the cerebrospinal fluid of 60 early tuberculous meningitis patients, 60 middle-late tuberculous meningitis patients (early and middlelate tuberculous meningitis group), 75 malignant cerebrum patients (malignant cerebrum group) and 30 healthy people (control group).The clinical value of joint detection of MIP-1α and INF-γ in tuberculous meningitis was evaluated.Results The levels of MIP-1α and INF-γ were (10.63±2.47) pmol/L and (7.85±2.08) μg/ L in the cerebrospinal fluid of early tuberculous meningitis patients, (18.19±4.62) pmol/L and (12.86±3.02) μg/L in middle-late tuberculous meningitis patients, (3.01±1.17) pmol/L and (2.73±0.96) μg/L in cerebrum patients, and (1.09±0.67) pmol/L and (0.82±0.77) μg/L in healthy people.There was statistically significant difference between the early and middle-late tuberculous meningitis group, the malignant cerebrum group, and the control group (P＜0.001).The difference between early tuberculous meningitis group and middle-late tuberculous meningitis group was also statistically significant (P＜0.001).Conclusion The expression levels of MIP-1α and INF-γ in the cerebrospinal fluid of tuberculous meningitis are obviously higher than those in cerebrum patients and healthy people.

Tuberculous meningitis; Cerebrospinal fluid; Macrophage inflammatory protein-1α; γ-interferon

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.02.009

2014-08-18］

274031 山東菏澤市立醫院檢驗科