骨疏顆粒對去卵巢雌性大鼠的骨密度生物力學影響的實驗研究

李冰　杜義斌

摘要：目的觀察骨疏顆粒對去卵巢骨質疏松模型大鼠的骨密度、骨生物力學的影響，為骨疏顆粒治療絕經后骨質疏松癥提供實驗依據。方法48 只 SD 大鼠隨機分為 4 組：模型組、空白對照組、戊酸雌二醇組、骨疏顆粒組。采用卵巢摘除法制作骨質疏松模型，觀察大鼠骨密度、骨生物力學改變。結果與模型組比較，骨疏顆粒組及雌激素組均可以改善去勢雌性大鼠骨密度、骨生物力學水平（P<0.01 或 P<0.05），二者之間無顯著差異（P>0.05）。結論骨疏顆粒能治療和延緩絕經后骨質疏松，與戊酸雌二醇無顯著性差異。

關鍵詞：骨質疏松癥；骨疏顆粒；骨密度；骨生物力學；實驗研究

中圖分類號：R285.5文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2015）06-0081-02

隨著對骨質疏松的認識深入，臨床上對骨質疏松的定義發生改變，認為骨質疏松是一種以骨強度受損為特征的骨骼疾病。影響骨強度的因素主要為骨量和骨質量因素。WHO所制定的骨質疏松癥診斷標準，只是基于對骨密度（BMD）的測量[1]。但大量的動物實驗和臨床研究結果表明，單純骨礦鹽含量即骨密度的增加，骨質量不一定增加，有時反而降低[2]。骨強度的另一重要因素是骨質量因素，與骨的力學強度密切相關。本實驗采用云南省中醫醫院老年病科的經驗方骨疏顆粒治療去卵巢雌性大鼠的骨質疏松，模擬絕經期女性骨質疏松，觀察中藥骨疏顆粒對去卵巢大鼠骨密度、骨生物力學的影響，并與戊酸雌二醇作為對照，為骨疏顆粒治療絕經后骨質疏松提供動物實驗依據。現將骨密度、骨生物力學的實驗結果報告如下。

動物與分組、藥品組成、實驗方法已有文章發表[3]。

1實驗儀器

Prodigy型雙能 X 線骨密度儀（美國 Lunar公司），力學測試儀（Instron 5565，美國）。

2觀察指標及檢測方法

在無菌條件下，腹腔注射 10%水合氯醛麻醉，取左側股骨、脛骨及腰1，剝離并剔除肌肉等組織。左側股骨、脛骨放于生理鹽水（20 ℃）中浸泡復溫 3 ～ 4 h 后，進行加工。首先將牙托粉與自凝液以 5∶ 1 融合，待牙托粉變為黏稠的淡粉色膏狀物后，將左側股骨、脛骨遠近端分別用牙托粉作以定型，使股骨、脛骨兩端固定于力學測試儀，不發生側向旋轉，基本處于同一水平面。標本處理好后，作股骨、脛骨三點彎曲試驗，加載速度為 2 mm/min，兩端跨距為 20 mm，檢測過程中由計算機自動記錄股骨、脛骨的直徑、力值、撓曲強度，使用力學測試分析軟件（Instron Bluehhill 版本號2.0）分析數據。腰1采用雙能 X 線骨密度儀，使用小動物軟件（Lunar iDXA 版本號13.60），進行離體骨密度測定。

3統計學方法

所有數據以均數±標準差（x±s）表示，組間比較用t檢驗，數據采用 SPSS 19.0統計軟件處理。

4結果

4.1各組大鼠腰1骨密度變化與空白對照組比較，模型組骨密度有明顯降低（P<0.01），表明造模成功。與模型組比較，骨疏顆粒組的腰1骨密度有顯著性增加（P<0.05）；但與戊酸雌二醇組無明顯差異（P>0.05）。見表 1。

5討論

臨床上使用骨疏顆粒能明顯改善絕經后婦女的骨質疏松癥狀，緩解腰腿酸痛，疲乏無力，提高其生活質量[4-5]。骨疏顆粒能引起大鼠性激素、病理及血生化指標的變化[3]，導致骨密度、骨生物力學的改變。

骨質量的評價包括骨的顯微結構、骨密度及骨生物力學三方面。各組大鼠股骨顯微結構的比較顯示，與模型組比較，骨疏顆粒組可升高骨小梁面積百分數、骨小梁數、骨小梁厚度，降低骨小梁分離度，與戊酸雌二醇組無顯著差異[3]。本實驗骨生物力學主要選擇股骨、脛骨的撓曲強度變化。撓曲強度是描述材料承受復雜應力性能的參數。撓曲強度=3PL/2πr2l，P為最大加荷值，L為樁長度（m）；r為樁直徑（m）。可反映骨骼的的彎曲性能。骨柔韌性高，不易骨折。骨疏顆粒組可升高骨密度，增加撓曲強度，與戊酸雌二醇組無顯著差異。

絕經后婦女骨質疏松癥的變化主要原因是雌激素的降低。補充人工合成雌激素藥劑會增加乳腺癌和子宮癌的危險性[6]，骨疏顆粒有類似雌激素的作用，可使去卵巢雌性大鼠體內低下的雌激素水平提高，從而發揮雌激素對于骨代謝的保護作用。這應該是骨疏顆粒對絕經期骨質疏松癥具有治療作用的一個重要原因，與雌激素替代治療絕經期骨質疏松癥的作用機制一致。但中藥治療骨質疏松的治療靶點有多個，骨疏顆粒在改善骨小梁分離度、骨小梁數方面可達到接近正常水平，優于戊酸雌二醇組[3]，證明骨疏顆粒治療骨質疏松的作用機制不止一種，有待于更深入的研究。參考文獻：

[1]World Health Organization.Assessment of fracture risk and its application to screening for postmenopausal osteoporosis.WHO Technical Report Series 843.WhO，Genevo，1994.

[2]Sgaard CH，Mosekide L，Schwartz W，et al.Effects of fluoride on rat vertebral body biomechanical competence and bone mass，Bone，1995，16（1）：163.

[3]李冰，杜義斌，李黔云，等.骨疏顆粒對去卵巢雌性大鼠骨質疏松影響的實驗研究[J].云南中醫學院學報，2014，37（4）：9-12.

[4]杜義斌，徐翔峰，彭江云.骨疏顆粒治療老年女性骨質疏松癥30例療效觀察〔J〕.云南中醫中藥雜志，2006，27（5）：15.

[5]杜義斌，吳洋，段艷蕊等.骨疏顆粒治療絕經后骨質疏松癥臨床觀察[J].新中醫，2013，45（8）：18-21.

[6]陸路.降低骨質疏松危險的功能性食物成分[J].國外醫學：衛生學分冊，2001，28（5）：282-284.

（收稿日期：2015-03-06）