蔬菜農藥殘留速測酶制劑的比較

金 彬，沈群超，吳碧波，胡雅花

(1.寧波市農業生產安全管理總站,浙江寧波 315012; 2.慈溪市農業監測中心,浙江寧波 315300; 3.寧?？h農林科教信息中心,浙江寧波 315600)

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蔬菜農藥殘留速測酶制劑的比較

金 彬1，沈群超2，吳碧波3，胡雅花1

(1.寧波市農業生產安全管理總站,浙江寧波 315012; 2.慈溪市農業監測中心,浙江寧波 315300; 3.寧?？h農林科教信息中心,浙江寧波 315600)

摘 要：以2種品牌酶制劑為樣本,使用小青菜、青瓜、韭菜3種蔬菜作為供試樣品,通過實驗室內部、實驗室外部比較發現,青菜、黃瓜樣品對酶抑制法檢測判定基本沒有干擾,但韭菜因汁液中含有對酶有影響的植物次生物質,需整株提取。不同廠家研發的酶制劑對具體農藥品種的特異性有差異,且普遍對毒死蜱的檢測靈敏度較低,采購儀器和酶制劑時需根據實際需要,選擇對重點監控農藥殘留指標靈敏度高的產品,建議對同一樣品分別使用幾種品牌的酶制劑進行檢測以滿足監測需要。

關鍵詞：酶抑制法;農藥殘留;比較

文獻著錄格式:金彬,沈群超,吳碧波,等.蔬菜農藥殘留速測酶制劑的比較[J].浙江農業科學,2016,57 (4):517-519.

農藥殘留是影響蔬菜質量安全的重要因素,直接關系到廣大消費者的身體健康,受到社會各界的廣泛關注[1]。酶抑制法農藥殘留快速檢測方法因其操作簡單、快速、成本低、比較實用等優點,成為目前基層農產品質量安全檢測機構廣泛使用的農藥殘留檢測方法[2]。2014年,全面開展農產品質量安全保障行動成為浙江省政府的十件實事之一,其中一項內容就是所有縣(市、區)都要建成農產品安全快速檢測室,并對公眾免費開放[3]。酶抑制法速測對操作人員、場地條件的要求較低,更重要的是檢測時間短、能夠達到現場快速出結果的需求,對濫用高毒農藥的不法商販有較大的威懾力[4-5]。酶抑制法利用農藥對膽堿酯酶的抑制作用及膽堿酯酶催化水解物與顯色劑反應產生黃色物質的特性,用速測儀在410 nm等特定波長處測定吸收度隨時間的變化值,最終得出抑制率[6]。但酶抑制法農殘檢測有其局限性[7],且現在市場上速測產品品牌、型號眾多,性能各有不同[6-7],選擇合適的速測產品是開展速測監管必須考慮的事項。本項目通過實驗室內部、實驗室外部比較,得出2種不同品牌農殘速測試劑盒對幾種農藥殘留檢測的靈敏度和檢測結果的準確性,以期為提高農藥殘留速測工作的質量提供參考依據。

1　材料與方法

1.1材料

選擇市場上在售的2種酶制劑,儀器使用北京瑞利譜創儀器技術有限公司的RP410型速測儀,酶制劑均為乙酰膽堿酶,分別為上海捷門保林邁生物工程有限公司生產(T1)和北京瑞利譜創儀器技術有限公司生產(T2)。選擇小青菜(葉菜類)、青瓜(瓜類)、韭菜(蔥蒜類) 3種蔬菜作為供試樣品。

1.2樣品處理

小青菜取葉片部分。青瓜沿皮削下1片,各用天平準確稱取1 g,用剪刀剪成1 cm見方的大小,加入5 mL緩沖溶液,震蕩2 min。韭菜的汁液中含有影響乙酰膽堿酶的物質,容易引起假陽性,因此直接將整枝浸入5 mL緩沖溶液中。分別添加9種農藥殘留,每組做3個平行,加標濃度和2個品牌酶制劑的理論檢出限見表1。

1.3方法

按廠家提供的儀器使用說明書和農藥殘留快速檢測試劑盒使用說明書進行空白測試和樣品測試。由寧波市種植業管理總站實驗室(B1)和慈溪市農業監測中心實驗室(B2)承擔比對試驗。

表1　樣品加標濃度和試劑盒理論檢出限

2　結果與分析

2.1不同樣品的加標檢測情況

在青瓜、青菜、韭菜樣品中加入一定濃度的農藥,由B1實驗室承擔檢測。從表2得出,加入同樣濃度的農藥標準溶液,對3種蔬菜抑制率判斷得出的結果不盡相同。添加比試劑盒理論檢出限高出5倍以上的農藥,如敵敵畏、滅多威、甲萘威和克百威,3種蔬菜在2個實驗室的檢測結果均為陽性,無疑議。殺螟硫磷添加試劑盒理論檢出限濃度的量,3種蔬菜均顯示假陰性;氧化樂果、毒死蜱添加檢出限濃度的量,出現不同的判斷結果,但與具體樣品類型沒有絕對的關聯;馬拉硫磷和甲胺磷添加了低于檢出限濃度的量,已有樣品出現陽性結果,但也有樣品出現陰性結果,陽性的判斷結果偶然性概率較高。因此,試驗所用的3種蔬菜對儀器檢測性能并無影響,檢測判定結果主要還是由儀器性能和酶制劑本身對農藥的特異性決定,樣品所含農藥濃度越高于試劑盒檢出限,得到陽性結果越穩定(表2)。但很多文獻提出蔥蒜類、香菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑菇、花椒等農產品的汁液中含有對酶有影響的植物次生物質,容易產生假陽性[8]。因此,大多試劑盒說明書會建議處理這類樣品時,采取整株蔬菜(或大塊蔬菜)浸出提取液的方法。對葉綠素含量較高的蔬菜也可采取類似方法。但也有廠家研發了抗干擾的新型儀器和配套的固化酶制劑,如SN-V生物傳感器型農藥殘留檢測儀[8],其具體性能還需進一步考證。

表2　不同樣品的加標速測判斷結果

將韭菜準確稱取1 g,用剪刀剪成1 cm左右長度;另準備1份韭菜按照試劑盒說明書,取整枝浸泡,比較2種處理方法的抑制率,每種處理方式做3個平行。結果顯示,切碎的韭菜3個平行樣品抑制率均＞50%,樣品判斷為陽性;整枝浸提則3個平行樣品的抑制率均＜50%,樣品判斷為陰性?？梢娋虏饲兴楹蟮囊种坡拭黠@高于整枝提取的抑制率,切碎后的韭菜樣品易檢測得出假陽性結果(表3)。

表3　韭菜不同樣品制備方法對檢測結果的影響

2.2不同品牌試劑盒的檢測準確性

比較2個品牌試劑盒對5種農藥殘留的檢測準確性可知,T1對克百威、甲萘威的檢測靈敏度高于其他2種儀器,但對毒死蜱、甲胺磷靈敏度不高,易出現假陰性; T2對甲胺磷的檢測靈敏性高于其他2種儀器,但對克百威、毒死蜱、甲萘威靈敏度不高。

相比GB 2763—2014中規定的蔬菜中農藥最大殘留限量值,T1對敵敵畏、克百威、甲萘威較為敏感,可對標準規定的最低限量濃度做出準確判斷,毒死蜱在理論檢測限加標濃度下檢測結果顯示為假陰性,檢測能力并不如生產廠家所述靈敏度,對甲胺磷的檢測能力無法滿足GB 2763—2014的要求。T2對甲胺磷的敏感度略高于T2,但仍難以滿足國標要求。其他4項農藥的檢測情況同T1 (表4)。

表4　儀器靈敏度比較

毒死蜱是廣譜性農藥,目前在蔬菜、水稻生產中使用廣泛,也是較多檢出的農藥品種之一[10-11],但如T1,T2一般,大多數酶抑制法農殘速測儀和配套的試劑盒對毒死蜱的檢測能力都比較低[7,12],假陰性率較高,無法實現有效的監控。目前也有品牌對毒死蜱有較好的敏感性。戴慧峰等[13]驗證了博納CL-BIII型農殘速測儀的性能,認為該儀器對毒死蜱有較高的靈敏度。

3　小結與討論

本試驗以2種農藥殘留速測試劑盒為樣本,通過實驗室內部、實驗室外部比較,得出2個品牌試劑盒檢測結果的準確性和對幾種農藥殘留檢測的靈敏度。結果表明,青菜、黃瓜對檢測結果基本無干擾,檢測判定結果主要還是由儀器和酶制劑本身對農藥的特異性決定,但韭菜汁液中含有對酶有影響的植物次生物質,切碎后浸提檢測產生了假陽性,需整株提取,類似韭菜的香菜、番茄等也需采取同樣的處理方法。

本試驗所用酶抑制法根據乙酰膽堿酯酶被抑制的程度(抑制率)來檢測蔬菜上的有機磷和氨基甲酸酯類農藥的殘留,具有快速方便、前處理簡單、成本較低等優點,能對有農藥殘留的蔬菜進行粗篩,將一部分農藥殘留含量較高的蔬菜控制在市場之外。但根據試驗的結果,不同廠家研發的酶制劑對具體農藥品種的特異性有差異,有的對克百威、甲萘威的檢測靈敏度高,有的對甲胺磷的檢測靈敏性高。所以,采購酶制劑時需根據實際需要,選擇對重點監控農藥殘留指標靈敏度高的產品。但若要擴大檢測項目范圍,建議對同一樣品分別使用多個廠家的酶制劑進行檢測。酶抑制劑普遍對毒死蜱的檢測靈敏度較低,需繼續開發特異性酶制劑。

除產品品牌、樣品種類等會對檢測結果產生影響外,操作時,培養溫度、酶的活性、樣品測試速度、比色皿潔凈度和儀器的維護等都會影響試驗結果[14-15],需操作人員注意。

參考文獻:

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(責任編輯：張瑞麟)

中圖分類號：S481+.8

文獻標志碼：B

文章編號：0528-9017(2016)04-0517-03

DOI10.16178/j.issn.0528-9017.20160421

收稿日期:2015-12-14

作者簡介:金 彬(1978—),浙江溫州人,農藝師,本科,從事農產品質量安全監控工作,E-mail:nbjinbin@126.com。