人乳頭瘤病毒基因分型檢測(cè)聯(lián)合液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查的臨床應(yīng)用

鄭景孟+莊慧杰

[摘要]目的研究并探討人乳頭瘤病毒（HPV）基因分型檢測(cè)聯(lián)合液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測(cè)（TCT）在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價(jià)值。方法于2015年5月～2016年6月，選取120例疑似宮頸癌患者作為此次研究的對(duì)象，所有患者均接受HPV檢測(cè)、TCT檢查，以病理診斷結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算HPV、TCT以及HPV+TCT對(duì)宮頸癌的診斷敏感性、特異性、準(zhǔn)確性。根據(jù)宮頸病變程度進(jìn)行分組，將患者分為CIN Ⅰ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)、宮頸癌，觀察不同宮頸病變程度的HPV病毒載量，并計(jì)算宮頸病變程度與HPV病毒載量之間的相關(guān)性。結(jié)果HPV的敏感性明顯高于TCT（P<0.05），TCT的特異性明顯高于HPV（P<0.05），兩種檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性相當(dāng)（P>0.05）；HPV+TCT的診斷準(zhǔn)確性為95.83%，較HPV、TCT更高（P<0.05）。宮頸病變程度與HPV病毒載量密切相關(guān)（P<0.05），且呈正相關(guān)。結(jié)論在宮頸癌的篩查中，HPV與TCT聯(lián)合診斷的準(zhǔn)確性高，可減少漏診、誤診。

[關(guān)鍵詞]宮頸癌；人乳頭瘤病毒；液基薄層細(xì)胞學(xué)；診斷

宮頸癌屬于臨床常見(jiàn)婦科癌癥，是最為常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤之一，其發(fā)病率呈現(xiàn)出增高趨勢(shì)，且發(fā)病年齡出現(xiàn)年輕化趨勢(shì)，對(duì)患者的生育功能和生命安全構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。早期篩查和診斷是確保宮頸癌患者得到及時(shí)有效治療的關(guān)鍵，目前，臨床上多采取液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)對(duì)宮頸癌進(jìn)行篩查，而忽視了人乳頭瘤病毒基因分型檢測(cè)在宮頸癌中的重要性，導(dǎo)致診斷準(zhǔn)確性不高，容易出現(xiàn)漏診，延誤患者的治療時(shí)機(jī)。本次研究為了探討宮頸癌篩查中人乳頭瘤病毒（HPV）基因分型檢測(cè)及液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）檢查的應(yīng)用意義，特于2015年5月～2016年6月選取120例疑似宮頸癌患者進(jìn)行HPV、TCT檢查，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

于2015年5月～2016年6月，選取120例疑似宮頸癌患者作為此次研究的對(duì)象，所有患者均符合此次研究的納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）出現(xiàn)陰道不規(guī)則出血、腰部墜痛、接觸性出血等癥狀；（2）存在宮頸癌病變的高危風(fēng)險(xiǎn)；（3）性生活史達(dá)到3年或早婚早育，部分患者具有多個(gè)性伴侶；（4）存在慢性宮頸病變、宮頸癌的家族史；（5）檢查時(shí)處于月經(jīng)干凈階段，且近2d內(nèi)無(wú)性生活；（6）白帶無(wú)異常。120例患者中，最小年齡患者為23歲，最大年齡患者為69歲，年齡均值為（45.17±15.62）歲，其中69例患者具有妊娠史，64例患者具有分娩史。所有患者在接受篩查前均對(duì)研究方法進(jìn)行了了解，均自愿參與此次研究。

1.2方法

所有患者均接受HPV檢測(cè)、TCT檢查，檢查前2d內(nèi)禁止性生活，禁止陰道沖洗、用藥。

HPV檢測(cè)：采用棉簽將宮頸分泌物擦去，采用專門的HPV高危8型采樣棉簽置于宮頸口，1min后，將采樣棉簽置入專門的試管中，于4℃環(huán)境下保存，在1～2d內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，采用反向點(diǎn)雜交法進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒為廣州安必平醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn)的HPV基因分型檢測(cè)試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，HPV病毒載量達(dá)到1000 copies/mL，即可判斷為陽(yáng)性，反之則為陰性。

TCT檢測(cè)：采用專門的TCT細(xì)胞采集刷置于宮頸管內(nèi)，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5～6周后，將細(xì)胞采集刷置入專門的小瓶中，于4℃環(huán)境下保存，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)送檢；將樣本進(jìn)行低速離心處理，制成均勻的單層細(xì)胞薄片，采用液基薄層細(xì)胞檢測(cè)試劑盒對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)。

病理活檢：采用陰道鏡在患者宮頸病變部位進(jìn)行多點(diǎn)取樣，將采集的宮頸組織進(jìn)行處理，甲醛固定，石蠟包埋，再進(jìn)行免疫組化檢測(cè)。

1.3觀察指標(biāo)

以病理活檢診斷結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算HPV、TCT以及HPV+TCT對(duì)宮頸癌的診斷敏感性、特異性、準(zhǔn)確性，并對(duì)兩組診斷結(jié)果進(jìn)行比較，敏感性=真陽(yáng)性/（真陽(yáng)性+假陰性），特異性=真陰性/（真陰性+假陽(yáng)性），準(zhǔn)確性=（真陽(yáng)性+真陰性）/總例數(shù)。根據(jù)宮頸病變程度進(jìn)行分組，將患者分為上皮內(nèi)瘤變（CIN Ⅰ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)）、宮頸癌，觀察不同宮頸病變程度的HPV病毒載量，并計(jì)算宮頸病變程度與HPV病毒載量之間的相關(guān)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有研究數(shù)據(jù)均錄入至SPSS17.0軟件中進(jìn)行處理，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，采用x²檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；將各變量錄入至corr程序中，計(jì)算其相關(guān)性系數(shù)（r），以P<0.05表示變量之間存在相關(guān)性，r為正數(shù)即正相關(guān)，反之則為負(fù)相關(guān)。

2結(jié)果

2.1兩種檢測(cè)方法的診斷結(jié)果比較

HPV對(duì)宮頸癌的診斷敏感性、特異性、準(zhǔn)確性分別為96.00%（72/75）、73.33%（33/45）、87.50%（105/120），TCT對(duì)宮頸癌的診斷敏感性、特異性、準(zhǔn)確性分別為84.00%（63/75）、91.1 1%（41/45）、86.67%（104/120），兩組比較，HPV的敏感性明顯高于TCT（P<0.05），但TCT的特異性明顯高于HPV（P<0.05），兩種檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性相當(dāng)（P>0.05）。HPV+TCT的診斷敏感性、特異性、準(zhǔn)確性分別為96.00%（72/75）、95.56%（43/45）、95.83%（115/120），其準(zhǔn)確性較HPV、TCT更高（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2不同宮頸病變程度HPV病毒載量比較及其與HPV病毒載量之間的相關(guān)性分析

宮頸癌患者有75例，宮頸上皮內(nèi)瘤變患者有45例，其中CIN Ⅰ級(jí)13例、CINⅡ級(jí)15例、CINⅢ級(jí)17例。宮頸病變程度與HPV病毒載量密切相關(guān)（P<0.05），且呈正相關(guān)，r=0.0685。見(jiàn)表2。

3討論

宮頸癌是一種常見(jiàn)的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，發(fā)病率較高，且其發(fā)病率出現(xiàn)增高趨勢(shì)，危害了廣大婦女的身體健康，還對(duì)患者的生命安全構(gòu)成嚴(yán)重的威脅。宮頸癌的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，但臨床上普遍認(rèn)為，宮頸癌的發(fā)生與宮頸高危型HPV感染有關(guān)，宮頸高危型HPV感染是導(dǎo)致宮頸發(fā)生癌變的重要因素，當(dāng)HPV病毒入侵機(jī)體，導(dǎo)致宮頸鱗狀上皮細(xì)胞發(fā)生感染，長(zhǎng)期發(fā)展往往會(huì)發(fā)展為宮頸癌，如患者未能得到及時(shí)的治療，很可能會(huì)導(dǎo)致死亡的發(fā)生，因此，臨床上有必要對(duì)宮頸癌進(jìn)行早期篩查，以盡早發(fā)現(xiàn)宮頸癌病變或?qū)m頸HPV感染。

目前，臨床上診斷宮頸癌最常用的方法為宮頸脫落細(xì)胞學(xué)檢查，隨著細(xì)胞學(xué)診斷技術(shù)的不斷發(fā)展，液基薄層細(xì)胞制片術(shù)逐漸取代宮頸脫落細(xì)胞學(xué)檢查，這種檢測(cè)方法主要是通過(guò)對(duì)宮頸細(xì)胞是否存在異型性，從而作出診斷，但其診斷結(jié)果往往會(huì)受到醫(yī)師的主觀經(jīng)驗(yàn)及取材部位的影響，容易出現(xiàn)漏診。本次研究中的TCT對(duì)宮頸癌的診斷敏感性、特異性、準(zhǔn)確性分別為84.00%、91.11%、86.67%，出現(xiàn)12例漏診患者，說(shuō)明TCT檢查盡管診斷特異性較高，但仍然存在著一定的局限性。由于HPV感染是導(dǎo)致宮頸癌變的重要前提和基礎(chǔ)，故臨床上可通過(guò)對(duì)HPV病毒進(jìn)行檢測(cè)，從而對(duì)宮頸癌進(jìn)行判斷，本次研究中，HPV對(duì)宮頸癌的診斷敏感性、特異性、準(zhǔn)確性分別為96.00%、73.33%、87.50%，出現(xiàn)12例誤診，說(shuō)明HPV檢測(cè)盡管可有效檢出宮頸癌，但也容易將宮頸良性病變誤診為宮頸癌，造成患者不必要的手術(shù)切除。而兩種檢測(cè)方法進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)，HPV的敏感性明顯高于TCT（P<0.05），但TCT的特異性明顯高于HPV（P<0.05），兩種檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性相當(dāng)（P>0.05），這提示我們?cè)谂R床診斷宮頸癌時(shí)，應(yīng)綜合HPV檢測(cè)、TCT檢查的結(jié)果，避免診斷誤差。而對(duì)兩種方法聯(lián)合診斷的準(zhǔn)確性進(jìn)行計(jì)算后發(fā)現(xiàn)，HPV+TCT的準(zhǔn)確性95.83%，其準(zhǔn)確性較HPV、TCT更高（P<0.05），漏診3例，誤診2例，證實(shí)了HPV檢測(cè)與TCT檢測(cè)聯(lián)合應(yīng)用對(duì)宮頸癌的診斷準(zhǔn)確性。

本次研究還對(duì)不同宮頸病變程度的HPV病毒載量進(jìn)行了比較，比較結(jié)果顯示，不同宮頸病變程度的HPV病毒載量不同，宮頸病變程度與HPV病毒載量密切相關(guān)（P<0.05），且呈正相關(guān)，說(shuō)明HPV病毒參與到了宮頸病變的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中。

綜上所述，在宮頸癌的篩查中，HPV具有高敏感性，TCT具有高特異性，兩種檢查方法可聯(lián)合應(yīng)用，還可將HPV病毒載量作為宮頸癌的腫瘤標(biāo)志物，以減少漏診、誤診。